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猪水疱病病毒衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗研究

第一章 绪论第1-15页
   ·研究背景、目的和意义第12-13页
   ·研究内容与方法第13-15页
第二章 猪水疱病病毒衣壳蛋白基因的克隆与序列分析第15-24页
   ·材料与方法第16-20页
     ·细胞、毒株、工程菌株和质粒第16页
     ·引物的设计与合成第16-18页
     ·病毒RNA的提取第18页
     ·反转录合成cDNA第一链第18页
     ·PCR扩增cDNA第18-19页
     ·cDNA的克隆、鉴定及测序第19页
     ·衣壳蛋白基因核苷酸及其推导的氨基酸序列的比较分析第19页
     ·系统进化树分析第19-20页
   ·结果与讨论第20-24页
   ·SVDV HK'70株衣壳蛋白基因RNA的RT-PCR扩增和cDNA克隆第20页
   ·SVOV HK'70株衣壳蛋白基因序列分析第20-21页
   ·系统进化树分析第21-24页
第三章 猪水疱病病毒衣壳蛋白的二级结构和抗原表位预测第24-32页
   ·材料与方法第25页
     ·SVDV衣壳蛋白氨基酸序列第25页
     ·SVOV衣壳蛋白二级结构预测第25页
     ·SVDV衣壳蛋白B细胞抗原表位的预测第25页
   ·结果第25-30页
     ·SVDV VP1蛋白的二级结构和抗原表位第25-27页
     ·SVDV VP2蛋白的二级结构和抗原表位第27-28页
     ·SVDV VP3蛋白的二级结构和抗原表位第28-30页
   ·讨论第30-32页
第四章 猪水疱病病毒衣壳蛋白基因真核复制子载体的构建和体外表达第32-41页
   ·材料与方法第33-37页
     ·细胞、菌株和质粒第33-34页
     ·主要试剂第34页
     ·引物的设计和合成第34页
     ·重组真核复制子载体的构建第34-35页
     ·重组质粒的制备和纯化第35-36页
     ·BHK-21细胞的转染第36页
     ·RT-PCR法检测转染细胞目的基因的表达第36页
     ·间接免疫荧光检测第36页
     ·双抗体夹心ELISA检测第36-37页
   ·结果第37-39页
     ·目的基因的获得第37页
     ·真核表达质粒的构建及鉴定第37页
     ·重组质粒的序列测定及分析第37页
     ·RT-PCR法检测结果第37-38页
     ·间接免疫荧光检测结果第38页
     ·双抗体夹心ELISA检测第38-39页
   ·讨论第39-41页
第五章 猪水疱病病毒衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗对豚鼠的免疫效果研究第41-49页
   ·材料与方法第42-45页
     ·细胞、病毒、质粒和实验动物第42-43页
     ·主要试剂第43页
     ·质粒大量提取第43页
     ·实验动物免疫第43页
     ·SVDV特异抗体的检测第43-44页
     ·血清中和抗体的检测第44页
     ·豚鼠淋巴细胞增殖试验第44-45页
   ·结果第45-46页
     ·SVDV特异抗体的产生第45页
     ·血清中和抗体的检测第45-46页
     ·淋巴细胞增殖试验第46页
   ·讨论第46-49页
第六章 猪水疱病病毒衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗对猪的免疫保护试验第49-58页
   ·材料和方法第50-53页
     ·细胞、病毒、质粒和实验动物第50页
     ·主要试剂第50-51页
     ·免疫用质粒的制备第51页
     ·实验动物免疫第51页
     ·SVDV特异性抗体检测第51页
     ·血清中和抗体的检测第51-52页
     ·淋巴细胞增殖试验第52-53页
     ·攻毒保护试验第53页
   ·结果第53-55页
     ·SVDV特异性抗体的检测第53-54页
     ·血清中和抗体的检测第54-55页
     ·淋巴细胞增殖试验第55页
     ·攻毒保护试验第55页
   ·讨论第55-58页
第七章 结论第58-59页
第八章 文献综述第59-76页
   ·猪水疱病研究进展第59-71页
     ·猪水疱病的历史和流行概况第59-60页
     ·猪水疱病的病原学特性第60-61页
     ·发病机理和临床症状第61-63页
     ·猪水疱病的流行病学特性第63-64页
     ·诊断第64-66页
     ·猪水疱病病毒的分子生物学特性第66-71页
   ·自杀性DNA疫苗第71-76页
     ·甲病毒的特点第71-72页
     ·甲病毒复制子载体的构成和特点第72-73页
     ·自杀性DNA疫苗的优点第73页
     ·自杀性DNA疫苗诱导细胞凋亡的机理及其免疫机理第73-74页
     ·自杀性DNA疫苗的初步应用第74-75页
     ·存在的问题和展望第75-76页
参考文献第76-86页
致谢第86-87页
作者简历第87-88页

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