| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·植物次生代谢及其次生代谢产物 | 第14-15页 |
| ·植物次生代谢 | 第14-15页 |
| ·植物次生代谢产物 | 第15页 |
| ·植物中紫檀芪的发现及分布 | 第15-16页 |
| ·紫檀芪的生物活性 | 第16-18页 |
| ·抗癌作用 | 第16-17页 |
| ·抗氧化作用 | 第17-18页 |
| ·对炎症调节作用 | 第18页 |
| ·降血脂作用 | 第18页 |
| ·抗真菌活性 | 第18页 |
| ·紫檀芪生物合成途径 | 第18-20页 |
| ·紫檀芪在植物体外的合成途径 | 第20页 |
| ·氧-甲基转移酶基因的结构和功能 | 第20-21页 |
| ·白藜芦醇-氧-甲基转移酶基因研究进展 | 第21-22页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 华东葡萄ROMT基因全长的分离 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·葡萄材料 | 第24页 |
| ·菌种及载体 | 第24页 |
| ·ROMTEST序列 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要试剂盒 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·田间人工接种葡萄白粉病 | 第25页 |
| ·总RNA提取及纯化 | 第25-26页 |
| ·SMARTTMfirst-strandcDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·RACE克隆测序 | 第27-29页 |
| ·序列分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-34页 |
| ·RACE扩增结果 | 第29页 |
| ·VpROMT基因序列分析 | 第29-31页 |
| ·进化关系分析 | 第31-33页 |
| ·氨基酸序列同源性分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 华东葡萄基因VpROMT表达模式分析 | 第36-42页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·葡萄材料 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要试剂盒 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·引物 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·田间处理及采样 | 第36-37页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第37页 |
| ·定量RT-PCR（qRT-PCR）检测 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| ·QRT-PCR分析VpROMT在白粉病诱导后的表达模式 | 第38-39页 |
| ·VpROMT在白河-35-1不同组织器官中特异性表达分析 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 信号分子诱导葡萄悬浮细胞VpROMT基因表达分析 | 第42-46页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·葡萄外植体材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要试剂盒 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·引物 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·葡萄愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养系的建立 | 第43页 |
| ·愈伤组织转接悬浮培养和悬浮细胞继代培养条件 | 第43页 |
| ·细胞悬浮细胞处理 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-45页 |
| ·VpROMT在信号分子处理后的表达模式分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 华东葡萄VpROMT基因转化烟草植株及其表达分析 | 第46-60页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌种及载体 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·主要试剂盒 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47页 |
| ·引物 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-52页 |
| ·烟草无菌系的建立 | 第47-48页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备及电击转化 | 第49-50页 |
| ·转化农杆菌后PCR检测 | 第50页 |
| ·农杆菌介导叶盘转化法 | 第50-51页 |
| ·转基因烟草株系阳性植株筛选 | 第51页 |
| ·VpROMT在转基因烟草株系中的表达检测 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·华东葡萄基因VpROMT的克隆 | 第52-53页 |
| ·华东葡萄基因VpROMT过量表达载体的构建 | 第53页 |
| ·华东葡萄基因VpROMT过量表达载体的农杆菌转化 | 第53-54页 |
| ·转基因烟草T0代的DNA检测 | 第54-55页 |
| ·转目的基因烟草植株的获得 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第六章 HPLC分析不同转基因烟草植株中白藜芦醇和紫檀芪含量 | 第60-70页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·转化烟草植株叶片组织中白藜芦醇和紫檀芪提取 | 第60-61页 |
| ·2种芪化物标准溶液的配制 | 第61页 |
| ·色谱分离条件 | 第61页 |
| ·HPLC测定转化烟草植株叶片组织中白藜芦醇和紫檀芪含量 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·反式白藜芦醇和反式紫檀芪标样波长测定 | 第61-62页 |
| ·HPLC检测单转化转基因烟草叶片中白藜芦醇和紫檀芪含量 | 第62-64页 |
| ·共转化烟草植株叶片中白藜芦醇和紫檀芪测定结果 | 第64-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| 第七章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 附录 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 个人简介 | 第86页 |
