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TRAIL慢病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达

中文摘要第1-3页
Abstract第3-7页
引言第7-8页
第1章 实验材料第8-10页
   ·实验标本第8页
   ·主要仪器、设备第8-9页
   ·主要试剂第9-10页
第2章 实验方法第10-18页
   ·TRAIL重组表达载体的构建第10-13页
     ·引物设计与合成第10页
     ·目的基因的克隆和扩增第10页
     ·制备DH5α感受态细菌第10-11页
     ·PCR产物双酶切第11页
     ·pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-T2A-Puro的双酶切第11页
     ·将TRAIL基因片段与pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-T2A-Puro载体片段进行连接第11-12页
     ·转化反应第12页
     ·重组质粒鉴定第12-13页
   ·慢病毒颗粒的包装和生产第13-15页
     ·细胞培养第13-14页
     ·细胞转染第14-15页
     ·测定病毒滴度第15页
     ·慢病毒感染HepG2细胞第15页
   ·Western blotting检测慢病毒感染HepG2后TRAIL蛋白的表达第15-17页
   ·MTT检测细胞的增殖第17页
   ·裸鼠体内实验检测细胞的生长第17页
   ·统计学方法第17-18页
第3章 实验结果第18-22页
   ·携带TRAIL基因的慢病毒穿梭载体的构建第18页
   ·慢病毒的包装及滴度测定第18-19页
   ·最佳MOI值慢病毒感染HepG2第19页
   ·HepG2细胞TRAIL蛋白的表达第19-20页
   ·MTT检测细胞的增殖第20-21页
   ·表达TRAIL细胞系对裸鼠移植瘤体内生长的影响第21-22页
第4章 讨论第22-24页
结论第24-25页
参考文献第25-28页
文献综述第28-39页
 参考文献第35-39页
英文缩写词表第39-40页
攻读学位期间的研究成果第40-41页
致谢第41-42页

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