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利用家蚕丝腺退化模型研究JNK途径和BmNep 1基因

中文摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-24页
 1 前言第15页
 2 昆虫的程序性细胞死亡第15-20页
   ·昆虫细胞凋亡第16-18页
   ·昆虫细胞自噬第18-20页
 3 家蚕丝腺的生长发育及程序性细胞死亡第20-24页
   ·家蚕丝腺的生长发育第20-21页
   ·家蚕丝腺中细胞凋亡和自噬的研究进展第21-23页
   ·家蚕丝腺中程序性细胞死亡研究的意义第23-24页
第二章 主要试剂与常用实验方法第24-35页
 1 常用材料与试剂第24-27页
   ·菌种、蚕品种与细胞系第24页
   ·主要分子生物学试剂第24页
   ·培养基第24-25页
   ·缓冲液和常用溶液第25-26页
   ·核酸电泳相关试剂第26页
   ·免疫荧光细胞化学试剂第26页
   ·生物信息学资源及分析软件第26-27页
 2 主要仪器设备第27-28页
 3 常用实验方法第28-35页
   ·总 RNA 的提取及 cDNA 的制备第28页
   ·PCR 产物的回收第28页
   ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第28-29页
   ·连接反应第29页
   ·感受态细胞制备第29页
   ·连接产物的转化第29-30页
   ·重组质粒的筛选第30页
   ·质粒的提取(抽裂解法)第30页
   ·实时定量 PCR(Real time PCR)第30-31页
   ·细胞传代培养的基本操作第31-32页
   ·BCA(bicinchoninicacid,二辛可酸)法侧定蛋白浓度第32-33页
   ·SDS-PAGE 电泳第33页
   ·免疫印迹检测(Western blotting)第33-34页
   ·免疫荧光检测第34-35页
第三章 家蚕中 JNK 途径生理功能的初步研究第35-53页
 1 引言第35-37页
 2 实验材料与方法第37-40页
   ·实验动物与细胞第37页
   ·生物信息学分析第37-38页
   ·cDNA 克隆第38页
   ·半定量 PCR(sqRT-PCR)第38页
   ·实时定量 PCR(qRT-PCR)第38-39页
   ·亚细胞定位第39页
   ·BmJun 基因的 RNA 干扰第39-40页
 3 实验结果第40-51页
   ·家蚕中编码 BmJun 的 cDNA 片段的克隆第40-41页
   ·家蚕中 BmJun 的生物信息学分析第41-42页
   ·家蚕中编码 BmFos 的 cDNA 片段的克隆第42-43页
   ·家蚕中 BmFos 的生物信息学分析第43页
   ·家蚕 BmN 细胞中 BmJun 的亚细胞定位第43-44页
   ·家蚕丝腺退化过程中 BmJun 和 BmFos 的转录水平变化第44-46页
   ·家蚕丝腺退化过程中 BmJNK 的转录水平变化第46-47页
   ·家蚕丝腺退化过程中 BmJun 的翻译水平变化第47-48页
   ·干扰 BmJun 基因对于成虫眼睛发育的影响第48-49页
   ·干扰 BmJun 基因对于子代卵发育的影响第49-51页
 4 分析与讨论第51-53页
第四章 家蚕中 BmNep1 基因的研究第53-71页
 1 序言第53-54页
 2 材料与方法第54-57页
   ·实验动物与细胞第54页
   ·生物信息学分析第54页
   ·cDNA 克隆第54-55页
   ·实时定量 PCR(qRT-PCR)第55页
   ·多克隆抗体的制备第55页
   ·蛋白免疫印迹分析第55页
   ·亚细胞定位第55页
   ·生化分离第55页
   ·激素处理第55页
   ·干涉 BmNep1 基因第55-57页
 3 结果与分析第57-68页
   ·家蚕 BmNep1 的克隆第57-58页
   ·生物信息学分析第58-59页
   ·家蚕丝腺在幼虫到蛹变态过程的结构和形态变化第59-60页
   ·家蚕中 BmNep1 的亚细胞定位第60-61页
   ·BmNep1 基因在 5 龄以及幼虫化蛹变态期间家蚕丝腺中的转录水平变化第61-64页
   ·家蚕丝腺中 BmNep1 在幼虫化蛹变态期间的翻译水平变化第64页
   ·家蚕中肠中 BmNep1 基因在幼虫化蛹变态期间的转录水平变化第64-65页
   ·家蚕中肠内 BmNep1 基因在幼虫化蛹变态期间的翻译水平变化第65-66页
   ·20-羟基蜕皮酮对于 BmN 细胞中 BmNep1 转录水平及其蛋白水平的影响第66-68页
   ·在摇摆期,干扰 BmNep1 基因对于家蚕变态的影响第68页
 4 结论与讨论第68-71页
综合结论和创新点第71-73页
 1 综合结论第71-72页
 2 主要创新点第72-73页
参考文献第73-82页
研究生期间发表文章第82-83页
论文资助项目第83-84页
附录 文中主要所用缩略词一览表第84-87页
致谢第87-88页

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