摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 前言 | 第8-31页 |
·橡胶及天然橡胶 | 第8-10页 |
·橡胶树生物学研究进展 | 第10-12页 |
·天然橡胶的产胶生理学 | 第10-12页 |
·橡胶树分子生物学研究进展 | 第12-20页 |
·从橡胶树中克隆的基因或cDNA | 第13-17页 |
·橡胶树胶乳中的基因表达 | 第17-18页 |
·橡胶树基因工程的研究进展 | 第18-19页 |
·橡胶种质资源的研究 | 第19-20页 |
·高等植物中谷氨酸脱氢酶及其生理作用 | 第20-30页 |
·G DH 酶生化特性及活性变化 | 第21-23页 |
·GDH 与光呼吸作用的关系 | 第23页 |
·GDH 在碳氮代谢中的作用 | 第23-25页 |
·GDH 与植物逆境的关系 | 第25-26页 |
·GDH 基因克隆 | 第26-29页 |
·本研究的意义 | 第29-30页 |
·本研究的技术路线 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-43页 |
·试验材料 | 第31页 |
·菌种和试剂 | 第31页 |
·仪器与设备 | 第31页 |
·方法 | 第31-34页 |
·橡胶树胶乳总RNA 的提取实验方法 | 第31-32页 |
·橡胶树叶片、树皮Total RNA的提取 | 第32-33页 |
·RNA电泳检测 | 第33-34页 |
·总RNA 质量的鉴定 | 第34页 |
·橡胶HbGDH 基因部分序列的PCR 扩增 | 第34-36页 |
·反转录 | 第34-35页 |
·引物设计 | 第35页 |
·橡胶HbGDH 基因的PCR 扩增 | 第35-36页 |
·回收目的片段 | 第36-37页 |
·PCR 产物的凝胶电泳观察 | 第36页 |
·PCR 产物的回收 | 第36-37页 |
·PCR 目的片段的克隆及重组子筛选 | 第37-39页 |
·回收特异性条带 | 第37页 |
·连接T-Vector | 第37页 |
·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·感受态鉴定 | 第38页 |
·转化 | 第38-39页 |
·菌落筛选及质粒DNA 的微量提取 | 第39-40页 |
·重组质粒的鉴定及保存 | 第40页 |
·重组质粒进行酶切鉴定 | 第40页 |
·重组子菌种穿刺培养保存菌种 | 第40页 |
·重组子菌种液体菌种的保存 | 第40页 |
·HbGDH 克隆片断的测序 | 第40-41页 |
·HbGDH 生物信息学分析及RT-PCR 表达分析 | 第41-43页 |
·HbGDH 生物信息学分析 | 第41页 |
·HbGDH 基因的RT-PCR 表达分析 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-55页 |
·胶乳总RNA 的提取 | 第43页 |
·GDH 基因PCR 克隆 | 第43-45页 |
·GDH 基因的PCR 扩增及阳性重组子的筛选 | 第43-44页 |
·测序分析 | 第44-45页 |
·橡胶HbGDH 生物信息学分析 | 第45-53页 |
·橡胶HbGDH 基因的核酸及对应氨基酸序列的组成成分及理化性质分析 | 第45-46页 |
·根据克隆片段核苷酸序列推导的AA 序列同源性分析 | 第46-48页 |
·橡胶HbGDH 信号肽的预测和分析 | 第48页 |
·橡胶HbGDH 跨膜结构域的预测和分析 | 第48-50页 |
·橡胶HbGDH 疏水性/亲水性的预测和分析 | 第50页 |
·橡胶HbGDH 二级及三级结构的预测和分析 | 第50-52页 |
·不同植物HbGDH 氨基酸序列的分子系统进化分析 | 第52-53页 |
·橡胶HbGDH 保守结构域分析 | 第53页 |
·橡胶HbGDH 基因的RT-PCR 表达分析 | 第53-55页 |
·橡胶HbGDH 在不同组织的表达分析 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-62页 |
·关于RNA 提取 | 第55-56页 |
·关于HbGDH 的序列分析 | 第56-58页 |
·关于植物GDH 研究 | 第58-59页 |
·关于基因表达水平的检测 | 第59-62页 |
5 结论 | 第62-68页 |
缩写词(Abbreviation) | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |