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本氏烟对稻白叶枯病菌和番茄对叶霉病菌的抗性相关基因鉴定

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 文献综述第13-28页
 1 植物基因对基因抗性第13-19页
   ·基因对基因假说第13-14页
   ·保卫假说第14-15页
   ·番茄对叶霉病菌(Cladosporium fulvum)的抗性第15-19页
     ·番茄抗叶霉菌基因(Cf)第16页
     ·C.fulvum Avr基因第16-17页
     ·番茄Cf基因对C.fulvum Avr基因产物的识别互作第17页
     ·Cf/Avr介导的抗叶霉菌信号传导途径第17-18页
     ·环境条件对Cf介导的HR和抗病性的影响第18-19页
 2 植物非寄主抗性第19-22页
   ·植物非寄主抗性研究现状第19-20页
   ·非寄主抗性产生机理第20-21页
   ·非寄主抗性信号传导途径第21-22页
 3 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能鉴定中的应用第22-26页
   ·VIGS的作用机制第23-24页
   ·影响VIGS沉默效率的主要因子第24页
   ·VIGS在植物基因功能鉴定中的应用现状第24-26页
 4 本论文研究内容第26-28页
第二章 89个番茄Cf介导的HR产生前后差异表达cDNA-AFLP片段的克隆及序列分析第28-51页
 1 材料和方法第30-33页
   ·实验材料第30页
   ·实验方法第30-33页
     ·ACE片段的回收第30页
     ·ACE片段的克隆第30-33页
       ·ACE片段的PCR扩增第30-31页
       ·PCR扩增产物与T-vector的连接第31页
       ·大肠杆菌(DH5α)感受态细胞制备及质粒转化第31-32页
       ·碱法抽提质粒第32页
       ·阳性克隆检验第32-33页
     ·测序及序列分析第33页
 2 结果与分析第33-37页
   ·克隆的89个ACE序列第33-34页
   ·Avr9/Cf-9和Avr4/Cf-4激发的ACE片段的比较第34页
   ·89个ACE片段对应基因编码蛋白的功能分类第34-36页
   ·功能与ACRE、ART及已克隆的ACE基因重叠的ACE片段第36页
   ·功能与已有研究报道的基因不同的ACE片段第36-37页
 3 讨论第37-51页
第三章 62个基因在本氏烟对稻白叶枯病菌和番茄对叶霉病菌抗性中作用的分析鉴定第51-78页
 1 材料与方法第52-59页
   ·实验材料第52-53页
     ·植物材料第52页
     ·质粒与菌种第52-53页
     ·主要试剂与试剂盒第53页
   ·实验技术路线第53-54页
   ·实验方法第54-59页
     ·基因沉默表达结构的构建第54页
     ·沉默结构的农杆菌转化第54-55页
       ·农杆菌(GV3101)感受态细胞制备第54页
       ·电转化第54-55页
       ·PCR检验第55页
     ·基因沉默诱导处理第55-56页
       ·农杆菌接种液的准备第55页
       ·农杆菌液的接种第55-56页
       ·基因沉默后植株的培养第56页
     ·HR检验第56页
       ·Cf/Avr介导的HR的检验第56页
       ·水稻白叶枯菌(Xoo)诱导的HR的检验第56页
     ·植物总RNA提取和电泳第56-57页
       ·器皿和容器的处理第56页
       ·RNA的提取第56-57页
       ·甲醛变性电泳第57页
     ·反转录获取cDNA第57页
     ·半定量RT-PCR分析第57-58页
     ·叶片中水稻白叶枯病菌含量的监测第58页
     ·基因沉默植株HR检验的统计分析第58-59页
 2 结果与分析第59-74页
   ·供基因沉默分析的基因片段的选择第59-61页
   ·目标片段基因沉默结构的构建第61页
   ·62个基因沉默处理后植株表型第61-63页
   ·62个基因沉默处理对Cf/Avr介导的过敏性坏死反应的影响第63-67页
   ·62个基因沉默处理对水稻白叶枯菌诱导本氏烟产生过敏性坏死反应的影响第67-73页
   ·基因沉默的RT-PCR验证第73页
   ·VIGS处理植株浸润稻白叶枯病菌后叶片中菌量变化监测第73-74页
 3 讨论第74-78页
第四章 全文小结第78-79页
参考文献第79-87页

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