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草地螟普通气味分子结合蛋白的组织特异表达及结合特性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-23页
   ·植物挥发性物质第12页
   ·昆虫触角上的化学感受器第12-13页
   ·昆虫的气味分子结合蛋白(ODORANT-BINDING PROTEINS,OBPs)第13-20页
     ·OBPs的种类第13-16页
     ·OBPs的分子结构第16-18页
     ·OBPs的一般特性第18-19页
     ·OBPs的功能第19-20页
   ·OBPS的组织表达第20-21页
   ·研究目的和意义第21-22页
   ·技术路线第22-23页
第二章 荧光定量PCR研究草地螟普通气味结合蛋白的组织特异性表达第23-32页
   ·材料与方法第24-28页
     ·虫源及饲养条件第24页
     ·实验材料与试剂第24-25页
     ·常用缓冲液第25页
     ·常用仪器第25页
     ·总RNA的提取第25-26页
     ·cDNA第一链的合成第26-27页
     ·引物的设计、合成及检测第27页
     ·标准品曲线制备第27页
     ·荧光定量PCR第27-28页
   ·结果与分析第28-30页
     ·引物特异性检测第28页
     ·荧光定量PCR标准曲线的制备第28-29页
     ·Lsti-GOBP基因表达第29-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(LSTI-GOBPI)蛋白表达纯化及结合特性分析第32-57页
   ·实验材料和方法第33-46页
     ·供试昆虫第33页
     ·实验材料及主要试剂第33-34页
     ·常用培养基第34页
     ·常用试剂与溶液第34-38页
     ·常用仪器设备第38页
     ·Lsti-GOBP1引物设计第38页
     ·Lsti-GOBP cDNA第二链的合成第38-39页
     ·琼脂糖胶纯化回收目的片段第39-40页
     ·连接,转化与酶切第40-41页
     ·T4 DNA Ligase连接第41-42页
     ·Lsti-GOBP1原核表达载体的构建第42页
     ·预装重力柱的填柱与重生第42-43页
     ·Lsti-GOBP1蛋白1表达与纯化与透析袋的处理第43-44页
     ·蛋白浓度测定第44-45页
     ·Western印迹检测第45页
     ·重组Lsti-GOBP1的荧光测定和结合第45页
     ·重组Lsti-GOBP1蛋白内源荧光特征的检测第45-46页
     ·竞争结合实验第46页
     ·竞争结合实验数据分析第46页
   ·结果与分析第46-55页
     ·Lsti-GOBP1基因原核表达载体的构建第46-48页
     ·Lsti-GOBP1蛋白表达与纯化第48-49页
     ·重组Lsti-GOBP1蛋白荧光特征第49-50页
     ·竞争结合实验第50-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 草地螟普通气味结合蛋白Ⅱ(LSTI-GOBP2)蛋白表达纯化及功能分析第57-65页
   ·材料和方法第58-59页
     ·供试昆虫第58页
     ·实验材料及主要试剂第58页
     ·常用培养基第58页
     ·常用试剂与溶液第58页
     ·常用仪器设备第58页
     ·原核表达和蛋白纯化第58-59页
     ·Western印迹检测第59页
     ·荧光结合实验第59页
   ·结果第59-63页
     ·Lsit-GOBPZ基因原核表达载体的构建第59-60页
     ·Lsti-GOBPZ蛋白表达与纯化第60-61页
     ·配基与Lsti-GOBP2的竞争结合第61-63页
   ·讨论第63-65页
第五章 全文总结第65-67页
   ·主要结论第65页
   ·创新点第65-66页
   ·进一步工作第66-67页
参考文献第67-79页
作者简介第79-80页
致谢第80页

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