| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| ·腈化合物及广义腈水解酶简介 | 第11-12页 |
| ·基于微生物腈水解反应制备α-羟基酸 | 第12-14页 |
| ·腈水合酶/酰胺酶双酶体系水解腈化合物 | 第14-21页 |
| ·腈水合酶 | 第15-18页 |
| ·酰胺酶 | 第18-21页 |
| ·本课题研究的背景、内容和方法 | 第21-27页 |
| ·研究背景及意义 | 第21-24页 |
| ·羟基乙酸的性质及市场需求 | 第21-22页 |
| ·羟基乙腈水解生产羟基乙酸 | 第22-24页 |
| ·羟基乙酸的分析方法 | 第24-26页 |
| ·本课题的研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 具有羟基乙腈水解活力菌种的筛选与鉴定 | 第27-40页 |
| ·引言 | 第27-28页 |
| ·材料与方法 | 第28-32页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·培养基配制 | 第28页 |
| ·菌种筛选方案 | 第28-30页 |
| ·底物特异性及水解酶类型 | 第30页 |
| ·菌体制备及静息细胞转化 | 第30页 |
| ·分析方法和酶活力测定 | 第30-31页 |
| ·菌种鉴定 | 第31-32页 |
| ·菌落形态观察 | 第31页 |
| ·生理生化特征 | 第31页 |
| ·ATB仪器鉴定 | 第31-32页 |
| ·结果和讨论 | 第32-39页 |
| ·比色反应参数与反应机理 | 第32-35页 |
| ·全波长扫描 | 第32-33页 |
| ·沸水浴煮沸时间的影响 | 第33页 |
| ·显色反应机理 | 第33-34页 |
| ·羟基乙腈对显色反应的影响 | 第34-35页 |
| ·目的菌株的获得 | 第35-38页 |
| ·初筛阶段 | 第35页 |
| ·复筛阶段 | 第35-36页 |
| ·实验菌株的确定 | 第36-37页 |
| ·N595底物特异性及水解酶类型判定 | 第37-38页 |
| ·菌种鉴定 | 第38-39页 |
| ·菌落形态观察 | 第38页 |
| ·生理生化特征 | 第38-39页 |
| ·ATB仪器鉴定 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 Rhodococcus sp.N595产酶培养基和培养条件优化 | 第40-56页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料和方法 | 第40-44页 |
| ·培养基配制 | 第40-41页 |
| ·Rhodococcus sp.N595菌体制备及静息细胞转化 | 第41页 |
| ·种子培养基选取 | 第41-42页 |
| ·发酵培养基起始pH值的影响 | 第42页 |
| ·摇床培养温度的影响 | 第42页 |
| ·碳源的影响 | 第42-43页 |
| ·氮源的影响 | 第43页 |
| ·诱导剂的影响 | 第43页 |
| ·金属离子的影响 | 第43-44页 |
| ·结果和讨论 | 第44-55页 |
| ·种子培养基选取 | 第44页 |
| ·种子生长曲线测定 | 第44-45页 |
| ·发酵生长曲线测定 | 第45-46页 |
| ·发酵培养基起始pH值的影响 | 第46-47页 |
| ·摇床培养温度的影响 | 第47页 |
| ·碳源种类和用量的影响 | 第47-49页 |
| ·碳源种类的影响 | 第47-48页 |
| ·碳源用量的影响 | 第48-49页 |
| ·氮源种类和用量的影响 | 第49-51页 |
| ·氮源种类的影响 | 第49-50页 |
| ·氮源总量和配比的影响 | 第50-51页 |
| ·诱导剂种类、用量及诱导时间的影响 | 第51-54页 |
| ·诱导剂种类的影响 | 第51-52页 |
| ·诱导剂用量的影响 | 第52-53页 |
| ·诱导时间的影响 | 第53-54页 |
| ·不同金属离子的影响 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 Rhodococcus sp.N595静息细胞催化羟基乙腈水解反应条件优化及反应过程研究 | 第56-68页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·样品和试剂 | 第56-57页 |
| ·催化水解反应 | 第57页 |
| ·温度的影响 | 第57页 |
| ·热稳定性 | 第57页 |
| ·pH的影响 | 第57-58页 |
| ·金属离子的影响 | 第58页 |
| ·底物浓度的影响 | 第58页 |
| ·催化反应批次 | 第58页 |
| ·细胞浓度的影响 | 第58页 |
| ·产物浓度的影响 | 第58-59页 |
| ·酶促反应动力学研究 | 第59页 |
| ·结果和讨论 | 第59-67页 |
| ·温度的影响 | 第59-60页 |
| ·热稳定性研究 | 第60-62页 |
| ·pH的影响 | 第62页 |
| ·金属离子的影响 | 第62-63页 |
| ·底物浓度的影响 | 第63-64页 |
| ·酶的稳定性测试 | 第64页 |
| ·细胞浓度的影响 | 第64-65页 |
| ·产物浓度的影响 | 第65-66页 |
| ·酶促反应动力学 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77页 |