| 第一章 前言 | 第1-17页 |
| ·胰岛素样生长因子1概述 | 第7-11页 |
| ·IGF-1的结构与功能 | 第7-9页 |
| ·IGF-1受体与结合蛋白 | 第9-10页 |
| ·IGF-1的应用前景 | 第10-11页 |
| ·胰岛素样生长因子1重组类似物的研究 | 第11-14页 |
| ·重组类似物的结构和功能 | 第11-12页 |
| ·国内外研究现状 | 第12-13页 |
| ·重组类似物的应用 | 第13-14页 |
| ·研究胰岛素样生长因子重组类似物的意义 | 第14-15页 |
| ·本文设想及方案 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第17-33页 |
| ·实验材料 | 第17-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂及配制 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第33-60页 |
| ·LR3-IGF1 cDNA的获得 | 第33-34页 |
| ·pET-LR3-IGF1 原核表达载体的构建及表达 | 第34-38页 |
| ·pET-LR3-IGF1 表达载体的构建 | 第34页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第34-36页 |
| ·LR3-IGF1目的蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·以包涵体为表达形式的确定 | 第37页 |
| ·高效表达菌株的筛选 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38页 |
| ·发酵工艺的研究 | 第38-41页 |
| ·不同时间(OD值)添加相同浓度的IPTG | 第38-39页 |
| ·相同时间(OD值)添加不同浓度的IPTG | 第39-40页 |
| ·pET-LR3-IGF1工程菌在40升发酵罐上的发酵及生长曲线 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41页 |
| ·纯化工艺的研究 | 第41-50页 |
| ·包涵体的提取 | 第41-42页 |
| ·包涵体的变性和复性 | 第42页 |
| ·SP Sepharose F.F阳离子交换层析 | 第42-43页 |
| ·Phenyle Sepharose F.F层析 | 第43-46页 |
| ·Sephacryl S-100HR层析 | 第46-50页 |
| ·小结 | 第50页 |
| ·LR3-IGF1蛋白质的检测分析 | 第50-56页 |
| ·蛋白质纯度分析 | 第50-51页 |
| ·蛋白定量 | 第51-52页 |
| ·分子量的测定 | 第52页 |
| ·等电点测定 | 第52-53页 |
| ·活性测定 | 第53-54页 |
| ·紫外光谱扫描 | 第54页 |
| ·外源性DNA残留量的测定 | 第54-55页 |
| ·宿主蛋白残留量的测定 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| ·LR3-IGF1 的稳定性研究 | 第56-60页 |
| ·pH 值对样品活性的影响 | 第56-57页 |
| ·温度对样品活性的影响 | 第57-58页 |
| ·保护剂和赋性剂 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 中文摘要 | 第66-69页 |
| 英文摘要 | 第69-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 导师及作者简介 | 第73-75页 |