| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语中英文对照 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一章 乳腺生物反应器和β-乳球蛋白 | 第12-18页 |
| 1. 动物乳腺生物反应器 | 第12-13页 |
| ·动物乳腺生物反应器的优点 | 第12-13页 |
| ·动物乳腺生物反应器的应用 | 第13页 |
| 2. β-乳球蛋白 | 第13-14页 |
| ·β-乳球蛋白 | 第13-14页 |
| ·β-乳球蛋白的致敏性 | 第14页 |
| ·β-乳球蛋白的调控序列 | 第14页 |
| 参考文献 | 第14-18页 |
| 第二章 锌指核酸酶技术 | 第18-28页 |
| 1. 锌指核酸酶的结构及作用原理 | 第18-20页 |
| ·锌指核酸酶的结构 | 第18-19页 |
| ·锌指核酸酶作用原理 | 第19-20页 |
| 2. 锌指核酸酶的设计 | 第20-21页 |
| ·MA方法 | 第20页 |
| ·OPEN方法 | 第20-21页 |
| ·CoDA方法 | 第21页 |
| 3. 锌指核酸酶的应用 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 第二部分 试验部分 | 第28-76页 |
| 第三章 ZFN通用表达载体的构建 | 第28-50页 |
| 摘要 | 第28-29页 |
| 1. 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| ·真核表达载体NI3AX·pTARGET的构建 | 第32-35页 |
| ·载体NIPT·PSV的构建 | 第35-36页 |
| ·载体PSVRed·CMV的构建 | 第36-38页 |
| ·ZFN通用表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·ZFN通用表达载体pRVNF和pRVNFw载体的构建 | 第39-40页 |
| 2. 结果与分析 | 第40-45页 |
| ·pTARGET真核表达片段的克隆及鉴定 | 第40-41页 |
| ·真核表达载体NI3AX·pTARGET的鉴定 | 第41页 |
| ·NI3AX·pTARGET载体真核表达能力的检测 | 第41-42页 |
| ·载体NI3PT·PSV的鉴定 | 第42-43页 |
| ·载体PSVRed·CMV的鉴定 | 第43-45页 |
| ·载体PRVNF和pRVNFw的鉴定 | 第45页 |
| 3. 讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 第四章 以山羊β-乳球蛋白为靶基因的ZFN构建 | 第50-56页 |
| 摘要 | 第50-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-52页 |
| ·试验材料 | 第51页 |
| ·Zinic Finger的设计 | 第51页 |
| ·ZFN的载体构建 | 第51-52页 |
| ·ZFN载体的真核表达验证 | 第52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·ZFN表达载体的鉴定 | 第52-53页 |
| ·ZFN真核表达的验证 | 第53-54页 |
| 3. 讨论 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第五章 ZFN筛选体系的探索 | 第56-76页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1. 材料与方法 | 第57-63页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·试验方法 | 第57-58页 |
| ·荧光标记ZFN筛选体系的探索 | 第58-61页 |
| ·酵母单杂交筛选体系的构建及探索 | 第61-62页 |
| ·PCR+聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选体系的探索 | 第62-63页 |
| 2. 结果与分析 | 第63-71页 |
| ·荧光标记ZFN筛选体系的探索 | 第63-66页 |
| ·酵母单杂交筛选体系的探索 | 第66-70页 |
| ·PCR+聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选体系的探索 | 第70-71页 |
| 3. 讨论 | 第71-73页 |
| ·荧光标记ZFN筛选体系的探索 | 第71-72页 |
| ·酵母单杂交筛选体系的探索 | 第72-73页 |
| ·PCR+聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选体系的探索 | 第73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 全文结论 | 第76-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |