摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1. 安吉白茶的特点 | 第11页 |
2. 差异表达基因的研究方法 | 第11-14页 |
3. 茶树功能基因克隆方法 | 第14-18页 |
4. SSH技术在植物基因克隆上的应用 | 第18-19页 |
5. 研究目的及意义 | 第19-20页 |
6. 研究内容 | 第20-22页 |
第二章 安吉白茶氨基酸组分及含量分析 | 第22-26页 |
1. 材料与方法 | 第22页 |
·材料 | 第22页 |
·主要仪器及色谱条件 | 第22页 |
·主要仪器和试剂 | 第22页 |
·色谱条件 | 第22页 |
·样品前处理 | 第22页 |
2. 结果与分析 | 第22-23页 |
3. 讨论 | 第23-26页 |
第三章 安吉白茶总 RNA提取及mRNA的分离纯化 | 第26-32页 |
1. 材料与方法 | 第26-28页 |
·材料 | 第26页 |
·主要仪器与试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·实验方法和步骤 | 第26-28页 |
·RNA酶活性的去除 | 第26-27页 |
·RNA抽提方法的优化 | 第27页 |
·RNA浓度及质量检测 | 第27页 |
·mRNA分离纯化 | 第27-28页 |
2. 结果与分析 | 第28-30页 |
·常规 Tri-Reagent法对茶树总RNA的提取效果 | 第28页 |
·全程低温Tri-Reagent法对茶树总RNA的提取效果 | 第28页 |
·改良Tri-Reagent法对茶树总RNA的提取效果 | 第28-29页 |
·改良Tri-Reagent+PVP法对茶树RNA的提取效果 | 第29页 |
·改良Tri-Reagent法对茶树越冬老叶总RNA的提取效果 | 第29页 |
·mRNA分离纯化 | 第29-30页 |
3. 讨论 | 第30-31页 |
·关于RNA提取方法的改进 | 第30页 |
·关于材料嫩度对RNA提取效果的影响 | 第30-31页 |
·关于如何降低外源RNase的污染 | 第31页 |
4. 小结 | 第31-32页 |
第四章 安吉白茶抑制性消减文库的构建和差异表达基因的初步筛选 | 第32-44页 |
1. 材料与方法 | 第32-39页 |
·材料 | 第32页 |
·引物与接头 | 第32页 |
·主要仪器与试剂 | 第32-34页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·试剂及培养基的配制 | 第33-34页 |
·斑点杂交相关试剂 | 第34页 |
·实验方法和步骤 | 第34-39页 |
·抑制性消减杂交 | 第34-36页 |
·PCR产物的纯化与载体连接、转化与鉴定 | 第36-37页 |
·地高辛标记的斑点杂交筛选 | 第37-38页 |
·插入片段的序列测定和分析 | 第38-39页 |
2. 结果与分析 | 第39-42页 |
·消减cDNA文库的构建 | 第39页 |
·菌液PCR筛选正反向消减文库 | 第39-40页 |
·斑点杂交结果 | 第40-41页 |
·测序结果的比较与分析 | 第41-42页 |
3. 讨论 | 第42-43页 |
·抑制性消减杂交的有效性问题 | 第42页 |
·安吉白茶白期与绿期差异表达的基因 | 第42-43页 |
4. 小结 | 第43-44页 |
第五章 荧光定量 PCR检测差异表达基因 | 第44-50页 |
1. 材料与方法 | 第44-46页 |
·材料 | 第44页 |
·引物 | 第44页 |
·基本原理 | 第44页 |
·主要仪器与试剂 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·实验方法和步骤 | 第45-46页 |
·荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第45页 |
·荧光定量PCR反应体系 | 第45-46页 |
2. 结果与分析 | 第46-49页 |
·荧光定量 PCR标准曲线的构建 | 第46-47页 |
·荧光定量 PCR结果 | 第47-48页 |
·特异性和重复性 | 第48页 |
·基因表达量的检测 | 第48-49页 |
3. 讨论 | 第49-50页 |
第六章 全文总结 | 第50-52页 |
1. 主要研究成果 | 第50页 |
2. 展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |
在读期间发表的文章 | 第60页 |
参与课题 | 第60页 |