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LXRα基因RNA干扰和过表达对奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢的影响

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-25页
   ·奶山羊乳腺组织脂质代谢调控第13-14页
   ·核受体概述第14-17页
     ·核受体的结构第14-15页
     ·核受体的作用机制第15-16页
     ·核受体与脂质代谢第16-17页
   ·LXRα概述第17-22页
     ·LXRα的结构第17页
     ·LXRα的激动剂第17-18页
     ·LXR 的作用机制第18-19页
     ·LXRα的功能第19-22页
   ·研究方法与技术第22-24页
     ·RNA 干扰第22-23页
     ·腺病毒载体系统第23页
     ·荧光实时定量PCR第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24-25页
第二章 西农萨能奶山羊LXRα基因的克隆及序列分析第25-33页
   ·材料与方法第25-28页
     ·试验材料第25页
     ·试验方法第25-28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·乳腺组织总RNA 的提取第28页
     ·目的基因CDS 区的克隆第28-30页
     ·目的基因5’UTR 和3’UTR 的克隆第30页
     ·西农萨能奶山羊LXRα基因序列分析第30-31页
   ·讨论第31-32页
     ·关于引物设计第31页
     ·关于RNA 操作的讨论第31-32页
   ·小结第32-33页
第三章 激动剂T0901317 对LXRα及其相关基因的影响第33-41页
   ·材料与方法第33-36页
     ·试验材料第33页
     ·试验方法第33-36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·激动剂最佳浓度的确定第36-37页
     ·实时定量所用RNA 结果检测第37-38页
     ·激动剂处理RT-qPCR 相关基因的溶解曲线第38页
     ·T0901317 不同处理对乳腺上皮细胞相关基因mRNA 表达量的影响第38-39页
   ·讨论第39-40页
     ·影响荧光实时定量的因素第39页
     ·关于T0901317 实时定量结果第39-40页
   ·小结第40-41页
第四章 LXRα基因的腺病毒干扰载体的构建及功能研究第41-55页
   ·材料与方法第41-47页
     ·试验材料第41-42页
     ·试验方法第42-47页
   ·结果与分析第47-53页
     ·pDsRed1-C1-LXRα载体的构建第47页
     ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建第47-48页
     ·有效shRNA 的筛选第48-49页
     ·重组shRNA 腺病毒载体的构建第49-50页
     ·重组shRNA 腺病毒载体的包装及扩增第50-51页
     ·重组腺病毒滴度测定第51页
     ·最佳MOI 的确定第51-52页
     ·重组腺病毒载体的干扰研究第52-53页
   ·讨论第53-54页
   ·小结第54-55页
第五章 LXRα基因腺病毒过表达载体的构建及其功能研究第55-65页
   ·材料与方法第55-59页
     ·试验材料第55页
     ·试验方法第55-59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·pAdTrack/CMV-LXRα表达载体的构建第59-60页
     ·重组质粒Ad-LXRα的Pac I 酶切鉴定第60页
     ·重组腺病毒过表达载体的包装及扩增第60-61页
     ·重组腺病毒过表达载体滴度测定第61-62页
     ·最佳MOI 的确定第62页
     ·重组过表达腺病毒对乳腺上皮细胞相关基因 mRNA 表达量的影响第62-63页
   ·讨论第63-64页
     ·LXRα 与 FASN、ACACA 及 SREBP-1 基因第63-64页
     ·LXRα 与 PPARγ 基因第64页
     ·LXRα 与 H-FABP 基因第64页
   ·小结第64-65页
第六章 结论第65-66页
参考文献第66-72页
附录第72-80页
致谢第80-81页
作者简介第81页

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