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山羊痘病毒表达载体的构建

目录第1-8页
英文缩写词第8-10页
中文摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
前言第12-13页
文献综述第13-40页
 综述一 羊痘的研究进展第13-20页
  1.病原第13-14页
   ·羊痘病毒的形态及理化特性第13页
   ·羊痘病毒的基因结构组成第13-14页
   ·羊痘病毒的培养特性第14页
  2.流行病学及临床症状第14-15页
   ·流行现状及地理分布第14页
   ·易感动物及传播途径第14页
   ·流行特点第14页
   ·临床症状第14-15页
  3.病理变化及诊断第15-17页
   ·体表病变第15页
   ·剖检变化第15页
   ·显微病理变化第15-16页
   ·临床诊断第16页
   ·实验室确诊第16-17页
  4.羊痘的防治第17-20页
   ·羊痘的治疗第17页
   ·防制措施第17-20页
 综述二 羊痘病毒分子生物学研究进展第20-28页
  1.CPV的基本特征第20-21页
   ·CPV的形态结构特征第20页
   ·CPV的复制特点第20-21页
   ·CPV的酶系统和蛋白第21页
  2.CPV的基因组结构第21-22页
   ·CPV基因序列结构第21-22页
   ·CPV基因组酶切结构分析第22页
  3.羊痘病毒株间系第22-23页
   ·SGPV(SPPV>PV)与LSDV的关系第22-23页
   ·SPPV与GTPV的关系第23页
   ·SGPV野毒株与疫苗株的关系第23页
  4.CPV的分子生物学诊断法第23-24页
   ·聚合酶链式反应第23页
   ·免疫印迹试验第23-24页
   ·基因芯片技术第24页
  5.与CPV毒力相关的蛋白及其功能第24-28页
   ·核糖核酸还原酶第24-25页
   ·胸腺嘧啶核苷激酶第25页
   ·IFN-γ受体蛋白第25页
   ·P32蛋白第25-28页
 综述三 羊痘病毒疫苗与羊痘病毒表达载体的研究进展第28-40页
  1.CPV疫苗的研究概况第28-30页
   ·CPV传统疫苗第28页
   ·亚单位疫苗第28页
   ·新型CPV基因疫苗第28-30页
  2.羊痘病毒表达载体第30-40页
   ·CPV表达载体的产生第30页
   ·CPV作为载体的特点第30-31页
   ·CPV表达载体的构建要素和构建注意事项第31-34页
   ·重组羊痘病毒的产生及其影响因素第34-35页
   ·重组病毒的稳定性及其影响因素第35-40页
实验研究第40-68页
 实验一 山羊痘病毒的培养及非必需区基因及侧翼序列的扩增与序列分析第40-53页
  1.材料与方法第40-45页
   ·材料第40-41页
   ·方法第41-45页
  2.结果第45-50页
   ·睾丸细胞培养及病毒培养第45-46页
   ·目的基因的PCR扩增第46页
   ·目的基因克隆的筛选与鉴定第46-47页
   ·目的基因序列测定及分析第47-50页
  3.讨论第50-52页
   ·外源基因的插入位点的选择第50-51页
   ·细胞培养与病毒研究的重要性第51页
   ·基因序列分析第51-52页
  参考文献第52-53页
 实验二 山羊痘病毒疫苗株表达载体的构建第53-68页
  1.材料与方法第53-58页
   ·材料第53-54页
   ·方法第54-58页
  2.结果第58-63页
   ·GTPV表达载体的构建结果第58-62页
   ·转移载体转染GTPV感染的细胞的结果第62页
   ·GTPV表达载体重组病毒筛选检测结果第62-63页
   ·重组病毒的遗传稳定性鉴定第63页
  3.讨论第63-66页
   ·CPV表达载体的构建第63-64页
   ·转染与重组第64-65页
   ·关于启动子的选择第65页
   ·关于报告基因第65-66页
   ·同源臂对同源重组的影响第66页
  参考文献第66-68页
结论第68-69页
附录第69-80页
 附录Ⅰ 实验一 技术路线第69-70页
 附录Ⅱ 实验二 技术路线第70-73页
 附录Ⅲ TK基因及其侧翼序列第73-74页
 附录Ⅳ RR小亚基基因及侧翼序列第74-75页
 附录Ⅴ γ-IFNR小亚基基因及侧翼序列第75-76页
 附录Ⅵ 含P11启动子的重组病毒测序鉴定结果第76-77页
 附录Ⅶ 含I1L启动子的重组病毒测序鉴定结果第77-78页
 附录Ⅷ 试剂配制第78-80页
致谢第80-81页
作者简介第81页

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