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金属标记结合生物质谱的蛋白质组相对定量及绝对定量新方法研究

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 前言第12-20页
   ·定量蛋白质组学第12页
   ·稳定同位数标记在定量蛋白质组学中的应用第12-14页
   ·金属元素标记在定量蛋白质组学中的应用第14-15页
   ·基于质谱技术的蛋白质 N-末端肽的鉴定及相对定量第15-17页
   ·双重等重标记的蛋白质组定量技术第17-19页
   ·本论文研究内容第19-20页
第二章 金属元素标记结合质谱用于蛋白质 N-末端肽的鉴定及相对定量新方法研究第20-40页
   ·实验部分第20-23页
     ·仪器与试剂第20-21页
     ·实验方法第21-23页
       ·蛋白质胍基化修饰第21页
       ·蛋白质金属标记和酶切第21页
       ·表明键合 DITC 的硅球合成及与酶切肽段的结合第21页
       ·腾冲嗜热菌全蛋白的提取第21-22页
       ·金属元素对腾冲嗜热菌全蛋白样本 N-末端肽的标记第22页
       ·质谱分析第22-23页
   ·结果和讨论第23-39页
     ·实验原理第23-25页
     ·蛋白质 N-末端肽胍基化效率考察第25-26页
     ·蛋白质 N-末端肽金属标记条件优化第26页
     ·基于 DITC-硅球的 N-末端肽的分离及质谱鉴定第26-29页
     ·基于 N-末端肽的蛋白质相对定量第29-31页
     ·不同温度培养腾冲嗜热菌 N-末端肽的鉴定及相对定量第31-39页
   ·本章小结第39-40页
第三章 (18)~O/金属等重标记结合质谱的蛋白质组绝对定量新方法研究第40-59页
   ·实验部分第40-45页
     ·仪器与试剂第40-41页
     ·实验方法第41-45页
       ·人肝微粒体定量串联体蛋白的制备第41-42页
         ·人肝微粒体 QconCAT 质粒构建第41页
         ·QconCAT 的表达和纯化第41-42页
       ·定量肽段和内标肽段的制备第42-43页
         ·QconCAT 蛋白的酶切及~(18)O 标记第42页
         ·~(18)O/~(16)O 肽段的金属标记第42-43页
       ·人肝微粒体蛋白质的提取、酶切和金属标记第43页
       ·质谱分析第43-45页
   ·结果与讨论第45-58页
     ·~(18)O/金属等重标记的原理和技术路线第45-46页
     ·~(18)O/金属等重标记用于蛋白质绝对定量分析实验流程第46页
     ·~(18)O/金属等重结合质谱蛋白质组绝对定量方法的建立第46-58页
       ·~(18)O/金属标记效率的考察第46-50页
       ·~(18)O/金属标记肽段的稳定性考察第50-51页
       ·~(18)O/金属标记肽段在食谱碰撞池中的碎裂行为考察第51-52页
       ·定量肽段母子离子对选择及质谱参数优化第52-53页
       ·~(18)O/金属标记肽段的色谱保留时间考察第53-54页
       ·定量肽段标准曲线的建立第54-55页
       ·~(18)O/金属等重标记结合质谱的蛋白质组绝对定量方法的应用第55-58页
   ·本章小结第58-59页
参考文献第59-65页
个人简历第65-67页
致谢第67-68页
综述第68-78页
 参考文献第74-78页

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