目录 | 第1-8页 |
英文缩写词 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
文献综述 | 第13-40页 |
综述一 羊痘的研究进展 | 第13-20页 |
1.病原 | 第13-14页 |
·羊痘病毒的形态及理化特性 | 第13页 |
·羊痘病毒的基因结构组成 | 第13-14页 |
·羊痘病毒的培养特性 | 第14页 |
2.流行病学及临床症状 | 第14-15页 |
·流行现状及地理分布 | 第14页 |
·易感动物及传播途径 | 第14页 |
·流行特点 | 第14页 |
·临床症状 | 第14-15页 |
3.病理变化及诊断 | 第15-17页 |
·体表病变 | 第15页 |
·剖检变化 | 第15页 |
·显微病理变化 | 第15-16页 |
·临床诊断 | 第16页 |
·实验室确诊 | 第16-17页 |
4.羊痘的防治 | 第17-20页 |
·羊痘的治疗 | 第17页 |
·防制措施 | 第17-20页 |
综述二 羊痘病毒分子生物学研究进展 | 第20-28页 |
1.CPV的基本特征 | 第20-21页 |
·CPV的形态结构特征 | 第20页 |
·CPV的复制特点 | 第20-21页 |
·CPV的酶系统和蛋白 | 第21页 |
2.CPV的基因组结构 | 第21-22页 |
·CPV基因序列结构 | 第21-22页 |
·CPV基因组酶切结构分析 | 第22页 |
3.羊痘病毒株间系 | 第22-23页 |
·SGPV(SPPV>PV)与LSDV的关系 | 第22-23页 |
·SPPV与GTPV的关系 | 第23页 |
·SGPV野毒株与疫苗株的关系 | 第23页 |
4.CPV的分子生物学诊断法 | 第23-24页 |
·聚合酶链式反应 | 第23页 |
·免疫印迹试验 | 第23-24页 |
·基因芯片技术 | 第24页 |
5.与CPV毒力相关的蛋白及其功能 | 第24-28页 |
·核糖核酸还原酶 | 第24-25页 |
·胸腺嘧啶核苷激酶 | 第25页 |
·IFN-γ受体蛋白 | 第25页 |
·P32蛋白 | 第25-28页 |
综述三 羊痘病毒疫苗与羊痘病毒表达载体的研究进展 | 第28-40页 |
1.CPV疫苗的研究概况 | 第28-30页 |
·CPV传统疫苗 | 第28页 |
·亚单位疫苗 | 第28页 |
·新型CPV基因疫苗 | 第28-30页 |
2.羊痘病毒表达载体 | 第30-40页 |
·CPV表达载体的产生 | 第30页 |
·CPV作为载体的特点 | 第30-31页 |
·CPV表达载体的构建要素和构建注意事项 | 第31-34页 |
·重组羊痘病毒的产生及其影响因素 | 第34-35页 |
·重组病毒的稳定性及其影响因素 | 第35-40页 |
实验研究 | 第40-68页 |
实验一 山羊痘病毒的培养及非必需区基因及侧翼序列的扩增与序列分析 | 第40-53页 |
1.材料与方法 | 第40-45页 |
·材料 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-45页 |
2.结果 | 第45-50页 |
·睾丸细胞培养及病毒培养 | 第45-46页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第46页 |
·目的基因克隆的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
·目的基因序列测定及分析 | 第47-50页 |
3.讨论 | 第50-52页 |
·外源基因的插入位点的选择 | 第50-51页 |
·细胞培养与病毒研究的重要性 | 第51页 |
·基因序列分析 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-53页 |
实验二 山羊痘病毒疫苗株表达载体的构建 | 第53-68页 |
1.材料与方法 | 第53-58页 |
·材料 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-58页 |
2.结果 | 第58-63页 |
·GTPV表达载体的构建结果 | 第58-62页 |
·转移载体转染GTPV感染的细胞的结果 | 第62页 |
·GTPV表达载体重组病毒筛选检测结果 | 第62-63页 |
·重组病毒的遗传稳定性鉴定 | 第63页 |
3.讨论 | 第63-66页 |
·CPV表达载体的构建 | 第63-64页 |
·转染与重组 | 第64-65页 |
·关于启动子的选择 | 第65页 |
·关于报告基因 | 第65-66页 |
·同源臂对同源重组的影响 | 第66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
附录 | 第69-80页 |
附录Ⅰ 实验一 技术路线 | 第69-70页 |
附录Ⅱ 实验二 技术路线 | 第70-73页 |
附录Ⅲ TK基因及其侧翼序列 | 第73-74页 |
附录Ⅳ RR小亚基基因及侧翼序列 | 第74-75页 |
附录Ⅴ γ-IFNR小亚基基因及侧翼序列 | 第75-76页 |
附录Ⅵ 含P11启动子的重组病毒测序鉴定结果 | 第76-77页 |
附录Ⅶ 含I1L启动子的重组病毒测序鉴定结果 | 第77-78页 |
附录Ⅷ 试剂配制 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简介 | 第81页 |