摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
第一章 前言 | 第9-21页 |
1.Nm23-H1/NDPK-A 概述 | 第9-10页 |
2.Nm23-H1/NDPK-A 主要生物学活性与功能 | 第10-18页 |
·Nm23-H1/NDPK-A 抗肿瘤转移功能 | 第10-13页 |
·Nm23-H1/NDPK-A 激酶活性 | 第13-16页 |
·Nm23-H1/NDPK-A 氧化还原调控与活性 | 第16-18页 |
3. Nm23-H1/NDPK-A 与药物开发 | 第18-19页 |
4.本研究的目的及意义 | 第19页 |
5.本研究的创新点 | 第19-20页 |
6.本研究的技术路线 | 第20-21页 |
第二章 pMO-NDPKA 野生型及突变体的重组构建及真核表达鉴定 | 第21-39页 |
1.实验材料 | 第21-25页 |
·主要仪器与设备 | 第21页 |
·菌种、质粒与细胞系 | 第21页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
·主要试剂配方 | 第22-25页 |
2.实验方法 | 第25-35页 |
·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 的重组构建 | 第25-32页 |
·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 重组质粒真核表达鉴定 | 第32-35页 |
3.实验结果 | 第35-38页 |
·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPK A C-S mutants 的重组构建 | 第35-37页 |
·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 重组质粒真核表达鉴定 | 第37-38页 |
4.讨论 | 第38-39页 |
第三章 NDPKA 与 AMPKs 体外磷酸化研究 | 第39-52页 |
1.实验材料 | 第39-42页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·细胞系与质粒 | 第40页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第40-41页 |
·主要试剂配方 | 第41-42页 |
2. 实验方法 | 第42-45页 |
·NDPK-A 野生型及突变体(S120E、S120D、S120A、H118F)质粒的瞬时转染 | 第42页 |
·蛋白提取与免疫共沉淀 | 第42-43页 |
·体外磷酸化实验 | 第43-44页 |
·免疫印迹分析 | 第44-45页 |
3. 实验结果 | 第45-49页 |
·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120E)与 AMPKs(AMPK-CA、AMPK-KD)的体外磷酸化 | 第45-47页 |
·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120D、S120E、H118F)与 AMPKs(AMPK-CA、AMPK-KD)的体外磷酸化 | 第47-48页 |
·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120D、S120E、H118F)与 AMPKs 体外磷酸化的结果汇总: | 第48-49页 |
4. 讨论 | 第49-52页 |
第四章 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用 | 第52-68页 |
1. 实验材料 | 第53-55页 |
·主要仪器与设备 | 第53页 |
·细胞系与实验小鼠 | 第53页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第53-54页 |
·主要试剂配方 | 第54-55页 |
2. 实验方法 | 第55-60页 |
·以外源转染过表达目的蛋白方式探究 NDPK-A、CFTR、AMPK 之间相互作用 | 第55-59页 |
·动物组织中内源性 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用关系探究 | 第59-60页 |
3 实验结果 | 第60-66页 |
·以外源转染过表达目的蛋白方式探究 NDPK-A、CFTR、AMPK 之间相互作用 | 第60-65页 |
·动物(小鼠)组织中内源性 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用关系探究 | 第65-66页 |
4.讨论 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
经费资助 | 第79-80页 |
附录 英文缩略词表 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |