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核糖体失活蛋白(RIPs)基因的克隆及其对甜菜遗传转化的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-13页
1 引言第13-40页
   ·植物抗病基因工程研究策略及进展第13-22页
     ·植物抗病毒基因工程第13-19页
     ·植物抗细菌病害基因工程第19-20页
     ·植物抗真菌病害基因工程第20-22页
     ·植物抗病基因工程的应用及存在的问题第22页
   ·核糖体失活蛋白(RIPs)研究进展第22-30页
     ·RIPs 在植物中的分布、分类及一般性质第23-24页
     ·RIPs 的酶学活性第24-25页
     ·RIPs 的作用机制及功能第25-28页
     ·RIPs 在植物基因工程方面的应用第28-29页
     ·RIPs 在医学方面的应用第29-30页
     ·RIPs 研究展望第30页
   ·甜菜基因工程研究进展第30-37页
     ·植物基因工程在甜菜中的应用第30-33页
     ·甜菜转基因方法第33-34页
     ·甜菜基因工程的安全性评价第34-35页
     ·存在的问题与研究展望第35-37页
   ·本研究课题的目的意义及研究内容第37-40页
     ·选题依据及意义第37-39页
     ·主要研究内容第39-40页
2 核糖体失活蛋白(RIPs)基因的克隆及序列分析第40-55页
   ·材料与方法第40-48页
     ·材料第40-41页
     ·方法第41-48页
   ·结果与分析第48-54页
     ·玉米叶片总DNA 的提取第48页
     ·PCR 扩增RIPs 基因第48-49页
     ·重组质粒的鉴定第49-51页
     ·基因序列的测定与分析第51-54页
   ·讨论第54-55页
3 农杆菌介导的甜菜遗传转化体系的优化第55-72页
   ·材料与方法第55-58页
     ·实验材料第55-57页
     ·方法第57-58页
   ·结果与分析第58-69页
     ·甜菜种子表面灭菌方法的确定第58-59页
     ·预培养时间对抗性芽获得的影响第59-60页
     ·农杆菌的培养和侵染菌液的准备第60-61页
     ·不同菌液浓度和侵染时间对抗性芽分化的影响第61-63页
     ·共培养温度与时间对抗性芽分化的影响第63-64页
     ·AS 对农杆菌转化效率的影响第64-65页
     ·Kan 对子叶节转化筛选浓度的确定第65-67页
     ·抗性苗的获得及抗性植株PCR 检测第67-69页
   ·讨论第69-72页
     ·受体材料、生长状况及基因型对甜菜遗传转化的影响第69页
     ·农杆菌的生长状态对遗传转化的影响第69-70页
     ·农杆菌侵染液浓度和侵染时间对甜菜转化的影响第70页
     ·共培养环境对甜菜子叶节遗传转化的影响第70-72页
4 RIPs 基因对甜菜的转化第72-89页
   ·材料与方法第72-79页
     ·试验材料第72页
     ·试验方法第72-79页
   ·结果与分析第79-83页
     ·植物表达载体的构建第79页
     ·转化农杆菌的鉴定第79-80页
     ·抗性芽的获得第80-81页
     ·生根及移栽第81-82页
     ·转基因植株的PCR 检测第82-83页
   ·讨论第83-89页
     ·关于植物表达载体的构建第83-84页
     ·高效再生体系的建立是甜菜遗传转化的关键第84-85页
     ·农杆菌菌株类型对遗传转化的影响第85页
     ·适宜转化方法的选择是转化成功的关键第85-86页
     ·卡那霉素(Kan)筛选浓度对外植体存活率的影响第86-87页
     ·甜菜遗传转化过程中阳性转化细胞和再生植株的一致性第87-89页
5 结论第89-91页
致谢第91-92页
参考文献第92-105页
作者简介第105页

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