| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| ·脑膜炎的流行病学特性 | 第8-9页 |
| ·脑膜炎的发病原因及预防措施 | 第9-10页 |
| ·发病机制 | 第9页 |
| ·免疫性 | 第9页 |
| ·预防措施 | 第9-10页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏菌是流行性脑膜炎的病原菌 | 第10-11页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏菌的国内外研究现状 | 第11-17页 |
| ·研究的主要内容 | 第17页 |
| ·研究的目的意义 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-19页 |
| 第二章 脑膜炎奈瑟氏菌的分离及鉴定 | 第19-22页 |
| ·实验材料及仪器设备 | 第19页 |
| ·培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏菌分离鉴定的结果 | 第20-22页 |
| 第三章 脑膜炎奈瑟氏菌NspA基因的克隆与序列分析 | 第22-36页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·药品、载体及材料 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·培养基的配制 | 第23页 |
| ·大肠杆菌DH5 α感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·实验所用溶液 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏菌冷冻真空干燥保存 | 第25页 |
| ·菌种的复苏 | 第25页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏菌基因组的提取 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增NspA基因 | 第26页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的回收 | 第27页 |
| ·PMD-18T-NspA质粒载体重组构建 | 第27-28页 |
| ·PMD-18T-NspA重组质粒的转化 | 第28页 |
| ·重组质粒DNA的小量制备 | 第28-29页 |
| ·pMD-18T-NspA重组质粒的鉴定 | 第29-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-34页 |
| ·基因组DNA的提取结果 | 第31页 |
| ·脑膜炎萘瑟氏菌NspA基因的PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| ·PCR产物的回收结果 | 第32页 |
| ·pMD18T-NspA重组质粒电泳图谱 | 第32-33页 |
| ·重组阳性克隆质粒PMD-18T-NspA的筛选与鉴定 | 第33页 |
| ·目的基因片段序列测序结果和同源性分析 | 第33-34页 |
| ·实验讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 NspA基因重组乳酸菌表达载体的构建及原核表达 | 第36-44页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·实验药品 | 第36-37页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·实验所用溶液 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·PMD18T-NspA及pSIP-409空质粒的双酶切 | 第38-39页 |
| ·pSIP-409-NspA重组质粒的构建 | 第39页 |
| ·pSIP-409-NspA重组质粒载体的转化 | 第39页 |
| ·pSIP-409-NspA重组质粒载体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·重组质粒表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-43页 |
| ·NspA基因和pSIP-409载体回收 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pSIP-409-NspA的小量提取 | 第41页 |
| ·重组质粒pSIP-409-NspA的PCR和酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE检测结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
