| 缩写词 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-22页 |
| 1 木本植物基因转化研究进展 | 第14-19页 |
| ·概述 | 第14-15页 |
| ·遗传转化受体系统 | 第15页 |
| ·遗传转化的方法 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
| ·直接转移法 | 第16页 |
| ·影响农杆菌介导木本植物转化的因素 | 第16-18页 |
| ·受体系统 | 第16-17页 |
| ·农杆菌菌株的选择 | 第17页 |
| ·外植体及基因型 | 第17页 |
| ·Vir区基因的活化 | 第17页 |
| ·外植体的预培养 | 第17页 |
| ·农杆菌与外植体共培养 | 第17-18页 |
| ·遗传转化进展中存在的问题 | 第18页 |
| ·嵌合现象的产生 | 第18页 |
| ·复杂的基因沉默现象 | 第18页 |
| ·转基因植物再生困难 | 第18页 |
| ·转基因林木的展望 | 第18-19页 |
| 2 相思树生物技术研究进展 | 第19-21页 |
| ·器官形成方式 | 第19-20页 |
| ·不定芽发生型 | 第19页 |
| ·丛生芽发生型 | 第19页 |
| ·胚状体发生型 | 第19-20页 |
| ·采用的培养基类型、生长调节剂和添加物 | 第20页 |
| ·相思树基因工程研究进展 | 第20-21页 |
| ·相思遗传转化研究中存在的问题 | 第21页 |
| 3 本研究的内容和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 相思树遗传转化再生系统的建立 | 第22-41页 |
| 第一节 无菌系的建立以及不同激素浓度浸泡对种子萌发的影响 | 第22-24页 |
| 1 材料与方法 | 第22页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-23页 |
| ·厚荚相思无菌株系的建立 | 第22-23页 |
| ·不同激素浓度浸泡对种子萌发的影响 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-24页 |
| ·影响相思树种子发芽率的因素 | 第23-24页 |
| ·种子消毒以及激素浸泡对萌发芽的影响 | 第24页 |
| 第二节 厚荚相思茎段再生体系的研究 | 第24-27页 |
| 1 材料与方法 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·培养基的选择 | 第24-25页 |
| ·培养条件 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| ·生长素和细胞分裂素是相思树茎段离体培养成功的关键 | 第26-27页 |
| ·茎段培养中应注意材料的选择 | 第27页 |
| 第三节 厚荚相思叶片愈伤组织的诱导和植株的再生 | 第27-33页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·叶片培养与愈伤组织诱导 | 第27-28页 |
| ·叶片愈伤组织的再生 | 第28页 |
| ·培养条件 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·不同培养基对厚荚相思叶片培养的影响 | 第28-30页 |
| ·叶片愈伤组织的再生 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| ·影响相思树叶片愈伤组织诱导的关键因素 | 第31-32页 |
| ·BA浓度与基本培养基对叶片生长的影响 | 第32页 |
| ·影响相思树叶片愈伤再生植株的因素 | 第32页 |
| ·叶片愈伤组织的诱导与再生植株形成的意义 | 第32-33页 |
| 第四节 厚荚相思瘤状物再生体系的研究 | 第33-36页 |
| 1 材料与方法 | 第33页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33页 |
| ·瘤状物增殖试验 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-36页 |
| ·影响厚荚相思瘤状物增殖的因素 | 第33-36页 |
| 3 讨论 | 第36页 |
| ·瘤状物可作为厚荚相思遗传转化良好的受体系统 | 第36页 |
| ·切割有利于瘤状物增值 | 第36页 |
| 第五节 厚荚相思的壮苗生根与移栽 | 第36-41页 |
| 1 材料与方法 | 第37页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37页 |
| ·厚荚相思的壮苗生根 | 第37页 |
| ·厚荚相思的炼苗与移栽 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-40页 |
| ·基本培养基和NAA对厚荚相思的壮苗生根的影响 | 第37-39页 |
| ·不同基质对炼苗的成活率影响 | 第39-40页 |
| 3 小结 | 第40-41页 |
| ·在相思壮苗生根中基本培养基和NAA所起的作用 | 第40页 |
| ·再生植株的移栽的注意问题 | 第40-41页 |
| 第三章 厚荚相思瘤状物产生机理的研究 | 第41-50页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·过氧化氢(CAT)酶活性的测定 | 第41-42页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第42-43页 |
| ·DNA相对含量的测定 | 第43页 |
| ·药品 | 第43页 |
| ·厚荚相思基因组DNA的提取 | 第43页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第43-45页 |
| ·牛血清白蛋白溶液标准曲线表 | 第43-44页 |
| ·样品的测定 | 第44页 |
| ·结果计算 | 第44-45页 |
| ·SDS-PAGE分析比较 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·厚荚相思的CAT酶活性的测定结果 | 第46页 |
| ·厚荚相思的POD酶活性的测定结果 | 第46-47页 |
| ·DNA相对含量的测定结果 | 第47页 |
| ·蛋白质含量的测定结果 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE分析比较结果 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| ·酶在绿色瘤状物形成阶段表现活跃 | 第49页 |
| ·绿色瘤状物形成期间出现的DNA、蛋白质变化 | 第49-50页 |
| 第四章 厚荚相思遗传转化的研究 | 第50-70页 |
| 第一节 厚荚相思的抗生素敏感性试验 | 第50-53页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-51页 |
| ·抗生素敏感性试验的形态指标 | 第51页 |
| ·绿色瘤状物生活力测定 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-53页 |
| ·抗生素敏感性试验 | 第51-53页 |
| ·卡那霉素对枇杷外植体生长的影响 | 第51页 |
| ·潮霉素对瘤状物生长的影响 | 第51-52页 |
| ·羧卞青霉素和头孢霉素对瘤状物增值的影响 | 第52页 |
| ·生活力测定 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53页 |
| ·相思树遗传转化受体系统的选择 | 第53页 |
| ·相思树抗生素浓度的选择 | 第53页 |
| 第二节 PEAS基因导入厚荚相思瘤状物的研究 | 第53-58页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·接菌 | 第54页 |
| ·农杆菌悬浮液浓度及共培养时间的影响 | 第54页 |
| ·除菌 | 第54-55页 |
| ·抗性瘤状物的筛选 | 第55页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55页 |
| ·不同筛选法对抗性瘤状物筛选的影响 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-56页 |
| ·农杆菌悬浊液浓度和共培养时间对农杆菌感染绿色瘤状物的影响 | 第55-56页 |
| ·抗性瘤状物的筛选 | 第56页 |
| ·不同筛选法对抗性瘤状物筛选的影响 | 第56页 |
| ·褐变原因的观察分析 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| ·农杆菌菌株EHA105感染绿色瘤状物的条件选择有待进一步优化 | 第56-58页 |
| ·改变受体材料的选择 | 第56-57页 |
| ·对农杆菌进行Vir基因的活化 | 第57页 |
| ·褐变问题的解决有助于根癌农杆菌菌株EHA105转化瘤状物 | 第57-58页 |
| 第三节 根癌农杆菌介导ACS反义基因转化厚荚相思的研究 | 第58-70页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·农杆菌转化厚荚相思 | 第58-59页 |
| ·除菌 | 第59页 |
| ·抗生素除菌 | 第59页 |
| ·AgNO_3除菌 | 第59页 |
| ·农杆菌重悬液浓度、侵染时间和共培养时间对转化的影响 | 第59-60页 |
| ·共培养培养基pH值对转化的影响 | 第60页 |
| ·GUS瞬时组织化学法检测 | 第60页 |
| ·基本原理 | 第60页 |
| ·溶液配制 | 第60页 |
| ·GUS组织化学检测的步骤 | 第60页 |
| ·ACS反义基因转化相思抗性瘤状物的筛选、获得及检测 | 第60-62页 |
| ·抗性瘤状物的筛选 | 第61-62页 |
| ·不同筛选法对抗性瘤状物筛选的影响 | 第61页 |
| ·不同卡那霉素浓度对抗性瘤状物筛选的影响 | 第61页 |
| ·抗性瘤状物的继代增殖 | 第61页 |
| ·抗性瘤状物的分化培养 | 第61页 |
| ·再生植株的GUS组织化学法检测 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-67页 |
| ·农杆菌重悬液浓度、侵染时间和共培养时间对转化的影响 | 第62-64页 |
| ·共培养培养基pH值对GUS瞬时表达的影响 | 第64-65页 |
| ·AgNO_3对瘤状物表面农杆菌生长的影响 | 第65页 |
| ·抗性瘤状物的筛选情况 | 第65-67页 |
| ·不同筛选法对抗性瘤状物筛选的影响 | 第65页 |
| ·不同卡那霉素浓度对抗性瘤状物筛选的影响 | 第65-66页 |
| ·抗性瘤状物继代增殖 | 第66页 |
| ·抗性瘤状物的分化培养 | 第66-67页 |
| ·抗性瘤状物的GUS组织化学法检测 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| ·农杆菌重悬液浓度及接菌时间是影响相思树转化效率的关键 | 第67页 |
| ·共培养时间、共培养培养PH对厚荚转化效率的影响 | 第67-68页 |
| ·AgNO_3在遗传转化中的作用 | 第68页 |
| ·不同菌株在转化上的差异 | 第68页 |
| ·转化的选择方法 | 第68-69页 |
| ·转化体的分化困难的问题 | 第69页 |
| ·转化体的检测 | 第69-70页 |
| 第五章 小结 | 第70-73页 |
| 1 厚荚相思高效离体再生体系的建立 | 第70-71页 |
| ·无菌苗的获得 | 第70页 |
| ·以茎段茎段、叶片和瘤状物建立的再生系统 | 第70-71页 |
| ·茎段再生系统的建立 | 第70页 |
| ·叶片再生系统的建立 | 第70页 |
| ·瘤状物再生系统的建立 | 第70-71页 |
| 2 厚荚相思瘤状物产生机理的研究 | 第71页 |
| ·酶在绿色瘤状物形成阶段表现活跃 | 第71页 |
| ·绿色瘤状物形成期间出现的DNA、蛋白质变化 | 第71页 |
| 3 厚荚相思遗传转化的研究 | 第71-73页 |
| ·转化条件的选择与优化 | 第71-72页 |
| ·转化过程中抗性瘤状物的筛选与获得 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 图版及图版说明 | 第78-80页 |
| 图版 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
