| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| ·猪流感研究进展 | 第13-14页 |
| ·猪流感病毒的基因重排 | 第14页 |
| ·宿主和传播 | 第14-15页 |
| ·疾病的致病性和临床症状 | 第15页 |
| ·诊断技术 | 第15-16页 |
| ·控制猪流感病毒感染 | 第16-17页 |
| ·H5 亚型流感病毒致病性分子基础 | 第17-18页 |
| ·HA 蛋白和受体分布对病毒致病性的影响 | 第18-19页 |
| ·HA 裂解 | 第19-20页 |
| ·陆地禽类获得HA 突变后的影响 | 第20-21页 |
| ·聚合酶复制复合体对流感病毒的致病性 | 第21-22页 |
| ·NP 对致病性影响 | 第22页 |
| ·M 基因对致病性影响 | 第22-23页 |
| ·NS 基因和N51 蛋白对病毒致病性的影响 | 第23-24页 |
| ·分析大量基因组来证明氨基酸的改变影响病毒致病性或传播能力 | 第24-25页 |
| ·总结和展望 | 第25页 |
| ·A 型流感病毒反向遗传操作系统 | 第25-27页 |
| ·本研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 猪流感病毒分离鉴定和血清学调查 | 第28-32页 |
| ·材料与方法 | 第28-29页 |
| ·样品采集和处理 | 第28页 |
| ·病毒分离鉴定和血清抗体检测 | 第28页 |
| ·病毒的纯化 | 第28页 |
| ·鉴定引物。利用oli906.0 软件设计，亚型鉴定引物见表引见表2-1 | 第28-29页 |
| ·病毒TCID50（组织半数感染量）测定 | 第29页 |
| ·病毒EID50 （鸡胚半数感染量）测定 | 第29页 |
| ·病毒细胞动力学实验 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| ·病毒分离鉴定和样品血清抗体检测结果 | 第29-30页 |
| ·病毒TCID_(50)（组织半数感染量）和EID_(50)测定结果 | 第30页 |
| ·猪流感病毒细胞动力学实验 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·正确判断采样时间是分离猪流感病毒的关键 | 第31页 |
| ·鸡胚和细胞系对分离猪流感病毒分离率差别 | 第31页 |
| ·目前我国猪群流行的猪流感毒株 | 第31-32页 |
| 第三章 H1N2 亚型猪流感病毒遗传演化分析 | 第32-54页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·试剂和毒株 | 第32-33页 |
| ·病毒RNA 提取 | 第33页 |
| ·病毒RNA 的RT-PCR | 第33-34页 |
| ·PCR 产物回收和纯化 | 第34页 |
| ·目的基因DNA 产物的连接与转化 | 第34-35页 |
| ·阳性重组质粒的筛选 | 第35页 |
| ·酚氯仿高真空绝缘硅脂粗提质粒 | 第35页 |
| ·质粒DNA 纯化 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·测序 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-52页 |
| ·H1N2 全基因组测序 | 第37页 |
| ·核苷酸同源性比较 | 第37-38页 |
| ·H1N2 亚型猪流感病毒同源性比较和遗传演化分析 | 第38-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 H3N2 亚型猪流感病毒遗传演化分析 | 第54-72页 |
| ·材料方法 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-70页 |
| ·H3N2 全基因组测序 | 第54页 |
| ·核苷酸同源性比较 | 第54-55页 |
| ·H3N2 亚型猪流感病毒同源性分析和进化树 | 第55-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 猪流感病毒对猪的动物回归实验 | 第72-77页 |
| ·材料与方法 | 第72-73页 |
| ·毒株 | 第72页 |
| ·实验器材 | 第72页 |
| ·实验动物 | 第72页 |
| ·实验步骤 | 第72-73页 |
| ·麻醉 | 第72页 |
| ·感染 | 第72页 |
| ·记录 | 第72-73页 |
| ·剖杀 | 第73页 |
| ·病毒滴定 | 第73页 |
| ·整理数据 | 第73页 |
| ·结果 | 第73-76页 |
| ·攻毒后症状 | 第73-74页 |
| ·病毒滴定结果 | 第74-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| ·猪流感病毒H1N2 和H3N2 在猪上呼吸道复制 | 第76页 |
| ·猪流感病毒公共卫生意义 | 第76-77页 |
| 第六章 H5N1 亚型流感病毒对小鼠致病性差异的分子基础 | 第77-102页 |
| ·材料与方法 | 第77-82页 |
| ·模型病毒株和细胞 | 第77页 |
| ·实验动物 | 第77页 |
| ·pBD 载体 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·引物 | 第77-78页 |
| ·病毒RNA 提取、反转录与PCR | 第78页 |
| ·重组质粒的构建 | 第78-79页 |
| ·病毒拯救 | 第79-81页 |
| ·病毒对BALB/c 小鼠的致病性试验 | 第81页 |
| ·PA、M 基因定点突变 | 第81页 |
| ·基因突变病毒的救获 | 第81页 |
| ·突变病毒对BALB/c 小鼠的致病性试验 | 第81-82页 |
| ·结果 | 第82-98页 |
| ·野生型病毒的全基因组的氨基酸差异 | 第82-83页 |
| ·重组pBD 质粒克隆鉴定结果 | 第83页 |
| ·病毒救获与鉴定结果 | 第83页 |
| ·救获病毒EID50测定结果 | 第83-84页 |
| ·野生病毒和救获重组病毒对BALB/c 小鼠的致病性 | 第84-86页 |
| ·野生病毒﹑亲本重组病毒及单基因替换病毒的小鼠死亡结果 | 第86-87页 |
| ·10~6EID_(50) 剂量感染野生病毒﹑亲本重组病毒及单基因替换病毒的小鼠肺病毒滴定结果 | 第87-88页 |
| ·野生病毒﹑亲本重组病毒及单基因替换病毒对小鼠致死性比较 | 第88-90页 |
| ·基因定点突变病毒救获结果 | 第90-91页 |
| ·突变病毒对BALB/c 小鼠的致病性 | 第91-93页 |
| ·10~6EID_(50)剂量突变病毒感染小鼠的死亡结果 | 第93-94页 |
| ·突变病毒感染小鼠肺脏病毒滴定结果 | 第94-95页 |
| ·救获突变病毒、亲本病毒及野生病毒对小鼠致死性比较 | 第95-96页 |
| ·M、PA 双基因替换重组病毒及野生病毒对小鼠致死性比较 | 第96-98页 |
| ·讨论 | 第98-102页 |
| 第七章 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 个人简历 | 第141-142页 |
