摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1 植物基因对基因抗性 | 第13-19页 |
·基因对基因假说 | 第13-14页 |
·保卫假说 | 第14-15页 |
·番茄对叶霉病菌(Cladosporium fulvum)的抗性 | 第15-19页 |
·番茄抗叶霉菌基因(Cf) | 第16页 |
·C.fulvum Avr基因 | 第16-17页 |
·番茄Cf基因对C.fulvum Avr基因产物的识别互作 | 第17页 |
·Cf/Avr介导的抗叶霉菌信号传导途径 | 第17-18页 |
·环境条件对Cf介导的HR和抗病性的影响 | 第18-19页 |
2 植物非寄主抗性 | 第19-22页 |
·植物非寄主抗性研究现状 | 第19-20页 |
·非寄主抗性产生机理 | 第20-21页 |
·非寄主抗性信号传导途径 | 第21-22页 |
3 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能鉴定中的应用 | 第22-26页 |
·VIGS的作用机制 | 第23-24页 |
·影响VIGS沉默效率的主要因子 | 第24页 |
·VIGS在植物基因功能鉴定中的应用现状 | 第24-26页 |
4 本论文研究内容 | 第26-28页 |
第二章 89个番茄Cf介导的HR产生前后差异表达cDNA-AFLP片段的克隆及序列分析 | 第28-51页 |
1 材料和方法 | 第30-33页 |
·实验材料 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-33页 |
·ACE片段的回收 | 第30页 |
·ACE片段的克隆 | 第30-33页 |
·ACE片段的PCR扩增 | 第30-31页 |
·PCR扩增产物与T-vector的连接 | 第31页 |
·大肠杆菌(DH5α)感受态细胞制备及质粒转化 | 第31-32页 |
·碱法抽提质粒 | 第32页 |
·阳性克隆检验 | 第32-33页 |
·测序及序列分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-37页 |
·克隆的89个ACE序列 | 第33-34页 |
·Avr9/Cf-9和Avr4/Cf-4激发的ACE片段的比较 | 第34页 |
·89个ACE片段对应基因编码蛋白的功能分类 | 第34-36页 |
·功能与ACRE、ART及已克隆的ACE基因重叠的ACE片段 | 第36页 |
·功能与已有研究报道的基因不同的ACE片段 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-51页 |
第三章 62个基因在本氏烟对稻白叶枯病菌和番茄对叶霉病菌抗性中作用的分析鉴定 | 第51-78页 |
1 材料与方法 | 第52-59页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·植物材料 | 第52页 |
·质粒与菌种 | 第52-53页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第53页 |
·实验技术路线 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-59页 |
·基因沉默表达结构的构建 | 第54页 |
·沉默结构的农杆菌转化 | 第54-55页 |
·农杆菌(GV3101)感受态细胞制备 | 第54页 |
·电转化 | 第54-55页 |
·PCR检验 | 第55页 |
·基因沉默诱导处理 | 第55-56页 |
·农杆菌接种液的准备 | 第55页 |
·农杆菌液的接种 | 第55-56页 |
·基因沉默后植株的培养 | 第56页 |
·HR检验 | 第56页 |
·Cf/Avr介导的HR的检验 | 第56页 |
·水稻白叶枯菌(Xoo)诱导的HR的检验 | 第56页 |
·植物总RNA提取和电泳 | 第56-57页 |
·器皿和容器的处理 | 第56页 |
·RNA的提取 | 第56-57页 |
·甲醛变性电泳 | 第57页 |
·反转录获取cDNA | 第57页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第57-58页 |
·叶片中水稻白叶枯病菌含量的监测 | 第58页 |
·基因沉默植株HR检验的统计分析 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-74页 |
·供基因沉默分析的基因片段的选择 | 第59-61页 |
·目标片段基因沉默结构的构建 | 第61页 |
·62个基因沉默处理后植株表型 | 第61-63页 |
·62个基因沉默处理对Cf/Avr介导的过敏性坏死反应的影响 | 第63-67页 |
·62个基因沉默处理对水稻白叶枯菌诱导本氏烟产生过敏性坏死反应的影响 | 第67-73页 |
·基因沉默的RT-PCR验证 | 第73页 |
·VIGS处理植株浸润稻白叶枯病菌后叶片中菌量变化监测 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-78页 |
第四章 全文小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |