| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-13页 |
| ·前沿 | 第9页 |
| ·组蛋白H3K4和H3K27甲基化酶 | 第9-10页 |
| ·转录因子对细胞重编程的影响 | 第10-11页 |
| ·启动子方法研究重编程因子对组蛋白甲基化酶的影响 | 第11-12页 |
| ·展望 | 第12-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| 3 重编程因子对小鼠组蛋白H3K4/27甲基化酶基因启动子活性的影响 | 第15-73页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·实验细胞和动物 | 第15页 |
| ·实验药品和耗材 | 第15-16页 |
| ·实验仪器设备 | 第16页 |
| ·实验试剂的配制 | 第16-18页 |
| ·实验方法 | 第18-34页 |
| ·体内各期植入前胚胎的获取 | 第18页 |
| ·植入前胚胎6个时期定量PCR模板的获取 | 第18-20页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第20-21页 |
| ·Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2的基因启动子引物以及EZH1和EZH 的定量引物的设计 | 第21-22页 |
| ·小鼠Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2的基因启动子缺失突变体扩增 | 第22-23页 |
| ·小鼠EZH1和EZH2实时荧光定量PCR的扩增 | 第23-24页 |
| ·启动子扩增片段胶回收 | 第24页 |
| ·扩增的启动子缺失突变体与pMD19-T重组质粒的制备 | 第24-26页 |
| ·真核启动子报告基因重组质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·重编程转录因子Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog、Klf4基因的引物设计 | 第27-28页 |
| ·重编程转录因子Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog、Klf4基因扩增 | 第28-29页 |
| ·重编程转录因子Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog、Klf4与pGEM-T重组质粒的制备 | 第29-30页 |
| ·转染真核细胞的转录因子扩增片段-pcDNA3.1重组质粒的制备 | 第30-32页 |
| ·HEK293细胞培养、转染和荧光素酶检测 | 第32-34页 |
| ·实验结果 | 第34-73页 |
| ·小鼠Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2的基因启动子引物以及EZH1和EZH 的定量引物的设计 | 第34-48页 |
| ·小鼠Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2基因启动子缺失片段扩增结果 | 第48-49页 |
| ·小鼠Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2基因启动子缺失片段-pMD19以及Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2基因启动子缺失片段-pGL3PCR鉴定及重组质粒的提取和双酶切 | 第49-55页 |
| ·小鼠Sox2、Nanog、Oct4、Klf4、c-Myc转录因子扩增结果 | 第55页 |
| ·小鼠Sox2、Nanog、Oct4、Klf4、c-Myc转录因子与pcDNA3.1连接后重组质粒酶切的鉴定 | 第55-56页 |
| ·小鼠Smyd3、Mll1、EZH1和EZH2基因启动子缺失片段-pGL3荧光素酶报告基因检测 | 第56-71页 |
| ·小鼠EZH1和EZH2荧光定量PCR扩增 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 附录 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
| 在读硕士研究生期间发表论文目录 | 第85页 |
