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雌激素诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF、bFGF对其生物学行为的影响及作用机制的研究

主要缩略词第1-9页
摘要第9-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第14-15页
第一章 子宫内膜癌细胞在雌激素作用下产生的VEGF、bFGF对其生物学功能的影响体外实验研究第15-34页
 1 材料与方法第15-22页
   ·材料第15-16页
     ·细胞来源第15页
     ·主要试剂第15页
     ·主要仪器设备第15-16页
     ·主要试剂及其配制第16页
   ·方法第16-22页
     ·细胞培养与传代第16页
     ·细胞分组及药物处理第16-17页
     ·CFSE法检测细胞增殖第17-18页
     ·细胞集落形成实验第18-19页
     ·细胞体外迁移能力测定第19-20页
     ·细胞体外侵袭能力测定第20-21页
     ·流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化第21-22页
     ·统计学处理第22页
 2 结果第22-31页
   ·CFSE法检测细胞增殖结果第22-24页
   ·细胞集落形成实验结果第24-25页
   ·细胞体外迁移能力测定结果第25-27页
   ·细胞体外侵袭能力测定结果第27-28页
   ·流式细胞仪检测细胞周期及凋亡结果第28-31页
     ·Ishikawa细胞周期及凋亡测定第28-29页
     ·HEC-1A细胞周期及凋亡测定第29-31页
 3 讨论第31-33页
   ·雌激素与子宫内膜癌的关系第31-32页
   ·雌激素、VEGF、bFGF对子宫内膜癌细胞的影响第32-33页
 4 结论第33-34页
第二章 雌激素诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF、bFGF对MAPK通路的影响第34-68页
 1 材料与方法第34-44页
   ·材料第34-36页
     ·细胞来源第34页
     ·主要试剂第34-35页
     ·主要仪器第35-36页
     ·主要试剂及其配制第36页
   ·方法第36-44页
     ·细胞培养与传代第36页
     ·细胞分组及药物处理第36-37页
     ·荧光定量PCR(Real-time PCR)检测c-raf、MEK1、MEK2、Erk基因的变化第37-41页
       ·总RNA的提取第37-39页
       ·cDNA合成第39-40页
       ·荧光定量PCR(Real-time PCR)第40-41页
     ·Western Blot检测c-raf、MEK1/2、Erk的表达第41-44页
       ·收集细胞总蛋白第41-42页
       ·蛋白浓度测定第42页
       ·Westernblot检测c-raf、MEK1/2、Erk的表达第42-44页
     ·统计学处理第44页
 2 结果第44-63页
   ·RNA质检第44-45页
     ·RNA的浓度第44页
     ·RNA的纯度第44-45页
     ·RNA电泳第45页
   ·各基因的PCR产物电泳图第45-49页
     ·GAPDH电泳图第45-46页
     ·c-raf电泳图第46-47页
     ·MEK1电泳图第47页
     ·MEK2电泳图第47-48页
     ·Erk电泳图第48-49页
   ·Real-time PCR结果第49-59页
   ·Western Blot检测c-raf、MEK1、MEK2、Erk蛋白的表达第59-63页
 3 讨论第63-67页
   ·MAPK传导通路与肿瘤关系第63页
   ·子宫内膜癌细胞在E2作用下产生的VEGF、bFGF与MAPK通路的关系第63-67页
 4 结论第67-68页
第三章 雌激素促进子宫内膜癌发生机制的研究进展(综述)第68-76页
 1 子宫内膜癌发生的高危因素第68-69页
 2 雌激素与子宫内膜癌的关系第69-70页
 3 雌激素相关受体与子宫内膜癌的关系第70-71页
 4 雌激素与子宫内膜癌细胞增殖相关的信号传导通路第71-75页
 5 结语第75-76页
参考文献第76-87页
致谢第87页

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