摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-24页 |
·甘蔗抗黑穗病研究现状及其意义 | 第11-14页 |
·甘蔗黑穗病症状及其病原研究 | 第11-12页 |
·甘蔗对黑穗病抗性机制的研究 | 第12-13页 |
·甘蔗抗黑穗病性的遗传研究 | 第13页 |
·甘蔗抗黑穗病育种研究 | 第13-14页 |
·植物与病原菌互作研究 | 第14-20页 |
·生理生化水平研究 | 第14页 |
·基因差异表达研究 | 第14-20页 |
·消减杂交 | 第15页 |
·mRNA差异显示 | 第15-16页 |
·cDNA代表性差异分析 | 第16-17页 |
·基因表达系列分析 | 第17-18页 |
·抑制消减杂交 | 第18-19页 |
·cDNA微阵列 | 第19-20页 |
·差异削减展示 | 第20页 |
·cDNA-AFLP技术及其在植物基因差异表达分析上的应用 | 第20-23页 |
·cDNA-AFLP技术的原理和方法 | 第20-21页 |
·cDNA-AFLP技术的优点和局限性 | 第21页 |
·cDNA-AFLP技术的操作要点 | 第21-22页 |
·cDNA-AFLP技术在基因差异表达研究上的应用 | 第22-23页 |
·本研究的意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-33页 |
·试验材料 | 第24页 |
·仪器设备及试剂 | 第24页 |
·仪器设备 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-33页 |
·试验用甘蔗材料的处理方法 | 第24-25页 |
·RNA的提取 | 第25页 |
·DEPC处理 | 第25页 |
·RNA提取 | 第25页 |
·全长cDNA第一链和第二链的合成 | 第25-27页 |
·第一链cDNA的合成 | 第25-26页 |
·LD-PCR扩增cDNA第二链 | 第26-27页 |
·限制性酶切及接头连接 | 第27页 |
·预扩增 | 第27-28页 |
·选择性PCR扩增 | 第28页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第28-29页 |
·凝胶银染 | 第29页 |
·差异片段的回收和重扩增 | 第29-30页 |
·差异片段的克隆与序列测定 | 第30页 |
·感受态细胞的制备 | 第30页 |
·载体连接 | 第30页 |
·感受态细胞转化 | 第30页 |
·cDNA测序 | 第30页 |
·半定量RT-PCR方法验证差异表达基因的真实性 | 第30-32页 |
·差异表达基因的blastx分析 | 第32页 |
·半定量RT-PCR方法分析差异表达基因的表达谱 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-42页 |
·RNA提取结果 | 第33页 |
·cDNA-AFLP分析结果 | 第33-35页 |
·差异片段的二次扩增结果 | 第35页 |
·差异表达基因的RT-PCR验证 | 第35-36页 |
·差异表达基因的同源性分析与功能分类 | 第36-39页 |
·差异表达基因的表达谱分析 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-51页 |
·研究材料和接种方法的选择 | 第42页 |
·关于甘蔗与黑穗病菌互作研究中cDNA-AFLP和银染技术的应用 | 第42-43页 |
·黑穗病菌胁迫下甘蔗差异表达基因的功能及其作用模式 | 第43-48页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗细胞拯救与防御系统的影响 | 第44页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗新陈代谢和能量代谢的影响 | 第44-45页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗细胞内运输活动的影响 | 第45页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗体内信号转导过程的影响 | 第45-46页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗体内核酸代谢的影响 | 第46-47页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗体内转录过程的影响 | 第47页 |
·黑穗病菌胁迫对甘蔗体内蛋白质合成与调节的影响 | 第47-48页 |
·未知功能蛋白 | 第48页 |
·关于差异表达基因表达谱分析中RT-PCR技术的应用 | 第48-49页 |
·关于本研究的局限性和后续研究设想 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录一 | 第60-61页 |
附录二 | 第61-66页 |
硕士期间发表及投稿论文 | 第66-67页 |
导师简历 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |