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猪白细胞介素2/6嵌合基因的融合表达及活性研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
文献综述第10-19页
 1 白介素-2 研究进展第11-14页
   ·IL-2的发现与命名第11页
   ·IL-2受体的研究第11-12页
   ·IL-2的来源与作用机理第12-13页
   ·IL-2的种属特异性第13页
   ·IL-2的生物学活性第13-14页
   ·IL-2的应用第14页
 2 白介素-6 的研究进展第14-19页
   ·IL-6的发现与命名第15页
   ·IL-6受体的研究第15-16页
   ·IL-6的来源与作用机理第16-17页
   ·IL-6的生物学活性第17-18页
   ·IL-6作为免疫增强剂的研究第18-19页
前言第19-20页
试验一 猪白细胞介素6基因的克隆、表达及活性研究第20-36页
 1 材料与方法第20-29页
   ·材料第20-22页
     ·菌种和质粒第20页
     ·主要试剂与试剂盒第20-21页
     ·主要溶液的配制第21-22页
   ·方法第22-29页
     ·PoIL-6 基因的克隆与表达载体的构建第22-27页
     ·PoIL-6基因在大肠杆菌表达系统中的表达及鉴定第27页
     ·PoIL-6蛋白的纯化制备第27-28页
     ·ELISA 方法检测 rPoIL-6 蛋白免疫反应活性第28页
     ·MTS 法检测 rPoIL-6 脾淋巴细胞增殖活性第28-29页
 2 结果第29-34页
   ·目的基因的 PCR 扩增第29页
   ·DNA 快速回收试剂盒回收 PoIL-6 PCR 产物第29-30页
   ·pGEM-T Easy/ PoIL-6 质粒的 PCR 鉴定和双酶切鉴定第30-31页
   ·pQE30/ PoIL-6 质粒的 PCR 鉴定和双酶切鉴定第31-32页
   ·测序第32页
   ·rPoIL-6蛋白的表达与纯化第32-33页
   ·rPoIL-6 蛋白特异性免疫反应活性检测第33-34页
   ·rPoIL-6 蛋白促猪脾脏淋巴母细胞增殖活性第34页
 3.结论与讨论第34-36页
试验二 猪白细胞介素2/6嵌合基因的构建及融合表达第36-49页
 1 材料与方法第36-43页
   ·材料第36-38页
     ·细胞株和质粒第36页
     ·主要试剂与试剂盒第36-37页
     ·主要溶液的配制第37-38页
   ·方法第38-43页
     ·PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因的构建第38-42页
     ·PoIL-2-linker-PoIL-6 基因在大肠杆菌表达系统中的融合表达及鉴定第42页
     ·PoIL-2-linker-PoIL-6 蛋白的纯化制备第42-43页
 2 结果第43-47页
   ·PoIL-2-Linker和Linker-PoIL-6基因的扩增第43-44页
   ·目的基因的 PCR 扩增及产物的回收第44页
   ·rpGEM-T Easy/PoIL-2-linker-PoIL-6 质粒的鉴定第44-45页
   ·rpQE30/ PoIL-2-linker-PoIL-6 的质粒鉴定第45-46页
   ·测序结果第46页
   ·PoIL-2-linker-PoIL-6的融合表达与纯化第46-47页
 3 结论与讨论第47-49页
试验三 rPoIL-2-linker-PoIL-6 蛋白的体外活性研究第49-56页
 1 材料与方法第49-51页
   ·材料第49页
   ·方法第49-51页
     ·ELISA 方法检测 rPoIL-2-linker-PoIL-6 中的 PoIL-2 蛋白免疫反应活性第49-50页
     ·ELISA 方法检测 pQE30/PoIL-2-linker-PoIL-6 中的 PoIL-6 蛋白免疫反应活性第50页
     ·MTS 法检测 PoIL-2-linker-PoIL-6 蛋白促猪外周血 T 淋巴细胞增殖活性第50-51页
     ·MTS 法检测 PoIL-2-linker-PoIL-6 蛋白促猪脾脏淋巴细胞增殖活性第51页
 2 结果第51-54页
   ·间接 ELISA 检测重组 PQE30/PoIL-2-linker-PoIL-6 中的 PoIL-2 蛋白活性第51-52页
   ·间接 ELISA 检测重组 PQE30/PoIL-2-linker-PoIL-6 中的 PoIL-6 蛋白活性第52-53页
   ·rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白促猪外周血T淋巴细胞增殖活性第53页
   ·rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白促猪脾脏淋巴细胞增殖活性第53-54页
 3 结论与讨论第54-56页
参考文献第56-64页
Abstract第64-66页
发表论文第66页

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