中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-24页 |
1 前言 | 第15页 |
2 昆虫的程序性细胞死亡 | 第15-20页 |
·昆虫细胞凋亡 | 第16-18页 |
·昆虫细胞自噬 | 第18-20页 |
3 家蚕丝腺的生长发育及程序性细胞死亡 | 第20-24页 |
·家蚕丝腺的生长发育 | 第20-21页 |
·家蚕丝腺中细胞凋亡和自噬的研究进展 | 第21-23页 |
·家蚕丝腺中程序性细胞死亡研究的意义 | 第23-24页 |
第二章 主要试剂与常用实验方法 | 第24-35页 |
1 常用材料与试剂 | 第24-27页 |
·菌种、蚕品种与细胞系 | 第24页 |
·主要分子生物学试剂 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·缓冲液和常用溶液 | 第25-26页 |
·核酸电泳相关试剂 | 第26页 |
·免疫荧光细胞化学试剂 | 第26页 |
·生物信息学资源及分析软件 | 第26-27页 |
2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
3 常用实验方法 | 第28-35页 |
·总 RNA 的提取及 cDNA 的制备 | 第28页 |
·PCR 产物的回收 | 第28页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
·连接反应 | 第29页 |
·感受态细胞制备 | 第29页 |
·连接产物的转化 | 第29-30页 |
·重组质粒的筛选 | 第30页 |
·质粒的提取(抽裂解法) | 第30页 |
·实时定量 PCR(Real time PCR) | 第30-31页 |
·细胞传代培养的基本操作 | 第31-32页 |
·BCA(bicinchoninicacid,二辛可酸)法侧定蛋白浓度 | 第32-33页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第33页 |
·免疫印迹检测(Western blotting) | 第33-34页 |
·免疫荧光检测 | 第34-35页 |
第三章 家蚕中 JNK 途径生理功能的初步研究 | 第35-53页 |
1 引言 | 第35-37页 |
2 实验材料与方法 | 第37-40页 |
·实验动物与细胞 | 第37页 |
·生物信息学分析 | 第37-38页 |
·cDNA 克隆 | 第38页 |
·半定量 PCR(sqRT-PCR) | 第38页 |
·实时定量 PCR(qRT-PCR) | 第38-39页 |
·亚细胞定位 | 第39页 |
·BmJun 基因的 RNA 干扰 | 第39-40页 |
3 实验结果 | 第40-51页 |
·家蚕中编码 BmJun 的 cDNA 片段的克隆 | 第40-41页 |
·家蚕中 BmJun 的生物信息学分析 | 第41-42页 |
·家蚕中编码 BmFos 的 cDNA 片段的克隆 | 第42-43页 |
·家蚕中 BmFos 的生物信息学分析 | 第43页 |
·家蚕 BmN 细胞中 BmJun 的亚细胞定位 | 第43-44页 |
·家蚕丝腺退化过程中 BmJun 和 BmFos 的转录水平变化 | 第44-46页 |
·家蚕丝腺退化过程中 BmJNK 的转录水平变化 | 第46-47页 |
·家蚕丝腺退化过程中 BmJun 的翻译水平变化 | 第47-48页 |
·干扰 BmJun 基因对于成虫眼睛发育的影响 | 第48-49页 |
·干扰 BmJun 基因对于子代卵发育的影响 | 第49-51页 |
4 分析与讨论 | 第51-53页 |
第四章 家蚕中 BmNep1 基因的研究 | 第53-71页 |
1 序言 | 第53-54页 |
2 材料与方法 | 第54-57页 |
·实验动物与细胞 | 第54页 |
·生物信息学分析 | 第54页 |
·cDNA 克隆 | 第54-55页 |
·实时定量 PCR(qRT-PCR) | 第55页 |
·多克隆抗体的制备 | 第55页 |
·蛋白免疫印迹分析 | 第55页 |
·亚细胞定位 | 第55页 |
·生化分离 | 第55页 |
·激素处理 | 第55页 |
·干涉 BmNep1 基因 | 第55-57页 |
3 结果与分析 | 第57-68页 |
·家蚕 BmNep1 的克隆 | 第57-58页 |
·生物信息学分析 | 第58-59页 |
·家蚕丝腺在幼虫到蛹变态过程的结构和形态变化 | 第59-60页 |
·家蚕中 BmNep1 的亚细胞定位 | 第60-61页 |
·BmNep1 基因在 5 龄以及幼虫化蛹变态期间家蚕丝腺中的转录水平变化 | 第61-64页 |
·家蚕丝腺中 BmNep1 在幼虫化蛹变态期间的翻译水平变化 | 第64页 |
·家蚕中肠中 BmNep1 基因在幼虫化蛹变态期间的转录水平变化 | 第64-65页 |
·家蚕中肠内 BmNep1 基因在幼虫化蛹变态期间的翻译水平变化 | 第65-66页 |
·20-羟基蜕皮酮对于 BmN 细胞中 BmNep1 转录水平及其蛋白水平的影响 | 第66-68页 |
·在摇摆期,干扰 BmNep1 基因对于家蚕变态的影响 | 第68页 |
4 结论与讨论 | 第68-71页 |
综合结论和创新点 | 第71-73页 |
1 综合结论 | 第71-72页 |
2 主要创新点 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
研究生期间发表文章 | 第82-83页 |
论文资助项目 | 第83-84页 |
附录 文中主要所用缩略词一览表 | 第84-87页 |
致谢 | 第87-88页 |