| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-14页 |
| 英文缩写注解 | 第14-16页 |
| 技术路线图 | 第16-23页 |
| 1 CXCR1/2在胃癌中表达及与临床病理参数的关系 | 第23-44页 |
| ·前言 | 第23-26页 |
| ·实验材料与方法 | 第26-31页 |
| ·组织标本及临床资料 | 第26页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第26-29页 |
| ·实验试剂 | 第26-28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29页 |
| ·实验步骤 | 第29-31页 |
| ·HE染色及病理学诊断 | 第29-30页 |
| ·免疫组化SABC法 | 第30-31页 |
| ·统计学处理 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-40页 |
| ·CXCR1/2在胃癌中表达及其与临床病理特征的关系 | 第31-33页 |
| ·CXCR1/2与ERK和AKT磷酸化、凋亡、增殖、血管新生及侵袭转移等指标的相关性 | 第33-36页 |
| ·ERK和AKT磷酸化与凋亡增殖、血管新生及侵袭转移等指标的相关性 | 第36-37页 |
| ·预后因子与胃癌TNM分期 | 第37-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 2 靶向阻断CXCR1/2对胃癌生物学行为的影响及其机制 | 第44-77页 |
| ·前言 | 第44-45页 |
| ·实验材料与方法 | 第45-63页 |
| ·实验材料 | 第45-52页 |
| ·细胞株 | 第45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·主要抗体 | 第45-46页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第46-47页 |
| ·主要试剂盒 | 第47页 |
| ·试剂配制 | 第47-50页 |
| ·实验仪器 | 第50-52页 |
| ·技术路线 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-62页 |
| ·细胞培养 | 第52页 |
| ·实验分组 | 第52-53页 |
| ·Western-blotting操作流程 | 第53-55页 |
| ·细胞总RNA的提取和鉴定 | 第55-56页 |
| ·逆转录反应 | 第56页 |
| ·荧光定量PCR | 第56-58页 |
| ·普通RCR反应 | 第58页 |
| ·ELISA检测IL-8 | 第58-59页 |
| ·MTT实验 | 第59页 |
| ·克隆形成实验 | 第59-60页 |
| ·细胞周期实验 | 第60页 |
| ·凋亡实验 | 第60-61页 |
| ·细胞迁移和侵袭实验 | 第61-62页 |
| ·免疫组化 | 第62页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第62页 |
| ·统计分析 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-74页 |
| ·胃癌MKN45细胞自分泌CXCR1/2的配体IL-8 | 第63页 |
| ·Repertaxin抑制胃癌MKN45细胞增殖生长 | 第63-65页 |
| ·Repertaxin诱导胃癌MKN45细胞周期停滞和凋亡 | 第65-67页 |
| ·Repertaxin抑制胃癌MKN45细胞迁移和侵袭 | 第67-69页 |
| ·Repertaxin抑制胃癌细胞的成瘤能力和血管新生 | 第69-71页 |
| ·Repertaxin降低bcl-2、CyclinD1、EGFR,ki-67、VEGF、MMP2和MMP的表达,促进bax、TIMP2和E-cadherin的表达 | 第71-72页 |
| ·Repertaxin抑制AKT和ERK1/2磷酸化 | 第72-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 3 CXCR1沉默及过表达对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制 | 第77-125页 |
| ·前言 | 第77-78页 |
| ·实验材料与方法 | 第78-98页 |
| ·实验材料 | 第78-82页 |
| ·细胞株 | 第78页 |
| ·菌株质粒 | 第78-80页 |
| ·实验动物 | 第80页 |
| ·主要抗体 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80-81页 |
| ·主要试剂盒 | 第81页 |
| ·试剂配制 | 第81-82页 |
| ·实验仪器 | 第82页 |
| ·技术路线 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-98页 |
| ·细胞培养 | 第83页 |
| ·细胞筛选 | 第83页 |
| ·实验分组 | 第83页 |
| ·CXCR1干扰质粒载体的构建及鉴定 | 第83-89页 |
| ·CXCR1过表达突变载体的构建与鉴定 | 第89-95页 |
| ·基因转染和细胞克隆的筛选 | 第95-96页 |
| ·干扰回复实验 | 第96页 |
| ·检测CXCR1基因沉默和过表达对胃癌细胞生物学行为的影响 | 第96-97页 |
| ·探究CXCR1基因沉默影响胃癌细胞生物学行为的机制 | 第97-98页 |
| ·统计分析 | 第98页 |
| ·结果 | 第98-121页 |
| ·CXCR1高表达细胞株和低表达细胞株的筛选 | 第98-99页 |
| ·siRNA-CXCR1的构建、鉴定和转染 | 第99-104页 |
| ·质粒载体酶切及测序鉴定结果 | 第99-101页 |
| ·细胞转染效率观察 | 第101-102页 |
| ·瞬时转染后细胞CXCR1 mRNA水平和CXCR1蛋白表达测定 | 第102-103页 |
| ·CXCR1稳定表达抑制胃癌细胞克隆的建立 | 第103-104页 |
| ·pIRES2-ZsGreen1-CXCR1-Mut的构建与鉴定 | 第104-106页 |
| ·干扰回复实验 | 第106-107页 |
| ·CXCR1沉默和过表达对胃癌细胞生物学行为的影响 | 第107-118页 |
| ·CXCR1沉默和过表达对胃癌细胞增殖和生长的影响 | 第107-110页 |
| ·CXCR1沉默和过表达对胃癌细胞周期和凋亡的影响 | 第110-112页 |
| ·CXCR1沉默和过表达对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 | 第112-116页 |
| ·CXCR1沉默和过表达对胃癌细胞成瘤能力的影响 | 第116-118页 |
| ·CXCR1影响胃癌细胞生物学行为的分子机制 | 第118-121页 |
| ·CXCR1沉默对AKT和ERK1/2磷酸化的影响 | 第118页 |
| ·CXCR1沉默对凋亡指标的影响 | 第118-119页 |
| ·CXCR1沉默对增殖生长指标的影响 | 第119-120页 |
| ·CXCR1沉默对血管新生指标的影响 | 第120页 |
| ·CXCR1沉默对侵袭转移指标的影响 | 第120-121页 |
| ·讨论 | 第121-124页 |
| ·小结 | 第124-125页 |
| 4 结论 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-133页 |
| 综述一 | 第133-140页 |
| 参考文献 | 第137-140页 |
| 综述二 | 第140-153页 |
| 参考文献 | 第148-153页 |
| 攻读博士学位期间主要的成果 | 第153-156页 |
| 致谢 | 第156页 |
