摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-13页 |
主要英文缩写注释表 | 第13-15页 |
第一章 绪论 | 第15-28页 |
·引言 | 第15页 |
·发热伴血小板减少综合症病毒概况 | 第15-24页 |
·病毒结构 | 第15-18页 |
·病毒生活史 | 第18-22页 |
·流行病学 | 第22-23页 |
·临床表现、检查及确诊方法 | 第23页 |
·临床治疗及预防控制措施 | 第23-24页 |
·目前国内外研究进展 | 第24-25页 |
·本文涉及的实验技术简介 | 第25-27页 |
·免疫荧光染色 | 第25-26页 |
·实时定量 PCR 技术 | 第26页 |
·RNA 干扰技术 | 第26-27页 |
·研究目的及意义 | 第27-28页 |
第二章 SFTSV 的定量、感染及检测 | 第28-42页 |
·前言 | 第28页 |
·实验材料与仪器 | 第28-30页 |
·病毒及细胞 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要溶液配制 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·引物及质粒 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-37页 |
·细胞培养 | 第30-31页 |
·病毒滴度测定 | 第31-32页 |
·TRIzol 法提取总 RNA | 第32-33页 |
·RNA 反转录 | 第33页 |
·实时定量 PCR | 第33-35页 |
·免疫荧光染色 | 第35页 |
·MOI 值计算 | 第35-36页 |
·以 HUVEC 测定 SFTSV 的感染及释放 | 第36-37页 |
·实验结果 | 第37-40页 |
·SFTSV 定量 | 第37-38页 |
·SFTSV 感染及释放时间曲线 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第三章 抑制 SFTSV 感染化合物的筛选 | 第42-56页 |
·前言 | 第42页 |
·实验材料与仪器 | 第42-46页 |
·病毒及细胞 | 第42页 |
·相关化合物介绍 | 第42-45页 |
·试剂及仪器 | 第45页 |
·主要溶液配制 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·化合物抑制 SFTSV 感染实验 | 第46-48页 |
·实验结果 | 第48-54页 |
·化合物对 Hela 细胞感染的影响 | 第48-49页 |
·化合物对 RD 细胞及 HUVEC 感染的影响 | 第49-54页 |
·BEZ235 和 Sunitinib 对感染后细胞的保护作用 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第四章 感染对受体酪氨酸磷酸酶磷酸化水平的影响 | 第56-63页 |
·前言 | 第56-58页 |
·实验材料与仪器 | 第58-59页 |
·病毒及细胞 | 第58页 |
·试剂与仪器 | 第58页 |
·主要溶液配制 | 第58-59页 |
·实验方法 | 第59-61页 |
·细胞培养 | 第59页 |
·RTKs 磷酸化水平阵列分析 | 第59-61页 |
·实验结果 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
第五章 利用小干扰 RNA 研究 SFTSV 的感染机制 | 第63-75页 |
·前言 | 第63页 |
·实验材料与仪器 | 第63-64页 |
·病毒及细胞 | 第63页 |
·试剂与仪器 | 第63-64页 |
·主要溶液配制 | 第64页 |
·实验方法 | 第64-69页 |
·siRNA 及 qRT-PCR 检测引物设计 | 第64-66页 |
·检测不同细胞系中目的基因的表达情况 | 第66-67页 |
·siRNA 转染 | 第67页 |
·siRNA 干扰效率检测 | 第67-68页 |
·RTKs 表达水平降低对 SFTSV 感染的影响 | 第68-69页 |
·实验结果 | 第69-73页 |
·不同细胞系中 RTKs 的表达情况 | 第69-70页 |
·siRNA 沉默目的基因效率 | 第70-71页 |
·RTKs 基因沉默对 SFTSV 感染的影响 | 第71-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
全文总结 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-80页 |
致谢 | 第80页 |