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广西烟草病毒病病原的分子鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 前言第9-22页
   ·烟草病毒病的危害第9-10页
   ·我国烟草病毒病的发生与分布第10-11页
   ·主要烟草病毒病研究进展第11-18页
     ·普通烟草花叶病毒病第11-13页
     ·黄瓜花叶病毒病第13-14页
     ·马铃薯Y病毒病第14-15页
     ·烟草环斑病毒病第15-16页
     ·烟草脉带花叶病毒第16页
     ·烟草番茄斑萎病第16-17页
     ·烟草曲叶病第17-18页
   ·烟草病毒病原的检测方法第18-21页
     ·指示植物法第18页
     ·电子显微镜技术第18-19页
     ·免疫学检测方法第19-20页
     ·分子生物学检测方法第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-31页
   ·材料第22页
     ·试验样品的采集及保存第22页
     ·质粒和菌种来源及保存第22页
     ·试剂、酶及仪器第22页
     ·培养基第22页
   ·方法第22-31页
     ·调查和采样第22-23页
     ·间接ELISA第23-24页
     ·双抗夹心ELISA第24页
     ·植物总DNA提取第24-25页
     ·TRIZOL法提取烟草叶片总RNA第25页
     ·CDNA第一链合成第25-26页
     ·PCR反应第26页
     ·PCR产物纯化第26-27页
     ·目的片段和载体的连接第27页
     ·大肠杆菌DH5A感受态的制备第27-28页
     ·质粒的转化第28页
     ·碱裂解法提质粒第28-29页
     ·测序及分析第29-31页
3 结果与分析第31-54页
   ·广西烟草病毒病发生调查结果及分析第31-34页
   ·广西烟草病毒病病原种类鉴定第34-40页
     ·ELISA鉴定第34页
     ·烟草脉带花叶病毒的鉴定第34-36页
     ·烟草曲叶病病原鉴定第36-37页
     ·番茄环纹斑点病毒的鉴定第37-40页
   ·三种病毒CP基因的克隆与分析第40-54页
     ·TMV CP基因克隆与分析第40-46页
     ·CMV CP基因克隆及序列分析第46-50页
     ·PVY CP基因克隆及序列分析第50-54页
4 结论第54-56页
   ·广西烟草病毒病发生调查和检测鉴定结果第54页
   ·广西烟草病毒病病原序列分析第54-56页
5 讨论第56-57页
6 问题与展望第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
附录1:本实验所用的主要引物第66-67页
附录2:本实验所用的主要仪器第67-68页
攻读学位期间参与的科研项目及所发表论文目录第68页

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