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马铃薯StTm-2基因的克隆和表达分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-12页
1 绪论第12-24页
   ·利用病毒基因介导的抗性策略第12-14页
     ·利用病毒外壳蛋白(coat protein,CP)基因介导病毒抗性第12页
     ·复制酶介导的保护作用(replicase mediated protection.第12-13页
     ·利用病毒运动蛋白(movement protein,MP)基因介导的病毒抗性第13页
     ·利用卫星RNA 介导的抗性第13-14页
     ·利用核酶基因介导的抗性策略第14页
   ·利用植物自身R 基因或RGA 基因策略第14-18页
     ·植物自身基因介导的病毒抗性第14-15页
     ·番茄抗病毒基因Tm-2~2 研究进展第15-17页
     ·植物RGA 基因的应用策略第17-18页
     ·PR 蛋白基因第18页
     ·利用核糖体失活蛋白RIPs 基因第18页
   ·马铃薯抗病毒育种的研究进展第18-21页
   ·本论文研究目的、意义与内容第21-23页
     ·研究目的及意义第21页
     ·研究内容第21-23页
   ·本论文研究的创新点第23-24页
2 番茄品系KBV 抗性鉴定第24-26页
   ·材料和试剂第24页
   ·实验方法第24页
   ·结果分析第24-25页
   ·讨论第25-26页
3 番茄品系KBV 中TM-2~2 基因片段克隆第26-36页
   ·材料与试剂第26-27页
     ·植物材料、质粒、菌株、试剂第26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·常用试剂配制第26-27页
   ·实验方法第27-29页
     ·番茄叶片总RNA 提取第27-28页
     ·番茄叶片基因组DNA 提取第28-29页
     ·核酸质量及浓度测定第29页
   ·番茄TM-2~2 基因片段的克隆第29-32页
   ·结果与分析第32-34页
   ·讨论第34-36页
4 番茄TM-2~2 超表达载体的构建第36-40页
   ·材料与试剂第36-37页
     ·植物材料、质粒、菌株第36页
     ·主要仪器设备第36页
     ·主要化学试剂和试剂盒第36页
     ·实验所用试剂的配制第36-37页
   ·实验方法第37-38页
     ·质粒DNA 的制备第37页
     ·质粒的酶切及连接第37-38页
     ·载体构建第38页
   ·结果与分析第38页
   ·讨论第38-40页
5 试管薯诱导及转化体系的摸索第40-49页
   ·材料与试剂第40-42页
     ·植物材料、质粒、菌株第40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·主要化学试剂和试剂盒第40-41页
     ·实验所用试剂的配制第41-42页
   ·试验方法第42-45页
     ·基础材料的获得及试管薯的诱导第42-43页
     ·不同条件对试管薯诱导的影响第43页
     ·农杆菌介导的试管薯转化体系的摸索第43-45页
   ·结果分析第45-47页
   ·讨论第47-49页
6 马铃薯STTM-2 基因的全长CDNA 的克隆第49-58页
   ·材料与试剂第49页
     ·植物材料、质粒、菌株、试剂(同上3.1.1)第49页
     ·主要仪器设备(同上3.1.2)第49页
     ·常用试剂配制(同上3.1.3)第49页
   ·实验方法第49页
     ·马铃薯叶片总RNA 提取(同上3.2.1)第49页
     ·马铃薯叶片基因组DNA 提取(同上3.2.2)第49页
     ·核酸质量及浓度测定(同上3.2.3)第49页
   ·STTM-2 基因的全长CDNA 的克隆第49-52页
     ·StTm-2 部分片段的克隆第49-51页
     ·StTm-2 3’端cDNA 序列扩增第51-52页
   ·结果与分析第52-56页
   ·讨论第56-58页
7 STTM-2 基因在马铃薯不同组织中的表达第58-62页
   ·材料与试剂第58页
     ·植物材料及处理第58页
     ·主要仪器设备第58页
     ·主要化学试剂和试剂盒第58页
     ·常用试剂配制第58页
   ·方法第58-60页
     ·总RNA 的制备第58-59页
     ·Northern 杂交第59-60页
   ·结果与分析第60-61页
   ·讨论第61-62页
8 结论与展望第62-63页
   ·主要结论第62页
   ·后续研究工作的展望第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-68页
附录第68页

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