| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 1. 小麦高分子量麦谷蛋白 | 第12-17页 |
| ·小麦种子储藏蛋白的组成及分类 | 第12-13页 |
| ·小麦高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)基因种类、染色体定位及基因结构 | 第13-15页 |
| ·小麦高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)结构 | 第15-17页 |
| 2. 小麦品质研究进展 | 第17-27页 |
| ·小麦磨粉品质 | 第18-19页 |
| ·小麦食品加工品质 | 第19-26页 |
| ·我国小麦品质研究现状 | 第26-27页 |
| 3. 我国优质高分子量麦谷蛋白亚基研究进展 | 第27-28页 |
| 4. 小麦转基因以及高分子量麦谷蛋白亚基基因遗传转化的研究 | 第28-30页 |
| ·小麦转基因研究进展 | 第28-29页 |
| ·小麦高分子量麦谷蛋白亚基转基因 | 第29-30页 |
| 5. 本研究内容和意义 | 第30-32页 |
| 第二部分 高分子量麦谷蛋白优质亚基(HMW-GS)基因H1Bx13和H1Dx5胚乳特异性表达载体的构建 | 第32-50页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·所用载体及两种HMW-GS基基因 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第33-35页 |
| ·实验步骤和方法 | 第35-42页 |
| ·相关质粒的提取 | 第35页 |
| ·中间载体pCAMBIA3301-1的构建 | 第35-40页 |
| ·HMW-GS基因H1Bx13和H1Dx5特异性表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-50页 |
| ·pBIN20多克隆位点的扩增以及克隆载体T-MCS的构建 | 第42-44页 |
| ·重组载体p3301-1的构建 | 第44-45页 |
| ·H1Bx13亚基基因特异性表达载体p3301-1-H1Bx13以及H1Dx5亚基基因特异性表达载体p3301-1-H1Dx5的构建 | 第45-47页 |
| ·共转化载体p3301-1-H1Dx5-H1Bx13的构建 | 第47-50页 |
| 第三部分 优质HMW-GS基因对小麦的转化及转基因后代的检测 | 第50-62页 |
| ·实验材料以及所用溶液和培养基的配制 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·所用溶液和培养基的配制 | 第50-51页 |
| ·实验步骤和方法 | 第51-56页 |
| ·含有H1Bx13和H1Dx5亚基基因的表达载体转化农杆菌 | 第51-53页 |
| ·农杆菌感受态EHA105的制备 | 第51-52页 |
| ·载体质粒转化农杆菌EHA105感受态 | 第52-53页 |
| 3,2.1.3 农杆菌转化子的鉴定 | 第53页 |
| ·农杆菌苗端转化法进行小麦转化 | 第53-54页 |
| ·转基因小麦的分子检测 | 第54页 |
| ·转基因小麦植株后代种子的SDS—PAGE分析 | 第54-56页 |
| ·结果 | 第56-62页 |
| ·优质高分子量麦谷蛋白亚基基因表达载体对农杆菌的转化及检测 | 第56-57页 |
| ·转基因小麦的PCR检测 | 第57-59页 |
| ·转基因小麦T0及T1代植株后代SDS-PAGE分析结果 | 第59-62页 |
| 第四部分 高分子量麦谷蛋白亚基基因启动子的克隆及表达 | 第62-86页 |
| ·实验材料,试剂及相关溶液配制 | 第62-64页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·所用试剂 | 第62页 |
| ·载体 | 第62页 |
| ·所用溶液和培养基配制 | 第62-64页 |
| ·实验步骤和方法 | 第64-72页 |
| ·小麦基因组DNA的提取 | 第65页 |
| ·HMW-GS启动子的克隆 | 第65-67页 |
| ·启动子目的片段制备 | 第67-68页 |
| ·表达载体片段制备 | 第68-70页 |
| ·重组载体大肠杆菌阳性转化子的检测 | 第70页 |
| ·表达载体转化农杆菌EHA105 | 第70页 |
| ·用浸花法转化拟南芥 | 第70-71页 |
| ·拟南芥菜转化阳性株系筛选 | 第71页 |
| ·短柄草遗传转化 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-86页 |
| ·HMW-GS基因启动子的克隆 | 第72-78页 |
| ·载体片段的制备结果 | 第78-79页 |
| ·各启动子表达分析载体的构建结果 | 第79-83页 |
| ·转基因拟南芥T1代的获得 | 第83页 |
| ·转基因短柄草结果 | 第83-86页 |
| 第五部分 讨论 | 第86-90页 |
| ·小麦面粉加工品质基因及表达载体的特点 | 第86页 |
| ·小麦的农杆菌转化法 | 第86-87页 |
| ·小麦优质HMW-GS基因的转化和表达 | 第87-88页 |
| ·胚乳特异启动子的选择 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 硕士研究生在读期间发表文章情况 | 第101页 |
| 硕士研究生在读期间参与科研项目 | 第101-102页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第102页 |
