摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
·奶山羊乳腺组织脂质代谢调控 | 第13-14页 |
·核受体概述 | 第14-17页 |
·核受体的结构 | 第14-15页 |
·核受体的作用机制 | 第15-16页 |
·核受体与脂质代谢 | 第16-17页 |
·LXRα概述 | 第17-22页 |
·LXRα的结构 | 第17页 |
·LXRα的激动剂 | 第17-18页 |
·LXR 的作用机制 | 第18-19页 |
·LXRα的功能 | 第19-22页 |
·研究方法与技术 | 第22-24页 |
·RNA 干扰 | 第22-23页 |
·腺病毒载体系统 | 第23页 |
·荧光实时定量PCR | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
第二章 西农萨能奶山羊LXRα基因的克隆及序列分析 | 第25-33页 |
·材料与方法 | 第25-28页 |
·试验材料 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-28页 |
·结果与分析 | 第28-31页 |
·乳腺组织总RNA 的提取 | 第28页 |
·目的基因CDS 区的克隆 | 第28-30页 |
·目的基因5’UTR 和3’UTR 的克隆 | 第30页 |
·西农萨能奶山羊LXRα基因序列分析 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·关于引物设计 | 第31页 |
·关于RNA 操作的讨论 | 第31-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
第三章 激动剂T0901317 对LXRα及其相关基因的影响 | 第33-41页 |
·材料与方法 | 第33-36页 |
·试验材料 | 第33页 |
·试验方法 | 第33-36页 |
·结果与分析 | 第36-39页 |
·激动剂最佳浓度的确定 | 第36-37页 |
·实时定量所用RNA 结果检测 | 第37-38页 |
·激动剂处理RT-qPCR 相关基因的溶解曲线 | 第38页 |
·T0901317 不同处理对乳腺上皮细胞相关基因mRNA 表达量的影响 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·影响荧光实时定量的因素 | 第39页 |
·关于T0901317 实时定量结果 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第四章 LXRα基因的腺病毒干扰载体的构建及功能研究 | 第41-55页 |
·材料与方法 | 第41-47页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·pDsRed1-C1-LXRα载体的构建 | 第47页 |
·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第47-48页 |
·有效shRNA 的筛选 | 第48-49页 |
·重组shRNA 腺病毒载体的构建 | 第49-50页 |
·重组shRNA 腺病毒载体的包装及扩增 | 第50-51页 |
·重组腺病毒滴度测定 | 第51页 |
·最佳MOI 的确定 | 第51-52页 |
·重组腺病毒载体的干扰研究 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第五章 LXRα基因腺病毒过表达载体的构建及其功能研究 | 第55-65页 |
·材料与方法 | 第55-59页 |
·试验材料 | 第55页 |
·试验方法 | 第55-59页 |
·结果与分析 | 第59-63页 |
·pAdTrack/CMV-LXRα表达载体的构建 | 第59-60页 |
·重组质粒Ad-LXRα的Pac I 酶切鉴定 | 第60页 |
·重组腺病毒过表达载体的包装及扩增 | 第60-61页 |
·重组腺病毒过表达载体滴度测定 | 第61-62页 |
·最佳MOI 的确定 | 第62页 |
·重组过表达腺病毒对乳腺上皮细胞相关基因 mRNA 表达量的影响 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·LXRα 与 FASN、ACACA 及 SREBP-1 基因 | 第63-64页 |
·LXRα 与 PPARγ 基因 | 第64页 |
·LXRα 与 H-FABP 基因 | 第64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第六章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简介 | 第81页 |