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水稻T-DNA插入突变体库侧翼序列的分离与分析及控制叶色性状基因OsRNase Z的功能研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩写名词表第12-13页
1 文献综述第13-45页
   ·水稻基因组学研究第13-24页
     ·水稻结构基因组学研究第13-16页
       ·水稻基因组作图第13-14页
       ·水稻基因组序列的测定第14-16页
     ·水稻功能基因组学研究第16-24页
       ·基因表达产物分析第17-18页
       ·利用突变体进行基因功能的研究第18-24页
   ·T-DNA插入侧翼序列的分离方法第24-28页
     ·TAIL-PCR第25-26页
     ·反向PCR第26-27页
     ·质粒拯救第27-28页
     ·接头PCR第28页
     ·PCR步移(PCR-Walking)第28页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第28-31页
     ·农杆菌及其介导遗传转化的原理第28-30页
     ·农杆菌介导的水稻转化的发展第30页
     ·农杆菌介导的水稻转化法构建水稻突变体库第30-31页
   ·T-DNA整合机理和特征第31-34页
     ·植物基因组中T-DNA整合的一般特征第31页
     ·T-DNA整合模型第31-33页
     ·T-DNA在水稻染色体水平上的分布第33-34页
   ·水稻主要插入突变体库介绍第34-36页
     ·Tos17插入突变体数据库第34页
     ·RMD(Rice Mutant Database)第34-35页
     ·SHIP(Shanghai T-DNA Insertion Population)第35页
     ·RISD(Rice T-DNA Insertion Sequence Database)第35-36页
   ·植物叶色突变分子机制研究进展第36-43页
     ·植物叶色突变的类型第36-37页
     ·植物叶色突变的分子机制第37-41页
       ·叶绿素合成途径上基因的突变产生叶色变异第37-39页
       ·血红素到光敏色素生色团生物合成途径上基因突变产生叶色突变第39-40页
       ·编码其他叶绿素蛋白的基因突变引起叶色变异第40-41页
       ·与光合系统无直接关系的基因突变也可能引起叶色变异第41页
     ·植物叶色突变在生物学研究中的应用第41-43页
   ·RNase Z基因功能研究进展第43-45页
2 本研究的目的和意义第45-46页
3 材料与方法第46-56页
   ·实验材料第46-48页
     ·植物材料第46页
     ·菌株、质粒和感受态细胞第46页
     ·细菌载体及构建方法第46-48页
   ·实验方法第48-56页
     ·转基因植株的DNA抽提和PCR阳性检测第48-49页
     ·转基因植株T-DNA插入侧翼序列的分离第49-51页
     ·PCR产物纯化和测序第51-52页
     ·T-DNA插入侧翼序列的分析第52页
     ·其他研究单位的T-DNA插入侧翼序列的收集第52页
     ·RNA的抽提、检测和反转录第52-53页
     ·RT-PCR检测目标基因的表达第53-54页
     ·农杆菌介导的遗传转化第54页
     ·透射电镜观察细胞超微结构第54页
     ·叶绿素含量的测定第54-55页
     ·目标基因的亚细胞定位第55页
     ·目标蛋白OsRNase Z的原核表达第55-56页
4 结果与分析第56-88页
   ·水稻T-DNA插入突变体库植株PCR阳性检测第56页
   ·水稻T-DNA插入侧翼序列的分离第56-57页
   ·T-DNA侧翼序列的分类第57-58页
   ·T-DNA插入侧翼序列在水稻基因组中的分布特征第58-70页
     ·侧翼序列在水稻基因组上的分布特征第58-61页
     ·侧翼序列在水稻各染色体上分布位置特征第61-64页
     ·侧翼序列在基因组各区域分布特征第64-67页
     ·侧翼序列在水稻功能基因的分布特征第67-70页
   ·T-DNA在水稻基因组中插入位点特征第70-75页
     ·T-DNA插入位点附近的特殊一级结构第70-71页
     ·T-DNA插入位点附近弯曲度的变化第71-73页
     ·T-DNA插入位点附近的碱基组成特征第73-75页
   ·白化苗性状突变体的筛选及基因功能研究第75-88页
     ·水稻颜色突变体表型的筛选第75-76页
     ·目标白化苗突变体的获得第76-77页
     ·白化苗突变体T-DNA插入位点序列分析与基因功能预测第77-78页
     ·白化苗突变体的功能互补实验第78-79页
     ·OsRNase Z基因家族分析第79页
     ·突变植株的超微结构的观察和叶绿素含量的测定第79-82页
     ·OsRNase Z基因的表达与叶绿素合成密切相关第82-83页
     ·RNAi抑制OsRNase Z基因导致白化苗第83-85页
     ·OsRNase Z基因的亚细胞定位第85页
     ·OsRNase Z等位突变体的研究第85-86页
     ·OsRNase Z蛋白表达第86-88页
5 讨论第88-97页
   ·侧翼序列分离方法效率的比较第88-89页
   ·水稻T-DNA插入突变体库的Tos17插入侧翼序列的分离第89-90页
   ·T-DNA和Tos17在水稻基因组的分布第90-93页
     ·T-DNA和Tos17在水稻基因组的非随机分布第90-91页
     ·T-DNA和Tos17在水稻基因区间的非随机分布第91-92页
     ·T-DNA和Tos17在水稻功能基因分布的偏爱性第92-93页
   ·T-DNA插入位点临近序列的弯曲度和碱基构成第93-94页
   ·水稻基因组饱和插入所需群体大小的估计第94-95页
   ·水稻T-DNA侧翼序列数据库的应用第95页
   ·白化苗基因型愈伤的获得方法及其应用第95-96页
   ·OsRNase Z被T-DNA破坏导致白化苗性状出现的原因推测第96-97页
参考文献第97-110页
附录第110-111页
致谢第111页

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