| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-27页 |
| 1 ADPN的结构 | 第11-13页 |
| 2 ADPN的表达及分泌的调控 | 第13-15页 |
| 3 ADPN受体及其表达调控 | 第15-17页 |
| 4 ADPN与各种疾病的关系 | 第17-26页 |
| ·ADPN与癌症的关系 | 第17-22页 |
| ·ADPN与其他疾病的的关系 | 第22-26页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第一部分 重组人ADPN基因构建、蛋白表达纯化及其活性鉴定 | 第27-51页 |
| ·材料 | 第27-31页 |
| ·方法 | 第31-42页 |
| ·人脂联素核甘酸的分段与合成 | 第31-32页 |
| ·重叠PCR组装脂联素基因 | 第32-35页 |
| ·表达载体的构建与转化 | 第35-37页 |
| ·重组子的菌液PCR筛选与序列分析 | 第37-38页 |
| ·脂联素基因在大肠杆菌中的表达 | 第38-40页 |
| ·目的蛋白的纯化与复性 | 第40-41页 |
| ·蛋白浓度测定—紫外吸收法 | 第41页 |
| ·ADPN的活性分析 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-49页 |
| ·ADPN基因的组装与扩增 | 第42-43页 |
| ·表达载体的构建、菌落PCR筛选与序列分析 | 第43-44页 |
| ·ADPN基因在大肠杆菌中的表达 | 第44-45页 |
| ·最适诱导时间 | 第45-48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第二部分 ADPN对Hela细胞生长的影响 | 第51-74页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-56页 |
| ·细胞培养 | 第51页 |
| ·癌细胞中ADPN受体(Adipo-R)的表达情况 | 第51-54页 |
| ·MTT法筛选ADPN对几种肿瘤细胞的的生长影响 | 第54页 |
| ·吖啶橙染色法检测ADPN作用后细胞凋亡 | 第54页 |
| ·DNA ladder法检测ADPN作用后细胞发生的凋亡 | 第54页 |
| ·流式细胞仪检测ADPN对Hela细胞生长的影响 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR分析ADPN对Hela细胞周期因子及凋亡基因表达的影响 | 第55-56页 |
| ·Western blotting检测ADPN作用后细胞AMPK磷酸化 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-67页 |
| ·ADPN受体的分析 | 第56-60页 |
| ·MTT法筛选ADPN对几种肿瘤细胞的的生长影响 | 第60-61页 |
| ·吖啶橙染色检测ADPN作用后Hela细胞发生的凋亡 | 第61-62页 |
| ·ADPN诱导Hela细胞DNA发生断裂 | 第62页 |
| ·流式细胞仪检测ADPN对Hela细胞生长的影响 | 第62-63页 |
| ·ADPN促进了adipoR2的表达 | 第63-64页 |
| ·ADPN对Hela细胞周期的影响 | 第64-65页 |
| ·Western blotting检测ADPN作用后Hela细胞的AMPK磷酸化 | 第65-66页 |
| ·ADPN调节抗凋亡基因Bcl-2和凋亡基因Bax的表达 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-74页 |
| 总结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
