| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-15页 |
| ·苹果芽变育种的现状以及研究意义 | 第8-9页 |
| ·苹果芽变育种的现状 | 第8页 |
| ·苹果芽变育种的研究意义 | 第8-9页 |
| ·苹果芽变的研究进展 | 第9-10页 |
| ·芽变机理的研究方法及进展 | 第9-10页 |
| ·苹果短枝型芽变的研究进展 | 第10页 |
| ·植物逆转座子研究进展 | 第10-12页 |
| ·逆转座子的分类及结构 | 第10-11页 |
| ·植物逆转座子特性 | 第11页 |
| ·基于植物逆转座子的分子标记及其应用 | 第11-12页 |
| ·关于 SCAR 标记的研究 | 第12页 |
| ·两种方法扩增已知片段旁侧序列的研究进展 | 第12-14页 |
| ·IPCR 扩增旁侧序列 | 第12-13页 |
| ·TAIL-PCR 扩增旁侧序列 | 第13-14页 |
| ·展望 | 第14-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| ·反向 PCR 扩增逆转座子 atr1 的部分序列 | 第16页 |
| ·苹果元帅系短枝变异品种中特异性片段的分离 | 第16页 |
| ·短枝变异品种中特异片段侧翼序列的分离 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-24页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第17页 |
| ·DNA 的检测与定量 | 第17-18页 |
| ·目的产物的回收与纯化 | 第18页 |
| ·回收产物与 pMD18-T 载体的连接 | 第18页 |
| ·回收产物与 pEASY-T1 载体的连接 | 第18页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第18-19页 |
| ·目的片段检测 | 第19页 |
| ·IPCR 扩增 atr1-LTRs 旁侧序列 | 第19-20页 |
| ·反向引物设计 | 第19页 |
| ·酶切与自身环化连接体系 | 第19-20页 |
| ·反应体系及程序 | 第20页 |
| ·目的条带的克隆及测序 | 第20页 |
| ·目的条带的验证 | 第20页 |
| ·苹果元帅系短枝变异品种的 IRAP-PCR 扩增 | 第20页 |
| ·特异片段转化的验证 | 第20-21页 |
| ·TAIL-PCR 扩增“玫瑰红”中特异片段的侧翼序列 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·反应体系和程序 | 第21-22页 |
| ·分离、测序及序列验证 | 第22页 |
| ·TAIL-PCR 扩增“华帅 1 号”特异片段的侧翼序列 | 第22-24页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·反应体系和程序 | 第22-23页 |
| ·分离、测序及验证 | 第23-24页 |
| 4 结果与分析 | 第24-36页 |
| ·苹果基因组 DNA 的提取 | 第24页 |
| ·IPCR 扩增 atr1-LTRs 侧翼序列 | 第24-28页 |
| ·反向 PCR 结果 | 第24-25页 |
| ·atr1-LTRs 片段的验证 | 第25-28页 |
| ·苹果元帅短枝变异品种的 IRAP-PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·特异片段的验证 | 第29-30页 |
| ·TAIL-PCR 扩增“玫瑰红”特异片段 Mgh1 的侧翼序列 | 第30-32页 |
| ·TAIL-PCR 扩增“华帅 1 号”特异片段 Hs2 的侧翼序列 | 第32-36页 |
| 5 讨论 | 第36-38页 |
| ·IPCR 的应用及存在的问题 | 第36页 |
| ·IPAR 标记的应用潜力 | 第36-37页 |
| ·关于 SCAR 标记转化的研究 | 第37页 |
| ·TAIL-PCR 的应用及存在的问题 | 第37-38页 |
| 6 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
