人类肿瘤基因治疗载体的高效制备和体外治疗效果评价
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRCT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| 1．1 肿瘤基因治疗 | 第8-14页 |
| 1．1．1 概述 | 第8-9页 |
| 1．1．2 肿瘤的发病机理 | 第9-10页 |
| 1．1．3 肿瘤基因治疗的载体 | 第10-12页 |
| 1．1．4 肿瘤的基因治疗方法 | 第12-14页 |
| 1．1．5 肿瘤基因治疗存在的问题 | 第14页 |
| 1．2 凋亡因子在肿瘤基因治疗中的应用 | 第14-17页 |
| 1．2．1 凋亡因子的抗肿瘤作用 | 第14-15页 |
| 1．2．2 细胞凋亡的检测 | 第15-17页 |
| 1．3 质粒载体的高效发酵生产 | 第17-26页 |
| 1．3．1 基因治疗对质粒载体的要求 | 第18页 |
| 1．3．2 影响质粒发酵的因素 | 第18-23页 |
| 1．3．3 质粒载体生产的下游过程 | 第23-26页 |
| 第二章 发酵培养基的优化 | 第26-37页 |
| 2．1 材料和方法 | 第26-27页 |
| 2．1．1 菌种和培养基 | 第26-27页 |
| 2．1．2 实验方法及培养条件 | 第27页 |
| 2．1．3 分析方法 | 第27页 |
| 2．2 培养基组分的初步优化 | 第27-31页 |
| 2．3 培养基组分的进一步优化 | 第31-36页 |
| 2．3．1 碳源 | 第31-33页 |
| 2．3．2 氮源 | 第33-35页 |
| 2．3．3 无机盐和微量元素 | 第35-36页 |
| 2．4 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 摇瓶发酵条件研究 | 第37-42页 |
| 3．1 材料与方法 | 第37页 |
| 3．2 发酵温度对质粒生产的影响 | 第37-39页 |
| 3．3 氯霉素的加入对质粒生产的影响 | 第39-40页 |
| 3．4 乙酸积累对质粒生产的影响 | 第40-41页 |
| 3．5 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 2L小型罐发酵生产质粒研究 | 第42-47页 |
| 4．1 材料和方法 | 第42页 |
| 4．2 结果与讨论 | 第42-47页 |
| 4．2．1 间歇发酵 | 第42-44页 |
| 4．2．2 流加发酵 | 第44-46页 |
| 4．2．3 间歇发酵与流加发酵的比较 | 第46-47页 |
| 第五章 肿瘤基因治疗的体外实验 | 第47-49页 |
| 5．1 方法及材料 | 第47页 |
| 5．1．1 试剂及材料 | 第47页 |
| 5．1．2 实验方法 | 第47页 |
| 5．2 实验结果及讨论 | 第47-49页 |
| 第六章 凋亡因子基因的克隆与表达 | 第49-55页 |
| 6．1 材料与方法 | 第49-52页 |
| 6．1．1 材料与试剂 | 第49页 |
| 6．1．2 质粒抽提 | 第49页 |
| 6．1．2 PCR反应 | 第49-50页 |
| 6．1．3 PCR产物克隆 | 第50-51页 |
| 6．1．4 表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 6．2 克隆载体的鉴定 | 第52-55页 |
| 第七章 结论及展望 | 第55-56页 |
| 7．1 结论 | 第55页 |
| 7．2 展望 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 附录一 碱法小规模提取质粒 | 第56-57页 |
| 附录二 基因组DNA的小规模提取 | 第57-58页 |
| 附录三 实验中用到的试剂与缓冲液的组成 | 第58-59页 |
| 附录四 磷酸钙转染法 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
