粗毛栓菌atp9基因的克隆、原核表达及进化分析
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 1. 文献综述 | 第7-28页 |
| ·木质素降解真菌 | 第7-12页 |
| ·木质素降解酶 | 第8-11页 |
| ·粗毛栓菌 | 第11-12页 |
| ·ATP合酶 | 第12-14页 |
| ·目的基因的反转录及原核表达 | 第14-18页 |
| ·目的基因的反转录 | 第14-16页 |
| ·转录产物的原核表达系统 | 第16-18页 |
| ·目的蛋白的检测 | 第18-23页 |
| ·蛋白质形貌特点的检测方法 | 第19-21页 |
| ·扫描电子显微镜 | 第19页 |
| ·透射电子显微镜 | 第19-20页 |
| ·原子力显微镜 | 第20-21页 |
| ·外源目的蛋白结构特点的检测 | 第21-23页 |
| ·动态光散射 | 第21-22页 |
| ·傅立叶变换红外光谱扫描 | 第22页 |
| ·圆二色谱 | 第22-23页 |
| ·分子进化分析与系统发育研究 | 第23-28页 |
| ·系统发育研究 | 第24-25页 |
| ·种系树的构建与分析 | 第25-28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·供试菌株与主要实验设备 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验用主要试剂 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·主要溶液配制 | 第29-31页 |
| ·蛋白质电泳相关溶液 | 第29-30页 |
| ·LB液体培养基 | 第30页 |
| ·LB固体培养基 | 第30页 |
| ·层析缓冲溶液 | 第30-31页 |
| ·其他 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·合成cDNA第一链 | 第32-33页 |
| ·构建原核表达质粒 | 第33-34页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第34-35页 |
| ·目的基因在E.coli中的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第36-37页 |
| ·色谱法纯化目的蛋白 | 第37页 |
| ·镍螯合层析 | 第37-38页 |
| ·构建分子进化树 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-44页 |
| ·apt9基因的克隆 | 第39-41页 |
| ·原核表达结果 | 第41-42页 |
| ·atp9基因的进化分析 | 第42页 |
| ·ATPase 9的同源序列比对 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-58页 |
| 研究生在校期间的科研成果 | 第58-59页 |
