广西烟草病毒病病原的分子鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·烟草病毒病的危害 | 第9-10页 |
| ·我国烟草病毒病的发生与分布 | 第10-11页 |
| ·主要烟草病毒病研究进展 | 第11-18页 |
| ·普通烟草花叶病毒病 | 第11-13页 |
| ·黄瓜花叶病毒病 | 第13-14页 |
| ·马铃薯Y病毒病 | 第14-15页 |
| ·烟草环斑病毒病 | 第15-16页 |
| ·烟草脉带花叶病毒 | 第16页 |
| ·烟草番茄斑萎病 | 第16-17页 |
| ·烟草曲叶病 | 第17-18页 |
| ·烟草病毒病原的检测方法 | 第18-21页 |
| ·指示植物法 | 第18页 |
| ·电子显微镜技术 | 第18-19页 |
| ·免疫学检测方法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试验样品的采集及保存 | 第22页 |
| ·质粒和菌种来源及保存 | 第22页 |
| ·试剂、酶及仪器 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-31页 |
| ·调查和采样 | 第22-23页 |
| ·间接ELISA | 第23-24页 |
| ·双抗夹心ELISA | 第24页 |
| ·植物总DNA提取 | 第24-25页 |
| ·TRIZOL法提取烟草叶片总RNA | 第25页 |
| ·CDNA第一链合成 | 第25-26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·PCR产物纯化 | 第26-27页 |
| ·目的片段和载体的连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌DH5A感受态的制备 | 第27-28页 |
| ·质粒的转化 | 第28页 |
| ·碱裂解法提质粒 | 第28-29页 |
| ·测序及分析 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-54页 |
| ·广西烟草病毒病发生调查结果及分析 | 第31-34页 |
| ·广西烟草病毒病病原种类鉴定 | 第34-40页 |
| ·ELISA鉴定 | 第34页 |
| ·烟草脉带花叶病毒的鉴定 | 第34-36页 |
| ·烟草曲叶病病原鉴定 | 第36-37页 |
| ·番茄环纹斑点病毒的鉴定 | 第37-40页 |
| ·三种病毒CP基因的克隆与分析 | 第40-54页 |
| ·TMV CP基因克隆与分析 | 第40-46页 |
| ·CMV CP基因克隆及序列分析 | 第46-50页 |
| ·PVY CP基因克隆及序列分析 | 第50-54页 |
| 4 结论 | 第54-56页 |
| ·广西烟草病毒病发生调查和检测鉴定结果 | 第54页 |
| ·广西烟草病毒病病原序列分析 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-57页 |
| 6 问题与展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录1:本实验所用的主要引物 | 第66-67页 |
| 附录2:本实验所用的主要仪器 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间参与的科研项目及所发表论文目录 | 第68页 |