| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| ·选题的目的意义及创新点 | 第12-13页 |
| ·人参皂苷生物合成概述 | 第13-17页 |
| ·人参皂苷生物合成步骤 | 第13-15页 |
| ·人参皂苷生物合成的关键酶基因 | 第15-17页 |
| ·RNA 干扰作用的研究进展 | 第17-20页 |
| ·RNA 干扰的分子机制和特点 | 第17-18页 |
| ·RNA 干扰的应用 | 第18-19页 |
| ·应用重组 PCR 技术构建 RNA 干扰载体 | 第19-20页 |
| ·发根农杆菌介导的植物遗传转化 | 第20-22页 |
| ·植物发根研究进展 | 第20-21页 |
| ·发根农杆菌诱导产生发根的机理与方法 | 第21-22页 |
| 第2章 人参 CS 基因核心片段的确定与克隆 | 第22-32页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验材料及仪器 | 第22-23页 |
| ·材料及试剂 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·人参发根的培养 | 第23-25页 |
| ·人参发根总 RNA 的提取与 cDNA 的生成 | 第25-27页 |
| ·人参 CS 基因核心片段的克隆 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·人参发根总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·CS 基因和核心片段的克隆 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第3章 重组 PCR 法构建 CS 基因 RNA 干扰植物表达载体 | 第32-42页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·重组 PCR 法构建 RNA 干扰元件原理简述 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌种及试剂 | 第33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·重组 PCR 引物设计 | 第34-35页 |
| ·模板制备及第一轮 PCR 合成目的基因核心片段 | 第35页 |
| ·重组 PCR 反应体系及扩增程序 | 第35页 |
| ·目的片段的回收 | 第35-36页 |
| ·RNA 干扰元件与质粒载体的连接 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·重组 PCR 引物设计 | 第37-38页 |
| ·环阿乔醇合成酶基因重组 PCR 结果 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第4章 构建 CS 基因 RNA 干扰工程菌及遗传转化 | 第42-50页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·植物材料及菌种 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验试剂的配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·菌种的活化 | 第44页 |
| ·重组质粒转入发根农杆菌 A4 | 第44页 |
| ·RNA 干扰工程菌阳性克隆的鉴定 | 第44-45页 |
| ·转化用发根农杆菌 A4 菌液的制备 | 第45页 |
| ·RNA 干扰的人参发根诱导 | 第45页 |
| ·诱导的人参发根的继代培养 | 第45-46页 |
| ·转化发根的 RT-PCR 检测 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·阳性 RNA 干扰工程菌的鉴定筛选 | 第46-47页 |
| ·RNA 干扰人参发根体系的建立 | 第47页 |
| ·转化发根 RT-PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第5章 干扰人参 CS 基因的表达对人参三萜成分含量的影响 | 第50-66页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·材料和仪器 | 第50-51页 |
| ·实验材料和试剂 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·人参发根生长的测定 | 第51页 |
| ·RNA 干扰对人参发根总皂苷含量的影响 | 第51-52页 |
| ·RNA 干扰对人参发根总固醇含量影响 | 第52-53页 |
| ·人参发根中三种单体皂苷（ Rg1、Re、Rb1 ）含量分析 | 第53页 |
| ·人参发根中环阿乔醇的含量测定 | 第53-54页 |
| ·人参发根中达玛烯二醇的含量测定 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-64页 |
| ·RNA 干扰人参发根的生长 | 第54-55页 |
| ·人参发根总皂苷含量分析 | 第55-57页 |
| ·人参发根中植物固醇含量分析 | 第57-58页 |
| ·人参发根中单体皂苷（ Rg1、Re、Rb1）含量分析 | 第58-61页 |
| ·人参发根中环阿乔醇含量分析 | 第61-63页 |
| ·人参发根中达玛烯二醇含量分析 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第66-68页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
