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生物催化α-羟基腈生产α-羟基羧酸的微生物筛选及其水解反应的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 绪论第11-27页
   ·腈化合物及广义腈水解酶简介第11-12页
   ·基于微生物腈水解反应制备α-羟基酸第12-14页
   ·腈水合酶/酰胺酶双酶体系水解腈化合物第14-21页
     ·腈水合酶第15-18页
     ·酰胺酶第18-21页
   ·本课题研究的背景、内容和方法第21-27页
     ·研究背景及意义第21-24页
       ·羟基乙酸的性质及市场需求第21-22页
       ·羟基乙腈水解生产羟基乙酸第22-24页
     ·羟基乙酸的分析方法第24-26页
     ·本课题的研究内容第26-27页
第二章 具有羟基乙腈水解活力菌种的筛选与鉴定第27-40页
   ·引言第27-28页
   ·材料与方法第28-32页
     ·试剂第28页
     ·培养基配制第28页
     ·菌种筛选方案第28-30页
     ·底物特异性及水解酶类型第30页
     ·菌体制备及静息细胞转化第30页
     ·分析方法和酶活力测定第30-31页
     ·菌种鉴定第31-32页
       ·菌落形态观察第31页
       ·生理生化特征第31页
       ·ATB仪器鉴定第31-32页
   ·结果和讨论第32-39页
     ·比色反应参数与反应机理第32-35页
       ·全波长扫描第32-33页
       ·沸水浴煮沸时间的影响第33页
       ·显色反应机理第33-34页
       ·羟基乙腈对显色反应的影响第34-35页
     ·目的菌株的获得第35-38页
       ·初筛阶段第35页
       ·复筛阶段第35-36页
       ·实验菌株的确定第36-37页
       ·N595底物特异性及水解酶类型判定第37-38页
     ·菌种鉴定第38-39页
       ·菌落形态观察第38页
       ·生理生化特征第38-39页
       ·ATB仪器鉴定第39页
   ·本章小结第39-40页
第三章 Rhodococcus sp.N595产酶培养基和培养条件优化第40-56页
   ·引言第40页
   ·材料和方法第40-44页
     ·培养基配制第40-41页
     ·Rhodococcus sp.N595菌体制备及静息细胞转化第41页
     ·种子培养基选取第41-42页
     ·发酵培养基起始pH值的影响第42页
     ·摇床培养温度的影响第42页
     ·碳源的影响第42-43页
     ·氮源的影响第43页
     ·诱导剂的影响第43页
     ·金属离子的影响第43-44页
   ·结果和讨论第44-55页
     ·种子培养基选取第44页
     ·种子生长曲线测定第44-45页
     ·发酵生长曲线测定第45-46页
     ·发酵培养基起始pH值的影响第46-47页
     ·摇床培养温度的影响第47页
     ·碳源种类和用量的影响第47-49页
       ·碳源种类的影响第47-48页
       ·碳源用量的影响第48-49页
     ·氮源种类和用量的影响第49-51页
       ·氮源种类的影响第49-50页
       ·氮源总量和配比的影响第50-51页
     ·诱导剂种类、用量及诱导时间的影响第51-54页
       ·诱导剂种类的影响第51-52页
       ·诱导剂用量的影响第52-53页
       ·诱导时间的影响第53-54页
     ·不同金属离子的影响第54-55页
   ·本章小结第55-56页
第四章 Rhodococcus sp.N595静息细胞催化羟基乙腈水解反应条件优化及反应过程研究第56-68页
   ·引言第56页
   ·材料与方法第56-59页
     ·样品和试剂第56-57页
     ·催化水解反应第57页
     ·温度的影响第57页
     ·热稳定性第57页
     ·pH的影响第57-58页
     ·金属离子的影响第58页
     ·底物浓度的影响第58页
     ·催化反应批次第58页
     ·细胞浓度的影响第58页
     ·产物浓度的影响第58-59页
     ·酶促反应动力学研究第59页
   ·结果和讨论第59-67页
     ·温度的影响第59-60页
     ·热稳定性研究第60-62页
     ·pH的影响第62页
     ·金属离子的影响第62-63页
     ·底物浓度的影响第63-64页
     ·酶的稳定性测试第64页
     ·细胞浓度的影响第64-65页
     ·产物浓度的影响第65-66页
     ·酶促反应动力学第66-67页
   ·本章小结第67-68页
参考文献第68-74页
附录第74-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表的学术论文第77页

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