中文摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-7页 |
引言 | 第7-8页 |
第1章 实验材料 | 第8-10页 |
·实验标本 | 第8页 |
·主要仪器、设备 | 第8-9页 |
·主要试剂 | 第9-10页 |
第2章 实验方法 | 第10-18页 |
·TRAIL重组表达载体的构建 | 第10-13页 |
·引物设计与合成 | 第10页 |
·目的基因的克隆和扩增 | 第10页 |
·制备DH5α感受态细菌 | 第10-11页 |
·PCR产物双酶切 | 第11页 |
·pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-T2A-Puro的双酶切 | 第11页 |
·将TRAIL基因片段与pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-T2A-Puro载体片段进行连接 | 第11-12页 |
·转化反应 | 第12页 |
·重组质粒鉴定 | 第12-13页 |
·慢病毒颗粒的包装和生产 | 第13-15页 |
·细胞培养 | 第13-14页 |
·细胞转染 | 第14-15页 |
·测定病毒滴度 | 第15页 |
·慢病毒感染HepG2细胞 | 第15页 |
·Western blotting检测慢病毒感染HepG2后TRAIL蛋白的表达 | 第15-17页 |
·MTT检测细胞的增殖 | 第17页 |
·裸鼠体内实验检测细胞的生长 | 第17页 |
·统计学方法 | 第17-18页 |
第3章 实验结果 | 第18-22页 |
·携带TRAIL基因的慢病毒穿梭载体的构建 | 第18页 |
·慢病毒的包装及滴度测定 | 第18-19页 |
·最佳MOI值慢病毒感染HepG2 | 第19页 |
·HepG2细胞TRAIL蛋白的表达 | 第19-20页 |
·MTT检测细胞的增殖 | 第20-21页 |
·表达TRAIL细胞系对裸鼠移植瘤体内生长的影响 | 第21-22页 |
第4章 讨论 | 第22-24页 |
结论 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-28页 |
文献综述 | 第28-39页 |
参考文献 | 第35-39页 |
英文缩写词表 | 第39-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |