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养殖鲆鲽类细菌性病原的鉴定及免疫的初步研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
前言第9-17页
 第一节 鲆鲽类主要细菌性病原及当前防治措施第9-13页
  1 常见病原第9-12页
   ·弧菌属病原第9-10页
   ·链球菌病原第10-11页
   ·气单胞菌属病原第11页
   ·其它病原第11-12页
  2 细菌性疾病的防治措施第12-13页
   ·鱼苗的选择第12页
   ·水质环境的优化第12页
   ·饲料的选择第12页
   ·药物的合理使用第12-13页
   ·其他控制手段第13页
 第二节 鱼用疫苗的研究现状第13-17页
  1 疫苗的接种途径及影响因素第13-14页
  2 疫苗开发的限制性因素第14-16页
   ·细菌疫苗第14-15页
   ·病毒疫苗第15-16页
   ·寄生虫疫苗第16页
  3 小结第16-17页
第二章 养殖牙鲆哈维氏弧菌感染溃烂症研究第17-29页
 第一节 病原菌的分离及致病性分析第17-19页
  1 材料与方法第17-18页
   ·试验用鱼第17页
   ·试剂第17页
   ·病原菌的分离培养第17页
   ·人工感染试验第17-18页
  2 结果第18-19页
   ·患病症状第18页
   ·病原菌和寄生虫第18页
   ·人工感染实验第18-19页
  3 讨论第19页
 第二节 病原菌的鉴定及药物敏感实验第19-29页
  1 材料与方法第20-21页
   ·病原菌的形态观察第20页
   ·病原菌生理特征测定第20页
   ·病原菌生化特征测定第20页
   ·病原菌16S rDNA序列测定第20-21页
     ·PCR模板的制备第20页
     ·16S rDNA序列的PCR扩增第20-21页
     ·扩增产物的琼脂糖凝胶电泳第21页
     ·扩增产物的纯化和测序第21页
   ·病原菌16S rDNA的系统发育学分析第21页
   ·病原菌药物敏感实验第21页
  2 结果第21-27页
   ·形态特征第21-23页
   ·病原菌的生理生化特征第23-24页
   ·16S rDNA PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及序列测定第24-25页
     ·扩增产物的琼脂糖凝胶电泳第24页
     ·扩增产物的序列测定第24-25页
   ·16S rDNA的系发育树的构建第25-26页
     ·构建16S rDNA系统发育树的16S rDNA序列第25-26页
     ·16S rDNA序列系统发育树第26页
   ·药物敏感试验第26-27页
  3 讨论第27-29页
第三章 鳗弧菌的优化培养及灭活条件的研究第29-38页
 第一节 鳗弧菌优化培养和生长动态的研究第29-35页
  1 材料与方法第29-30页
   ·材料第29页
   ·鳗弧菌菌株的复壮与分离第29-30页
   ·LD_(50)的测定第30页
   ·菌体产量的测定第30页
   ·培养基初始pH对鳗弧菌生长的影响第30页
   ·不同的碳源对鳗弧菌生长的影响第30页
   ·培养基成份的不同配比对鳗弧菌生长的影响第30页
   ·优化试验的结果第30页
  2 结果第30-34页
   ·鳗弧菌的复壮分离第30-31页
   ·感染大菱鲆症状第31页
   ·LD_(50)结果第31页
   ·培养基初始pH对鳗弧菌生长的影响第31-33页
   ·碳源对鳗弧菌生长的影响第33页
   ·培养基成份的不同配比对鳗弧菌生长的影响第33-34页
   ·优化结果验证试验第34页
  3 讨论第34-35页
 第二节 鳗弧菌灭活条件的探索第35-38页
  1 材料与方法第35-36页
   ·材料第35-36页
   ·福尔马林对鳗弧菌的灭活试验第36页
   ·鳗弧菌灭活疫苗的安全性评价第36页
  2 结果第36-37页
   ·鳗弧菌灭活试验第36页
   ·鳗弧菌灭活疫苗的安全性评价第36-37页
  3 讨论第37-38页
第四章 双抗原夹心ELISA检测大菱鲆血清抗体效价方法的建立第38-46页
 1 材料与方法第38-40页
   ·试验材料第38页
   ·抗原的制备及处理第38页
   ·阳性和阴性血清的制备第38-39页
   ·辣根过氧化物酶标记抗原产量的确定第39页
   ·ELISA试验中包被抗原及标记抗原的最佳浓度确定第39-40页
   ·竞争性抑制试验第40页
   ·同微量凝集法敏感性的比较第40页
 2 结果第40-44页
   ·抗原的灭活效果及蛋白含量的测定第40页
   ·标记抗原所需HRP的量的确定第40-41页
   ·包被抗原及标记抗原最佳量的确定第41-43页
   ·竞争性抑制试验第43-44页
   ·与微量凝集法的比较第44页
 3 讨论第44-46页
第五章 大菱鲆浸浴免疫的初步研究第46-56页
 第一节 各种添加剂浸浴急性毒性试验第46-49页
  1 材料与方法第46-47页
   ·试验用鱼与试剂第46页
   ·试验方法第46-47页
  2 结果第47-49页
   ·SDS对大菱鲆的浸浴毒性试验第47页
   ·OP-10对大菱鲆的浸浴毒性试验第47-48页
   ·****对大菱鲆的浸浴毒性试验第48页
   ·大菱鲆对NaCl的耐受试验第48-49页
   ·盐酸消旋山莨宕碱注射液对大菱鲆的毒性试验第49页
  3 讨论第49页
 第二节 大菱鲆浸浴免疫试验第49-56页
  1 材料与方法第50-51页
   ·试验用鱼与试剂第50页
   ·免疫程序及样品的收集第50页
   ·溶菌活力第50页
   ·血清蛋白的浓度第50-51页
   ·血清效价的测定第51页
   ·攻毒试验第51页
   ·统计分析第51页
  2 结果第51-54页
   ·溶菌酶活力比较第51页
   ·血清总蛋白含量第51-52页
   ·抗体效价比较第52页
   ·攻毒结果第52-54页
  3 讨论第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63-65页
致谢第65-66页
攻读期间发表学术论文第66-67页

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