| 摘要 | 第1-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·骨唾液酸蛋白的研究现状 | 第12-16页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·BSP的生物学功能 | 第13-16页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第16-18页 |
| ·毕赤酵母的生长特性 | 第16-17页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特点 | 第17-18页 |
| ·分泌蛋白的糖化特征 | 第18页 |
| ·rhBSP的分离纯化 | 第18-20页 |
| ·金属离子亲和层析在纯化融合型rhBSP中的应用 | 第18-19页 |
| ·非融合型重组骨唾液蛋白的纯化 | 第19-20页 |
| ·本课题的研究背景及意义 | 第20-21页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 融合型重组人骨唾液酸蛋白的分离纯化 | 第22-32页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·实验菌株 | 第22页 |
| ·实验仪器设备 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·溶液 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·融合型rhBSP的表达 | 第26页 |
| ·发酵上清的浓缩 | 第26页 |
| ·融合型rhBSP的Ni-NTA亲和层析纯化 | 第26-27页 |
| ·蛋白溶液的脱盐 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
| ·Western blotting鉴定 | 第28-29页 |
| ·融合型rhBSP浓度的测定 | 第29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-32页 |
| ·融合型rhBSP的分泌表达 | 第29页 |
| ·融合型rhBSP与Ni-NTA介质的作用条件 | 第29-30页 |
| ·融合型rhBSP的亲和层析纯化 | 第30-32页 |
| 第三章 非融合型rhBSP的纯化与生物活性研究 | 第32-45页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·实验菌株 | 第32页 |
| ·实验仪器设备 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·溶液 | 第33-35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·发酵条件的优化 | 第35-36页 |
| ·非融合型rhBSP的表达纯化 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE | 第37页 |
| ·非融合型rhBSP浓度的测定 | 第37页 |
| ·羟基磷灰石晶体生长抑制试验 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·发酵条件的优化 | 第38-41页 |
| ·rhBSP与Aldehyde-Resin HP FF介质的偶联 | 第41-42页 |
| ·非融合型rhBSP的免疫亲和层析纯化 | 第42-43页 |
| ·rhBSP的抑制羟基磷灰石晶体生长活性 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 结论与展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第53页 |