甘蓝型油菜细胞核雄性不育恢复基因BnMs5~α的克隆
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-27页 |
| ·植物雄性不育的研究 | 第12-15页 |
| ·植物雄性不育 | 第12页 |
| ·细胞质雄性不育 | 第12-13页 |
| ·细胞核雄性不育 | 第13-15页 |
| ·油菜雄性不育与杂种优势利用 | 第15-16页 |
| ·油菜细胞质雄性不育 | 第16页 |
| ·油菜细胞核雄性不育 | 第16页 |
| ·甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育的研究进展 | 第16-20页 |
| ·甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育的遗传 | 第16-17页 |
| ·甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育的细胞学 | 第17-18页 |
| ·甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育的分子机理 | 第18-20页 |
| ·芸薹属作物之间及其与拟南芥的比较基因组的研究 | 第20-23页 |
| ·芸薹属作物的基因组 | 第20-21页 |
| ·芸薹属作物的比较基因组学 | 第21-22页 |
| ·芸薹属作物与拟南芥之间的比较基因组学 | 第22-23页 |
| ·油菜基因的图位克隆 | 第23-27页 |
| ·图位克隆的基本原理与方法 | 第23-25页 |
| ·甘蓝型油菜中图位克隆的策略 | 第25-27页 |
| 2 本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 3 材料和方法 | 第28-37页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·群体构建 | 第28-29页 |
| ·基因组的比较作图及BnMs5位点亚基因组起源 | 第29页 |
| ·BAC克隆的分组及目标克隆的鉴定 | 第29-30页 |
| ·BAC文库 | 第29-30页 |
| ·BAC克隆的分组及目标BAC克隆的鉴定 | 第30页 |
| ·BAC克隆的测序 | 第30页 |
| ·分子标记开发和利用 | 第30-31页 |
| ·候选基因的预测和亲本序列的分离 | 第31-32页 |
| ·候选基因的预测及生物信息学分析 | 第31页 |
| ·目标区段亲本序列的分离及其比较测序 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA步行 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第32-34页 |
| ·载体与菌株 | 第32-33页 |
| ·遗传转化的受体材料 | 第33页 |
| ·遗传转化互补表达载体的构建 | 第33页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的检测 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的育性观察 | 第35页 |
| ·BnMs5各拷贝的分离 | 第35页 |
| ·候选基因的表达分析 | 第35-37页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的合成 | 第35-36页 |
| ·候选基因的RT-PCR分析 | 第36-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-58页 |
| ·BnMs5位点的起源分析 | 第37-39页 |
| ·BAC克隆的分组及目标克隆的鉴定 | 第39-45页 |
| ·BAC克隆的分组 | 第39-42页 |
| ·新标记的开发 | 第42-45页 |
| ·目标BAC克隆的鉴定 | 第45页 |
| ·BnMs5位点的物理图谱及基因预测 | 第45-48页 |
| ·亲本序列的比较分析及候选基因的确定 | 第48-51页 |
| ·候选基因的转化验证 | 第51-56页 |
| ·互补表达载体构建及遗传转化 | 第52-53页 |
| ·阳性转化单株的鉴定 | 第53页 |
| ·阳性转化单株的表型鉴定 | 第53-56页 |
| ·基因BnMs5的结构 | 第56-57页 |
| ·基因BnMs5的拷贝数分析 | 第57-58页 |
| 5 讨论 | 第58-65页 |
| ·甘蓝型油菜基因图位克隆的趋势 | 第58页 |
| ·目标BAC克隆鉴定的综合策略 | 第58-60页 |
| ·BnMs5连锁标记的开发与目标序列的鉴定 | 第60-61页 |
| ·BnMs5候选基因的确定 | 第61页 |
| ·BnMs5位点的染色体进化 | 第61-63页 |
| ·BnMs5的进化及机理推测 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-80页 |
| 附录1 BAC克隆分组用到的相关引物 | 第80-81页 |
| 附录2 候选基因RT-PCR用到的相关引物 | 第81-82页 |
| 附录3 候选基因区段比较测序的相关引物 | 第82页 |
| 附录4 研究生期间发表的文章 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
