摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
·植物挥发性物质 | 第12页 |
·昆虫触角上的化学感受器 | 第12-13页 |
·昆虫的气味分子结合蛋白(ODORANT-BINDING PROTEINS,OBPs) | 第13-20页 |
·OBPs的种类 | 第13-16页 |
·OBPs的分子结构 | 第16-18页 |
·OBPs的一般特性 | 第18-19页 |
·OBPs的功能 | 第19-20页 |
·OBPS的组织表达 | 第20-21页 |
·研究目的和意义 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
第二章 荧光定量PCR研究草地螟普通气味结合蛋白的组织特异性表达 | 第23-32页 |
·材料与方法 | 第24-28页 |
·虫源及饲养条件 | 第24页 |
·实验材料与试剂 | 第24-25页 |
·常用缓冲液 | 第25页 |
·常用仪器 | 第25页 |
·总RNA的提取 | 第25-26页 |
·cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
·引物的设计、合成及检测 | 第27页 |
·标准品曲线制备 | 第27页 |
·荧光定量PCR | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-30页 |
·引物特异性检测 | 第28页 |
·荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第28-29页 |
·Lsti-GOBP基因表达 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(LSTI-GOBPI)蛋白表达纯化及结合特性分析 | 第32-57页 |
·实验材料和方法 | 第33-46页 |
·供试昆虫 | 第33页 |
·实验材料及主要试剂 | 第33-34页 |
·常用培养基 | 第34页 |
·常用试剂与溶液 | 第34-38页 |
·常用仪器设备 | 第38页 |
·Lsti-GOBP1引物设计 | 第38页 |
·Lsti-GOBP cDNA第二链的合成 | 第38-39页 |
·琼脂糖胶纯化回收目的片段 | 第39-40页 |
·连接,转化与酶切 | 第40-41页 |
·T4 DNA Ligase连接 | 第41-42页 |
·Lsti-GOBP1原核表达载体的构建 | 第42页 |
·预装重力柱的填柱与重生 | 第42-43页 |
·Lsti-GOBP1蛋白1表达与纯化与透析袋的处理 | 第43-44页 |
·蛋白浓度测定 | 第44-45页 |
·Western印迹检测 | 第45页 |
·重组Lsti-GOBP1的荧光测定和结合 | 第45页 |
·重组Lsti-GOBP1蛋白内源荧光特征的检测 | 第45-46页 |
·竞争结合实验 | 第46页 |
·竞争结合实验数据分析 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-55页 |
·Lsti-GOBP1基因原核表达载体的构建 | 第46-48页 |
·Lsti-GOBP1蛋白表达与纯化 | 第48-49页 |
·重组Lsti-GOBP1蛋白荧光特征 | 第49-50页 |
·竞争结合实验 | 第50-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第四章 草地螟普通气味结合蛋白Ⅱ(LSTI-GOBP2)蛋白表达纯化及功能分析 | 第57-65页 |
·材料和方法 | 第58-59页 |
·供试昆虫 | 第58页 |
·实验材料及主要试剂 | 第58页 |
·常用培养基 | 第58页 |
·常用试剂与溶液 | 第58页 |
·常用仪器设备 | 第58页 |
·原核表达和蛋白纯化 | 第58-59页 |
·Western印迹检测 | 第59页 |
·荧光结合实验 | 第59页 |
·结果 | 第59-63页 |
·Lsit-GOBPZ基因原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
·Lsti-GOBPZ蛋白表达与纯化 | 第60-61页 |
·配基与Lsti-GOBP2的竞争结合 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
第五章 全文总结 | 第65-67页 |
·主要结论 | 第65页 |
·创新点 | 第65-66页 |
·进一步工作 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-79页 |
作者简介 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |