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花生耐渍相关基因AhGLB的克隆与表达

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 绪论第10-19页
   ·渍涝缺氧胁迫第10页
   ·渍涝缺氧胁迫对花生的危害第10-11页
     ·渍涝缺氧胁迫对花生氧气吸收的影响第10-11页
     ·渍涝缺氧胁迫对花生养分吸收的影响第11页
     ·渍涝缺氧胁迫对花生农艺性状的影响第11页
   ·渍涝缺氧胁迫的防治第11-12页
     ·农艺防治第11页
     ·化学防治第11页
     ·育种防治第11-12页
   ·分子育种基础技术第12-14页
     ·RACE技术第12-13页
     ·荧光定量PCR技术第13-14页
   ·植物中的血红蛋白第14-17页
     ·非共生血红蛋白第14-15页
     ·非共生血红蛋白在渍涝低氧胁迫下对植物的作用第15-17页
     ·目前已获得的nsHb转基因植物第17页
   ·本研究的目的与意义第17-19页
2 材料与方法第19-31页
   ·试验材料第19页
     ·花生材料第19页
     ·主要仪器设备第19页
     ·主要试验试剂第19页
   ·花生叶片RNA的提取及cDNA单链的获得第19-21页
     ·花生组织中RNA的提取第19-20页
     ·单链cDNA合成第20-21页
   ·花生AhGLB基因中间片段的获得第21-23页
     ·植物中GLB基因的序列比对第21页
     ·简并引物的设计第21页
     ·简并引物克隆中间片段第21-22页
     ·PCR产物的回收第22-23页
     ·pMD-18载体连接第23页
     ·生物信息学分析第23页
   ·花生AhGLB基因全长的获得第23-26页
     ·RACE引物的设计第23-24页
     ·花生叶片RNA的提取与RACE cDNA链的获得第24-25页
     ·花生AhGLB基因5’和3’端的获得第25-26页
     ·花生AhGLB基因全序列扩增检验与序列分析第26页
   ·花生AhGLB基因荧光定量PCR测定法的构建第26-29页
     ·花生AhGLB基因荧光定量引物第26-27页
     ·花生RNA的提取与反转录第27页
     ·花生荧光定量PCR第27-28页
     ·花生荧光定量PCR目的基因回收第28页
     ·pMD-18载体连接第28页
     ·重组质粒的制备第28页
     ·重组质粒的提取第28-29页
     ·基因荧光定量标准曲线的制作第29页
     ·荧光定量中花生AhGLB基因相对定量的计算第29页
   ·花生AhGLB基因荧光定量检测第29-31页
     ·花生的处理第29-30页
     ·花生AhGLB基因的荧光定量检测第30-31页
3 结果与分析第31-51页
   ·花生叶片RNA的提取及cDNA单链的获得第31页
   ·花生AhGLB基因中间片段的获得第31-34页
     ·植物当中GLB基因的序列比对第31-33页
     ·简并引物克隆中间片段第33页
     ·AhGLB基因中间片段序列第33页
     ·AhGLB基因中间片段的生物信息学分析第33-34页
   ·花生AhGLB基因全长的获得第34-41页
     ·花生AhGLB基因5’和3’端的获得第34-36页
     ·花生AhGLB基因全序列确定第36-41页
   ·花生AhGLB基因荧光定量PCR测定法的构建第41-47页
     ·花生RNA的提取第41-42页
     ·花生荧光定量PCR产物电泳检测第42-43页
     ·花生荧光定量产物重组质粒检测第43-44页
     ·紫外分光光度计测定目的片段拷贝数第44页
     ·荧光定量标准曲线的绘制第44-47页
   ·花生AhGLB基因表达分析第47-51页
     ·花生AhGLB基因在不同组织中的表达量第47-48页
     ·花生AhGLB基因在低氧胁迫下不同组织中的表达量第48页
     ·花生AhGLB基因在氮诱导下不同组织中的表达量第48-51页
4 讨论第51-53页
   ·花生AhGLB基因的克隆第51页
   ·花生AhGLB基因的表达特性第51-52页
   ·花生AhGLB基因的在抵抗低氧胁迫方面的作用第52-53页
5 结论第53-54页
6 创新点第54页
7 研究展望第54-55页
   ·花生AhGLB基因功能更深入的探讨与鉴定第54页
   ·花生耐涝转基因体系的构建第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59-60页
在读期间科研学术成果第60-61页
附录第61-62页

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