摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
引言 | 第12-13页 |
1 Caspase非依赖性细胞凋亡与七叶皂苷的药理作用 | 第13-31页 |
·PARP-1/AIF介导的Caspase非依赖性细胞凋亡 | 第13-26页 |
·细胞凋亡及其信号通路 | 第13-16页 |
·聚(ADP-核糖)聚合酶-1[PARP-1] | 第16-19页 |
·凋亡诱导因子(AIF) | 第19-24页 |
·PARP-1/AIF与细胞核到线粒体的信号转导 | 第24-26页 |
·七叶皂苷及其药理作用 | 第26-30页 |
·化学组成 | 第26-29页 |
·提纯方法 | 第29页 |
·药理作用 | 第29-30页 |
·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
2 七叶皂苷钠体外抗肿瘤作用 | 第31-58页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·肿瘤细胞株 | 第31页 |
·细胞培养基 | 第31页 |
·药物及试剂 | 第31-32页 |
·仪器 | 第32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·细胞培养、增殖与传代 | 第32页 |
·试剂配制 | 第32-33页 |
·细胞生长状况观察 | 第33页 |
·SRB法测抑制率 | 第33-34页 |
·绘制细胞七天生长曲线 | 第34页 |
·细胞平板集落形成实验 | 第34页 |
·氚标记脱氧嘧啶核苷酸(~3H-TdR)掺入实验 | 第34-35页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用实验 | 第35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
·结果 | 第35-55页 |
·细胞生长增殖观察 | 第35页 |
·SRB法测定细胞生长抑制作用 | 第35-38页 |
·七叶皂苷钠对生长曲线的影响 | 第38-41页 |
·七叶皂苷钠对集落形成的影响 | 第41-46页 |
·七叶皂苷钠对肿瘤细胞~3H-TdR掺入的影响 | 第46页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第46-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
3 七叶皂苷钠体内抗肿瘤作用的研究 | 第58-78页 |
·材料 | 第58页 |
·动物 | 第58页 |
·药物 | 第58页 |
·细胞系 | 第58页 |
·主要试剂与仪器 | 第58页 |
·方法 | 第58-62页 |
·抑制实体瘤实验 | 第58-59页 |
·延长荷腹水瘤小鼠生存期实验 | 第59页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用对小鼠H22实体瘤的作用 | 第59-60页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用对H22腹水瘤小鼠生存期的作用 | 第60-61页 |
·七叶皂苷钠对荷瘤小鼠免疫功能的影响 | 第61-62页 |
·七叶皂苷钠对小鼠H22肝癌肿瘤血管生成的影响 | 第62页 |
·数据处理 | 第62页 |
·结果 | 第62-75页 |
·七叶皂苷钠对小鼠实体瘤增殖的抑制作用 | 第62-65页 |
·七叶皂苷钠对荷腹水瘤小鼠生存期的延长作用 | 第65-68页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用对小鼠H22实体瘤增殖的抑制作用 | 第68-69页 |
·七叶皂苷钠与化疗药物联用对H22腹水瘤小鼠生存期的延长作用 | 第69-71页 |
·七叶皂苷钠对荷瘤小鼠免疫功能无促进或抑制作用 | 第71-73页 |
·七叶皂苷钠抑制小鼠H22肝癌肿瘤血管的生成 | 第73-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-78页 |
4 七叶皂苷钠抗肿瘤作用的机制研究 | 第78-111页 |
·材料 | 第78-82页 |
·主要仪器 | 第78页 |
·主要试剂 | 第78-79页 |
·试剂配制 | 第79-81页 |
·细胞株 | 第81-82页 |
·细胞培养基 | 第82页 |
·方法 | 第82-89页 |
·光镜观察 | 第82页 |
·电镜观察 | 第82页 |
·AO/EB双重染色 | 第82-83页 |
·直流单向恒场凝胶电泳检测DNA ladder | 第83-84页 |
·脉冲场凝胶电泳检测DNA大片段 | 第84页 |
·TUNEL法检测细胞凋亡 | 第84-85页 |
·流式细胞术分析细胞周期 | 第85-86页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第86页 |
·流式细胞术检测线粒体膜电位 | 第86-87页 |
·细胞周期和细胞凋亡相关因子的western blot检测 | 第87-88页 |
·七叶皂苷钠对细胞内化疗药物浓度的影响 | 第88-89页 |
·统计学分析 | 第89页 |
·结果 | 第89-103页 |
·光镜下的细胞形态 | 第89页 |
·电镜下的细胞形态 | 第89-91页 |
·AO/EB双重染色检测细胞凋亡结果 | 第91页 |
·DNA凝胶电泳检测结果 | 第91-92页 |
·TUNEL检测结果 | 第92页 |
·细胞周期分析结果 | 第92-94页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡率结果 | 第94页 |
·流式细胞术检测线粒体膜电位结果 | 第94-97页 |
·细胞周期相关因子的western blot蛋白印迹 | 第97-98页 |
·细胞凋亡相关因子的western blot蛋白印迹 | 第98-102页 |
·七叶皂苷钠可促进细胞内化疗药物浓度的升高 | 第102-103页 |
·讨论 | 第103-109页 |
·七叶皂苷钠对细胞周期的影响 | 第103-105页 |
·七叶皂苷钠诱导细胞发生凋亡 | 第105-108页 |
·提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性 | 第108-109页 |
·小结 | 第109-111页 |
5 结论 | 第111-113页 |
6 创新点 | 第113-114页 |
7 展望 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-126页 |
作者简介 | 第126页 |
攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第126-127页 |
致谢 | 第127-128页 |