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甘蓝夜蛾细胞色素P450CYP4M及CYP6AB基因的克隆与表达研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-20页
   ·细胞色素P450简介第11-14页
     ·P450的命名原则第11页
     ·细胞色素P450基因的多样性第11-12页
     ·P450蛋白的结构特征第12-14页
   ·P450的功能第14-17页
     ·P450参与内源物质合成代谢第14-16页
     ·P450参与外源物质的代谢第16-17页
   ·P450的研究展望第17页
   ·甘蓝夜蛾简介第17-19页
   ·本论文研究的目的和意义第19页
   ·本研究课题的来源及主要研究内容第19-20页
2 材料与方法第20-33页
   ·材料第20-22页
     ·菌株与质粒第20页
     ·分子生物学用酶及试剂盒第20页
     ·配置试剂第20-21页
     ·仪器设备第21页
     ·昆虫来源第21-22页
   ·研究方法第22-27页
     ·昆虫总RNA的提取第22-23页
     ·第一链cDNA的合成第23页
     ·利用RT-PCR技术克隆基因第23-26页
     ·3'-RACE的试验步骤第26页
     ·5'-RACE的试验步骤第26页
     ·全长cDNA的获取及其序列分析第26-27页
   ·序列分析第27页
   ·CYP4M与CYP6AB基因在大肠杆菌中的表达研究第27-33页
     ·CYP4M与CYP6AB基因第27-28页
     ·PCR产物酶切反应第28页
     ·E.coli质粒DNA提取和酶切第28-29页
     ·大肠杆菌表达载体构建第29-32页
     ·CYP4M与CYP6AB基因在大肠杆菌中诱导表达第32页
     ·SDS-PAGE电泳第32-33页
3 结果与分析第33-56页
   ·RT-PCR得到的基因特异性片段及序列分析第33-37页
     ·CYP4M基因片段及序列分析第33-35页
     ·CYP6AB基因片段及序列分析第35-37页
   ·基因cDNA序列的获得第37-39页
     ·CYP4M基因序列的获得第37-38页
     ·CYP6AB基因序列的获得第38-39页
   ·CYP4M及CYP6AB基因特征第39-45页
     ·CYP4M基因特征第39-42页
     ·CYP6AB基因特征第42-45页
   ·昆虫CYP4M及CYP6AB同源性和系统进化分析第45-53页
     ·昆虫CYP4M同源性和系统进化分析第45-49页
     ·昆虫CYP6AB同源性和系统进化分析第49-53页
   ·CYP4M及CYP6AB基因在大肠杆菌中的表达第53-56页
     ·CYP4M大肠杆菌重组表达载体的构建和鉴定第53-54页
     ·CYP6AB大肠杆菌重组表达载体的构建和鉴定第54-55页
     ·CYP4M基因在大肠杆菌中的表达第55页
     ·CYP6AB基因在大肠杆菌中的表达第55-56页
4. 讨论第56-58页
5. 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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