摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 文献综述及前言 | 第13-24页 |
1 植物激素 | 第13-19页 |
·茉莉素 | 第13-16页 |
·茉莉素的生物合成 | 第13-14页 |
·JA信号传导途径 | 第14-15页 |
·JA信号传导途径与其它信号传导途径的相互作用 | 第15-16页 |
·水杨酸 | 第16-17页 |
·水杨酸的生物合成 | 第16页 |
·水杨酸的信号途径 | 第16-17页 |
·SA与其他信号传导途径的交叉作用 | 第17页 |
·乙烯 | 第17-19页 |
·乙烯的生物合成 | 第17-18页 |
·乙烯的信号传导 | 第18页 |
·乙烯信号途径与其他信号途径的交叉作用 | 第18-19页 |
2 启动子 | 第19-22页 |
·启动子的基本结构及类型 | 第19页 |
·鉴定启动子中关键顺式作用元件的研究方法 | 第19-20页 |
·启动子的瞬时表达实验 | 第20页 |
·植物基因启动子中响应茉莉酸应答的顺式作用元件 | 第20-21页 |
·植物基因启动子中响应水杨酸应答的顺式作用元件 | 第21页 |
·植物基因启动子中响应乙烯应答的顺式作用元件 | 第21-22页 |
3 水稻转录因子基因OsWRKY12的研究进展 | 第22页 |
4 研究目标及主要研究内容 | 第22-24页 |
·研究的目的和意义 | 第22页 |
·主要研究内容 | 第22-23页 |
·技术路线 | 第23-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-41页 |
1 材料 | 第24-28页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·酶、生化试剂及试剂盒 | 第24页 |
·试剂配制 | 第24-28页 |
·DNA提取试剂 | 第25页 |
·质粒提取试剂 | 第25页 |
·感受态制备及转化试剂 | 第25页 |
·电泳缓冲液 | 第25-26页 |
·0.5mol/L EDTA(pH8.0)的配制 | 第26页 |
·抗生素的配制 | 第26页 |
·农杆菌感受态制备试剂 | 第26页 |
·农杆菌悬浮液 | 第26页 |
·GUS染色液 | 第26-27页 |
·激素的配制 | 第27-28页 |
·主要仪器与设备 | 第28页 |
2 方法 | 第28-41页 |
·基本实验方法 | 第28-34页 |
·水稻的培养 | 第28页 |
·烟草的培养 | 第28-29页 |
·水稻基因组DNA的提取——CTAB法 | 第29页 |
·质粒DNA的提取——碱裂解法 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第30-31页 |
·大肠杆菌热激转化 | 第31页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第31-32页 |
·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
·根癌农杆菌的化学法转化、转化子的检测及阳性克隆菌液的保藏 | 第32页 |
·瞬时表达实验 | 第32-34页 |
·OsWRKY12P的克隆与鉴定 | 第34-35页 |
·PCR扩增OsWRKY12P | 第34页 |
·PCR产物的回收 | 第34-35页 |
·OsWRKY12P与pMD_(18-T)连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态 | 第35页 |
·转化子的筛选与鉴定 | 第35页 |
·构建全长启动子的表达载体,进行瞬时表达实验 | 第35-37页 |
·EOsWRKY12P的扩增、克隆与鉴定 | 第35页 |
·构建全长表达载体p1381Z-EOsWRKY12P::GUS | 第35-37页 |
·瞬时表达实验 | 第37页 |
·启动子序列生物信息学分析 | 第37页 |
·构建5’端缺失启动子的表达载体,进行瞬时表达实验 | 第37-41页 |
·P1/P2/P3/P4的扩增、克隆与鉴定 | 第38页 |
·构建缺失启动子的表达载体p1381Z-P1/P2/P3/P4::GUS | 第38-39页 |
·瞬时表达实验 | 第39-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-52页 |
1 OsWRKY12P的克隆与鉴定 | 第41-43页 |
·水稻总DNA的提取 | 第41页 |
·OsWRKY12P的扩增与鉴定 | 第41-43页 |
·OsWRKY12P的PCR扩增 | 第41-42页 |
·OsWRKY12P的PCR产物克隆 | 第42页 |
·OsWRKY12P的测序鉴定 | 第42-43页 |
2 构建全长启动子的表达载体,进行瞬时表达实验 | 第43-46页 |
·EOsWRKY12P的扩增、克隆和鉴定 | 第43-44页 |
·EOsWRKY12P的PCR扩增 | 第43页 |
·EOsWRKY12P的克隆和鉴定 | 第43-44页 |
·构建全长启动子的表达载体 | 第44-45页 |
·全长启动子的瞬时表达实验 | 第45-46页 |
·质粒p1381Z-EOsWRKY12P::GUS转化至农杆菌 | 第45-46页 |
·瞬时表达分析 | 第46页 |
3 启动子序列的生物信息学分析 | 第46-48页 |
4 构建片段缺失的启动子表达载体,进行瞬时表达实验 | 第48-52页 |
·5’端缺失启动子P1/P2/P3/P4的扩增、克隆与鉴定 | 第48-49页 |
·P1/P2/P3/P4的PCR扩增 | 第48页 |
·P1/P2/P3/P4的PCR产物克隆与鉴定 | 第48-49页 |
·构建缺失启动子的表达载体 | 第49-50页 |
·5’端缺失启动子的瞬时表达实验 | 第50-52页 |
·质粒p1381Z-P1/P2/P3/P4::GUS转化至农杆菌 | 第50-51页 |
·瞬时表达分析 | 第51-52页 |
第四章 讨论 | 第52-54页 |
第五章 结论、创新点及下一步工作设想 | 第54-55页 |
1 结论 | 第54页 |
2 创新点 | 第54页 |
3 下一步工作计划 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |