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促红细胞生成素对缺血导致视网膜神经节细胞损伤的保护作用及其机制

作者简介及学术成果第1-14页
第一章 引言第14-18页
第二章 文献综述第18-44页
 一、Epo与中枢神经系统第19-30页
  (一) Epo的分子生物学第19-20页
  (二) Epo在神经发育中的作用第20-21页
  (三) Epo和 EpoR在中枢神经系统第21页
  (四) Epo在神经系统和视网膜的作用第21-24页
  (五) EPo介导的神经保护作用机制和信号传导通路第24-30页
 二、视网膜神经节细胞的损伤机制第30-37页
 三、视网膜神经节细胞(RGCs)的保护第37-39页
 四、视网膜缺血/再灌注模型的损伤机制第39-44页
第三章 Epo对缺血再灌损伤视网膜神经节细胞的影响第44-94页
 第一节 Epo对缺血视网膜神经节细胞离子通道的影响第44-59页
  一、实验动物第44页
  二、主要仪器第44页
  三、药品与试剂第44-45页
  四、实验方法第45-50页
   (一) 所需溶液配制第45-46页
   (二) 视网膜神经节细胞的培养第46-48页
   (三) 膜片钳实验装置第48-49页
   (四) 全细胞膜片钳实验方法第49-50页
   (五) 实验分组第50页
   (六) 实验数据的采集和处理第50页
   (七) 统计学方法第50页
  五、实验结果第50-59页
   (一) RGCs鉴定结果第50-52页
   (二) RGCs钙通道电流的特性第52页
   (三) 缺氧RGCs钙通道电流(I_(Ca))的特性第52-53页
   (四) 不同浓度EPO对缺氧RGCs钙通道电流的阻断作用第53-54页
   (五) EPO降低谷氨酸引起的RGCs自发放电增多第54-55页
   (六) EPO降低RGCs谷氨酸门控离子电流(I_(Ca))第55-57页
   (七) 不同浓度EPO对缺氧RGCs钠通道电流的阻断作用第57-59页
 第二节 Fluo-3-AM荧光染色视网膜神经节细胞游离Ca~(2+)浓度的测定第59-66页
  一、原理第59页
  二、实验方法第59-60页
  三、实验结果第60-66页
 第三节 EPO对缺血再灌注损伤视网膜神经节细胞的影响第66-94页
  一、实验动物第66页
  二、主要仪器第66页
  三、药品与试剂第66-67页
  四、实验方法第67-73页
   (一) 视网膜缺血再灌注模型的建立第67-68页
   (二) 实验分组第68页
   (三) 给药方法第68页
   (四) 视网膜电图(electroretinography ERG)的测定第68-69页
   (五) 标本的取材、固定第69页
   (六) 视网膜铺片技术和视网膜神经节细胞计数方法第69页
   (七) TUNEL染色第69-70页
   (八) 免疫组织化学染色第70-71页
   (九) RT-PCR对bcl-2、caspase-3的半定量测定第71-72页
   (十) Western Blot对bcl-2、Caspase-3蛋白表达量的测定第72-73页
   (十一) 结果观察及数据处理第73页
   (十二) 统计学分析第73页
  五、实验结果第73-94页
   (一) ERG测定结果第73-75页
   (二) 视网膜平铺技术的视网膜神经节细胞计数第75-78页
   (三) 原位凋亡细胞检测结果第78-81页
   (四) 免疫组织化学染色结果第81-89页
   (五) RT-PCR测定结果第89-91页
   (六) Western Blotting测定结果第91-94页
第四章 讨论第94-104页
 一、EPO的神经保护作用第94页
 二、EPO通过减少凋亡和维持完整细胞数量,达到保护受损伤大鼠的视网膜神经节细胞第94-95页
 三、细胞凋亡第95-104页
  (一) 概念第95-96页
  (二) 诱发细胞凋亡过程的关键因子第96页
  (三) 细胞凋亡的过程及机理第96-97页
  (四) 细胞凋亡的形态特征第97页
  (五) 线粒体在细胞凋亡中的重要性第97-104页
第五章 结论第104-105页
参考文献第105-124页
中文摘要第124-130页
ABSTRACT第130-137页
致谢第137页

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