| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| ·穿膜肽TAT蛋白研究进展 | 第8-12页 |
| ·TAT蛋白的结构基础 | 第8-9页 |
| ·TAT蛋白的穿膜机制 | 第9-11页 |
| ·TAT蛋白的优点及应用 | 第11-12页 |
| ·Rhox5的研究进展 | 第12-17页 |
| ·与Rhox5蛋白相互作用的分子 | 第17页 |
| ·本课题的基本思路 | 第17-18页 |
| ·实验技术路线简图 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-38页 |
| ·实验材料 | 第19-26页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·培养基和常用溶液配制 | 第20-26页 |
| ·实验方法 | 第26-38页 |
| ·构建原核质粒载体pET22b(+)-TAT-Rhox5 | 第26-30页 |
| ·生物信息学分析Rhox5 cDNA序列的密码子组成 | 第30页 |
| ·重组子pET22b(+)-TAT-Rhox5的诱导表达 | 第30-33页 |
| ·TAT-Rhox5融合蛋白纯化 | 第33-35页 |
| ·检测TAT-Rhox5蛋白进入细胞的最佳浓度 | 第35-36页 |
| ·以免疫荧光检测TAT-Rhox5蛋白在细胞内的定位 | 第36-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-50页 |
| ·pET22b(+)-Rhox5-6HIS的鉴定 | 第38-39页 |
| ·pET22b(+)-TAT-Rhox5-6HIS的构建 | 第39-41页 |
| ·生物信息学分析Rhox5 cDNA序列的密码子组成 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pET22b(+)-TAT-Rhox5在Rosetta~(TM)2(DE3)中的蛋白表达 | 第42-44页 |
| ·IPTG诱导时间的筛选 | 第44-45页 |
| ·诱导剂IPTG的用量 | 第45-46页 |
| ·Rhox5-6His蛋白的溶解性 | 第46-47页 |
| ·TAT-Rhox5融合蛋白Ni~(2+)柱纯化 | 第47-48页 |
| ·检测TAT-Rhox5融合蛋白进入细胞的最佳浓度 | 第48页 |
| ·检测TAT-Rhox5融合蛋白在细胞内的定位 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·蛋白表达系统的选择 | 第50-51页 |
| ·包涵体形式的TAT-Rhox5融合蛋白的Ni~(2+)柱纯化 | 第51-52页 |
| ·TAT介导Rhox5融合蛋白的细胞转导 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
