| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1 PNPLA3 简介 | 第14-26页 |
| ·patatin，PNPLA3 家族的前身 | 第14-15页 |
| ·PNPLA3 的发现与功能鉴定 | 第15-19页 |
| ·PNPLA3 基因与 NAFLD | 第19-25页 |
| ·新视野 | 第25-26页 |
| ·总结 | 第26页 |
| 2 非酒精性脂肪肝动物实验模型研究进展 | 第26-34页 |
| ·基因改良型实验动物模型 | 第27-30页 |
| ·饮食诱发型实验动物模型 | 第30-32页 |
| ·混合型实验动物模型 | 第32-33页 |
| ·总结 | 第33-34页 |
| 第二章 PNPLA3I148M 多态性与非酒精性脂肪性肝病及慢性乙肝遗传易感性的相关性研究 | 第34-61页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| 第1节 实验资料和方法 | 第35-45页 |
| ·受试者 | 第35-39页 |
| ·设备和仪器 | 第39-40页 |
| ·分子生物学相关试剂 | 第40页 |
| ·实验步骤 | 第40-44页 |
| ·统计学分析 | 第44-45页 |
| ·实验的路线图 | 第45页 |
| 第2节 结果 | 第45-53页 |
| ·一般特征比较 | 第45-46页 |
| ·各项生化指标的比较 | 第46-48页 |
| ·NAFLD 及 CHB 与 PNPLA3 基因 I148M 多态性（rs738409[G]）的相关性 | 第48-53页 |
| 第3节 讨论 | 第53-59页 |
| ·全基因组关联分析（Genome-Wide Association Study GWAS）与 NAFLD的发病机制 | 第53-55页 |
| ·NAFLD 与代谢综合征关系探讨 | 第55-56页 |
| ·NAFLD 及代谢综合征与 PNPLA3 基因多态性（rs738409[G]）的关系 | 第56-57页 |
| ·CHB 与 PNPLA3 基因多态性（rs738409[G]）的关系 | 第57-58页 |
| ·目前问题与未来展望 | 第58-59页 |
| 第4节 结论 | 第59-61页 |
| 第三章 PNPLA3 基因 I148M 多态性在体外培养肝细胞中的作用研究 | 第61-90页 |
| 引言 | 第61-62页 |
| 第1节 实验资料 | 第62-65页 |
| ·质粒、菌株、细胞和主要试剂 | 第62-63页 |
| ·实验仪器与设备 | 第63-64页 |
| ·试剂的配制 | 第64-65页 |
| 第2节 方法 | 第65-75页 |
| ·人肝癌细胞株 Huh-7 的培养 | 第65-66页 |
| ·小鼠原代肝细胞的分离与培养 | 第66-67页 |
| ·慢病毒载体构建 | 第67-71页 |
| ·慢病毒包装 | 第71-72页 |
| ·慢病毒感染 Huh-7 细胞 | 第72页 |
| ·慢病毒感染小鼠原代肝细胞 | 第72页 |
| ·Western blot 检测 PNPLA3 蛋白过表达 | 第72-74页 |
| ·油红 O 染色 | 第74页 |
| ·细胞内脂质代谢相关产物的检测 | 第74-75页 |
| ·过表达不同目的基因的细胞对降脂药辛伐他汀的敏感性检测 | 第75页 |
| 第3节 结果 | 第75-86页 |
| 第4节 讨论 | 第86-89页 |
| 第5节 结论 | 第89-90页 |
| 第四章 PNPLA3 I148M 肝脏特异表达质粒构建 | 第90-109页 |
| 引言 | 第90-91页 |
| 第1节 实验资料 | 第91-92页 |
| ·耗材 | 第91页 |
| ·主要试剂及主要配方 | 第91页 |
| ·主要仪器设备 | 第91-92页 |
| 第2节 实验方法 | 第92-101页 |
| ·引物设计 | 第92-93页 |
| ·构建 PNPLA3 I148M 质粒 | 第93-96页 |
| ·扩增肝脏特异表达启动子 ALB | 第96-97页 |
| ·连接肝脏特异性启动子 ALB 和 PNPLA3 I148M | 第97-100页 |
| ·PNPLA3 I148M 质粒 western blot 过表达验证 | 第100-101页 |
| 第3节 结果 | 第101-108页 |
| ·PNPLA3 I148M 质粒的构建 | 第101-103页 |
| ·肝脏特异性表达启动子 ALB 的获取 | 第103-104页 |
| ·将 ABL 连接至 PNPLA3 I148M 上游 | 第104-106页 |
| ·PNPLA3 I148M 肝脏特异表达质粒表达验证 | 第106-107页 |
| ·载体线性化 | 第107-108页 |
| 第4节 小结 | 第108-109页 |
| 第五章 PNPLA3 基因 I148M 单核苷酸多态性的分子动力学模拟揭示了受限的底物进入酶催化腔过程 | 第109-119页 |
| 引言 | 第109-110页 |
| 第1节 材料和方法 | 第110-111页 |
| ·PNPLA3 基因的同源模建 | 第110页 |
| ·软脂酸模拟系统及参数生成 | 第110-111页 |
| 第2节 分子动力学模拟 | 第111页 |
| 第3节 柔性对接及酶与底物结合自由能的计算 | 第111页 |
| 第4节 结果 | 第111-119页 |
| ·PNPLA3 的构像模型及通过分子动力学的精确模拟 | 第111-113页 |
| ·野生型及突变型酶系的动力学特性 | 第113-116页 |
| ·底物结合系统的动力学特性 | 第116-119页 |
| 第5节 讨论 | 第119页 |
| 致谢1 | 第119-120页 |
| 结论与创新 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-145页 |
| 缩略语 | 第145-146页 |
| 致谢2 | 第146-147页 |
| 个人简历 | 第147页 |
| 发表的学术论文 | 第147-148页 |
