摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-6页 |
第一章 绪论 | 第6-19页 |
1. 翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的发现 | 第6页 |
2.T CTP 基因的结构 | 第6-7页 |
3.T CTP 蛋白的结构 | 第7-9页 |
4.T CTP 的生物学功能 | 第9-11页 |
5.T CTP 的基因克隆 | 第11-13页 |
6.T CTP 在水生生物学中的研究概况 | 第13-15页 |
7.R ACE 技术简介 | 第15页 |
8. 质谱在肽和蛋白分析中的应用 | 第15-17页 |
9. 大菱鲆简介 | 第17-18页 |
10. 论文立题依据、内容和意义 | 第18-19页 |
第二章 大菱鲆翻译控制肿瘤蛋白基因(SmTCTP)全长的克隆、测序及其序列分析 | 第19-36页 |
1. 前言 | 第19页 |
2. 实验材料 | 第19-22页 |
3. 实验方法 | 第22-29页 |
·大菱鲆皮肤组织的剥取 | 第22页 |
·大菱鲆总RNA 的分离 | 第22-23页 |
·大菱鲆总 RNA 的快速电泳检测 | 第23-24页 |
·第一链cDNA 的合成 | 第24页 |
·快速扩增cDNA 末端 | 第24-26页 |
·RACE 产物的凝胶回收 | 第26-27页 |
·RACE 产物与载体连接 | 第27页 |
·转化反应 | 第27-28页 |
·测序 | 第28-29页 |
·序列比较与系统进化分析 | 第29页 |
4. 结果与讨论 | 第29-36页 |
·SmTCTP 基因的克隆 | 第29-30页 |
·SmTCTP 基因的序列分析 | 第30-32页 |
·SmTCTP 蛋白序列的分析 | 第32-36页 |
第三章 大菱鲆翻译控制肿瘤蛋白(SmTCTP)mRNA 在不同皮肤组织中的表达分析 | 第36-49页 |
1. 前言 | 第36-37页 |
2. 实验材料 | 第37-38页 |
3. 实验方法 Northern blot | 第38-45页 |
·RNA 探针的合成和标记效率检测 | 第38-41页 |
·白化成体大菱鲆不同皮肤组织总RNA 的制备 | 第41-42页 |
·甲醛电泳 | 第42-43页 |
·转膜 | 第43-44页 |
·杂交 | 第44页 |
·杂交后洗膜及检测 | 第44-45页 |
4 结果与讨论 | 第45-49页 |
·限制性内切酶的选择及RNA 探针的合成 | 第45-46页 |
·探针效率的检测 | 第46页 |
·Northern 杂交结果及分析 | 第46-49页 |
第四章 大菱鲆翻译控制肿瘤蛋白(SmTCTP)的原核表达及鉴定 | 第49-65页 |
1. 前言 | 第49页 |
2. 实验材料 | 第49-52页 |
3. 实验方法 | 第52-59页 |
·SmTCTP 原核表达载体的构建 | 第52-56页 |
·诱导 SmTCTP 原核表达 | 第56-59页 |
·SmTCTP 原核表达蛋白的鉴定 | 第59页 |
4. 结果与讨论 | 第59-65页 |
·SmTCTP 原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
·His-tag SmTCTP 融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第60-62页 |
·His-tag SmTCTP 融合蛋白的鉴定 | 第62-65页 |
总结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录 | 第71-77页 |
A. SMART~(TM)5’RACE 反应原理 | 第71-72页 |
B. SMART~(TM)3’RACE 反应原理 | 第72-73页 |
C. 3'RACE 产物测序结果-1 | 第73-74页 |
D. 3'RACE 产物测序结果-2 | 第74-75页 |
E. 5'RACE 产物测序结果 | 第75-76页 |
F. Sm-TCTP 表达载体测序结果 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |