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橡胶氨同化关键酶GDH基因的克隆及其表达分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-31页
   ·橡胶及天然橡胶第8-10页
   ·橡胶树生物学研究进展第10-12页
     ·天然橡胶的产胶生理学第10-12页
   ·橡胶树分子生物学研究进展第12-20页
     ·从橡胶树中克隆的基因或cDNA第13-17页
     ·橡胶树胶乳中的基因表达第17-18页
     ·橡胶树基因工程的研究进展第18-19页
     ·橡胶种质资源的研究第19-20页
   ·高等植物中谷氨酸脱氢酶及其生理作用第20-30页
       ·G DH 酶生化特性及活性变化第21-23页
     ·GDH 与光呼吸作用的关系第23页
     ·GDH 在碳氮代谢中的作用第23-25页
     ·GDH 与植物逆境的关系第25-26页
     ·GDH 基因克隆第26-29页
     ·本研究的意义第29-30页
   ·本研究的技术路线第30-31页
2 材料与方法第31-43页
   ·试验材料第31页
     ·菌种和试剂第31页
     ·仪器与设备第31页
   ·方法第31-34页
     ·橡胶树胶乳总RNA 的提取实验方法第31-32页
     ·橡胶树叶片、树皮Total RNA的提取第32-33页
     ·RNA电泳检测第33-34页
     ·总RNA 质量的鉴定第34页
   ·橡胶HbGDH 基因部分序列的PCR 扩增第34-36页
     ·反转录第34-35页
     ·引物设计第35页
     ·橡胶HbGDH 基因的PCR 扩增第35-36页
   ·回收目的片段第36-37页
     ·PCR 产物的凝胶电泳观察第36页
     ·PCR 产物的回收第36-37页
   ·PCR 目的片段的克隆及重组子筛选第37-39页
     ·回收特异性条带第37页
     ·连接T-Vector第37页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第37-38页
     ·感受态鉴定第38页
     ·转化第38-39页
   ·菌落筛选及质粒DNA 的微量提取第39-40页
   ·重组质粒的鉴定及保存第40页
     ·重组质粒进行酶切鉴定第40页
     ·重组子菌种穿刺培养保存菌种第40页
     ·重组子菌种液体菌种的保存第40页
   ·HbGDH 克隆片断的测序第40-41页
   ·HbGDH 生物信息学分析及RT-PCR 表达分析第41-43页
     ·HbGDH 生物信息学分析第41页
     ·HbGDH 基因的RT-PCR 表达分析第41-43页
3 结果与分析第43-55页
   ·胶乳总RNA 的提取第43页
   ·GDH 基因PCR 克隆第43-45页
     ·GDH 基因的PCR 扩增及阳性重组子的筛选第43-44页
     ·测序分析第44-45页
   ·橡胶HbGDH 生物信息学分析第45-53页
     ·橡胶HbGDH 基因的核酸及对应氨基酸序列的组成成分及理化性质分析第45-46页
     ·根据克隆片段核苷酸序列推导的AA 序列同源性分析第46-48页
     ·橡胶HbGDH 信号肽的预测和分析第48页
     ·橡胶HbGDH 跨膜结构域的预测和分析第48-50页
     ·橡胶HbGDH 疏水性/亲水性的预测和分析第50页
     ·橡胶HbGDH 二级及三级结构的预测和分析第50-52页
     ·不同植物HbGDH 氨基酸序列的分子系统进化分析第52-53页
     ·橡胶HbGDH 保守结构域分析第53页
   ·橡胶HbGDH 基因的RT-PCR 表达分析第53-55页
     ·橡胶HbGDH 在不同组织的表达分析第53-55页
4 讨论第55-62页
   ·关于RNA 提取第55-56页
   ·关于HbGDH 的序列分析第56-58页
   ·关于植物GDH 研究第58-59页
   ·关于基因表达水平的检测第59-62页
5 结论第62-68页
缩写词(Abbreviation)第68-69页
致谢第69页

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