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NDPK-A及突变体与AMPK体外磷酸化及相互作用蛋白研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-9页
第一章 前言第9-21页
 1.Nm23-H1/NDPK-A 概述第9-10页
 2.Nm23-H1/NDPK-A 主要生物学活性与功能第10-18页
   ·Nm23-H1/NDPK-A 抗肿瘤转移功能第10-13页
   ·Nm23-H1/NDPK-A 激酶活性第13-16页
   ·Nm23-H1/NDPK-A 氧化还原调控与活性第16-18页
 3. Nm23-H1/NDPK-A 与药物开发第18-19页
 4.本研究的目的及意义第19页
 5.本研究的创新点第19-20页
 6.本研究的技术路线第20-21页
第二章 pMO-NDPKA 野生型及突变体的重组构建及真核表达鉴定第21-39页
 1.实验材料第21-25页
   ·主要仪器与设备第21页
   ·菌种、质粒与细胞系第21页
   ·主要试剂与试剂盒第21-22页
   ·主要试剂配方第22-25页
 2.实验方法第25-35页
   ·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 的重组构建第25-32页
   ·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 重组质粒真核表达鉴定第32-35页
 3.实验结果第35-38页
   ·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPK A C-S mutants 的重组构建第35-37页
   ·pMO-NDPKA WT 、pMO-NDPKA C-S mutants 重组质粒真核表达鉴定第37-38页
 4.讨论第38-39页
第三章 NDPKA 与 AMPKs 体外磷酸化研究第39-52页
 1.实验材料第39-42页
   ·主要仪器设备第39-40页
   ·细胞系与质粒第40页
   ·主要试剂及试剂盒第40-41页
   ·主要试剂配方第41-42页
 2. 实验方法第42-45页
   ·NDPK-A 野生型及突变体(S120E、S120D、S120A、H118F)质粒的瞬时转染第42页
   ·蛋白提取与免疫共沉淀第42-43页
   ·体外磷酸化实验第43-44页
   ·免疫印迹分析第44-45页
 3. 实验结果第45-49页
   ·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120E)与 AMPKs(AMPK-CA、AMPK-KD)的体外磷酸化第45-47页
   ·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120D、S120E、H118F)与 AMPKs(AMPK-CA、AMPK-KD)的体外磷酸化第47-48页
   ·NDPK-A 野生型及突变体(S120A、S120D、S120E、H118F)与 AMPKs 体外磷酸化的结果汇总:第48-49页
 4. 讨论第49-52页
第四章 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用第52-68页
 1. 实验材料第53-55页
   ·主要仪器与设备第53页
   ·细胞系与实验小鼠第53页
   ·主要试剂及试剂盒第53-54页
   ·主要试剂配方第54-55页
 2. 实验方法第55-60页
   ·以外源转染过表达目的蛋白方式探究 NDPK-A、CFTR、AMPK 之间相互作用第55-59页
   ·动物组织中内源性 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用关系探究第59-60页
 3 实验结果第60-66页
   ·以外源转染过表达目的蛋白方式探究 NDPK-A、CFTR、AMPK 之间相互作用第60-65页
   ·动物(小鼠)组织中内源性 NDPK-A、CFTR、AMPK 相互作用关系探究第65-66页
 4.讨论第66-68页
结论第68-69页
展望第69-70页
参考文献第70-79页
经费资助第79-80页
附录 英文缩略词表第80-81页
致谢第81-82页

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