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OsWRKY12启动子序列响应SA、MeJA和ET应答元件的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 文献综述及前言第13-24页
 1 植物激素第13-19页
   ·茉莉素第13-16页
     ·茉莉素的生物合成第13-14页
     ·JA信号传导途径第14-15页
     ·JA信号传导途径与其它信号传导途径的相互作用第15-16页
   ·水杨酸第16-17页
     ·水杨酸的生物合成第16页
     ·水杨酸的信号途径第16-17页
     ·SA与其他信号传导途径的交叉作用第17页
   ·乙烯第17-19页
     ·乙烯的生物合成第17-18页
     ·乙烯的信号传导第18页
     ·乙烯信号途径与其他信号途径的交叉作用第18-19页
 2 启动子第19-22页
   ·启动子的基本结构及类型第19页
   ·鉴定启动子中关键顺式作用元件的研究方法第19-20页
   ·启动子的瞬时表达实验第20页
   ·植物基因启动子中响应茉莉酸应答的顺式作用元件第20-21页
   ·植物基因启动子中响应水杨酸应答的顺式作用元件第21页
   ·植物基因启动子中响应乙烯应答的顺式作用元件第21-22页
 3 水稻转录因子基因OsWRKY12的研究进展第22页
 4 研究目标及主要研究内容第22-24页
   ·研究的目的和意义第22页
   ·主要研究内容第22-23页
   ·技术路线第23-24页
第二章 材料和方法第24-41页
 1 材料第24-28页
   ·菌株与质粒第24页
   ·植物材料第24页
   ·培养基第24页
   ·酶、生化试剂及试剂盒第24页
   ·试剂配制第24-28页
     ·DNA提取试剂第25页
     ·质粒提取试剂第25页
     ·感受态制备及转化试剂第25页
     ·电泳缓冲液第25-26页
     ·0.5mol/L EDTA(pH8.0)的配制第26页
     ·抗生素的配制第26页
     ·农杆菌感受态制备试剂第26页
     ·农杆菌悬浮液第26页
     ·GUS染色液第26-27页
     ·激素的配制第27-28页
   ·主要仪器与设备第28页
 2 方法第28-41页
   ·基本实验方法第28-34页
     ·水稻的培养第28页
     ·烟草的培养第28-29页
     ·水稻基因组DNA的提取——CTAB法第29页
     ·质粒DNA的提取——碱裂解法第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第30-31页
     ·大肠杆菌热激转化第31页
     ·阳性克隆的鉴定第31-32页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的制备第32页
     ·根癌农杆菌的化学法转化、转化子的检测及阳性克隆菌液的保藏第32页
     ·瞬时表达实验第32-34页
   ·OsWRKY12P的克隆与鉴定第34-35页
     ·PCR扩增OsWRKY12P第34页
     ·PCR产物的回收第34-35页
     ·OsWRKY12P与pMD_(18-T)连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态第35页
     ·转化子的筛选与鉴定第35页
   ·构建全长启动子的表达载体,进行瞬时表达实验第35-37页
     ·EOsWRKY12P的扩增、克隆与鉴定第35页
     ·构建全长表达载体p1381Z-EOsWRKY12P::GUS第35-37页
     ·瞬时表达实验第37页
   ·启动子序列生物信息学分析第37页
   ·构建5’端缺失启动子的表达载体,进行瞬时表达实验第37-41页
     ·P1/P2/P3/P4的扩增、克隆与鉴定第38页
     ·构建缺失启动子的表达载体p1381Z-P1/P2/P3/P4::GUS第38-39页
     ·瞬时表达实验第39-41页
第三章 结果与分析第41-52页
 1 OsWRKY12P的克隆与鉴定第41-43页
   ·水稻总DNA的提取第41页
   ·OsWRKY12P的扩增与鉴定第41-43页
     ·OsWRKY12P的PCR扩增第41-42页
     ·OsWRKY12P的PCR产物克隆第42页
     ·OsWRKY12P的测序鉴定第42-43页
 2 构建全长启动子的表达载体,进行瞬时表达实验第43-46页
   ·EOsWRKY12P的扩增、克隆和鉴定第43-44页
     ·EOsWRKY12P的PCR扩增第43页
     ·EOsWRKY12P的克隆和鉴定第43-44页
   ·构建全长启动子的表达载体第44-45页
   ·全长启动子的瞬时表达实验第45-46页
     ·质粒p1381Z-EOsWRKY12P::GUS转化至农杆菌第45-46页
     ·瞬时表达分析第46页
 3 启动子序列的生物信息学分析第46-48页
 4 构建片段缺失的启动子表达载体,进行瞬时表达实验第48-52页
   ·5’端缺失启动子P1/P2/P3/P4的扩增、克隆与鉴定第48-49页
     ·P1/P2/P3/P4的PCR扩增第48页
     ·P1/P2/P3/P4的PCR产物克隆与鉴定第48-49页
   ·构建缺失启动子的表达载体第49-50页
   ·5’端缺失启动子的瞬时表达实验第50-52页
     ·质粒p1381Z-P1/P2/P3/P4::GUS转化至农杆菌第50-51页
     ·瞬时表达分析第51-52页
第四章 讨论第52-54页
第五章 结论、创新点及下一步工作设想第54-55页
 1 结论第54页
 2 创新点第54页
 3 下一步工作计划第54-55页
参考文献第55-61页
附录第61-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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