阳离子聚合物基因转染载体的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 注释表 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·基因治疗 | 第8-12页 |
| ·基因治疗的策略 | 第8-9页 |
| ·基因治疗的原则 | 第9-10页 |
| ·目的基因的选择 | 第9页 |
| ·受体细胞的选择 | 第9页 |
| ·基因表达载体的选择 | 第9-10页 |
| ·基因治疗中有待解决的关键问题 | 第10-12页 |
| ·基因转染系统的安全性 | 第10页 |
| ·目的基因的有效性 | 第10-11页 |
| ·基因表达的稳定性 | 第11页 |
| ·目的基因转染的靶向性问题 | 第11-12页 |
| ·基因治疗的基因导入系统 | 第12-18页 |
| ·病毒介导的基因转移系统 | 第12-13页 |
| ·非病毒介导的基因传递系统 | 第13-18页 |
| ·脂质体介导的基因传递系统 | 第13-14页 |
| ·聚电解质复合物在基因传递系统中应用 | 第14-18页 |
| ·前景与问题 | 第18页 |
| ·本论文的研究内容 | 第18-20页 |
| 2 交联剂和聚合物的合成及表征 | 第20-32页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验内容 | 第21-27页 |
| ·己二酸二缩水甘油酯的合成 | 第21-22页 |
| ·己二酸钠的制备 | 第21页 |
| ·己二酸二缩水甘油酯(DIGA)的合成 | 第21-22页 |
| ·PEI衍生物的合成 | 第22-27页 |
| ·bPEI 2000的精制 | 第22页 |
| ·不同PEI衍生物的合成 | 第22-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-31页 |
| ·己二酸二缩水甘油酯的结果与讨论 | 第27-28页 |
| ·PEI与交联剂的反应的结果 | 第28-30页 |
| ·电泳阻滞结果 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 3 聚合物作为质粒DNA转染载体的性能研究 | 第32-47页 |
| ·阳离子聚合物的基因传递机制 | 第32-34页 |
| ·DNA的复合 | 第32-33页 |
| ·细胞接触 | 第33页 |
| ·从内涵体中释放 | 第33页 |
| ·核运输 | 第33页 |
| ·载体分解 | 第33-34页 |
| ·影响阳离子聚合物载体的基因转染效率的因素 | 第34页 |
| ·阳离子聚合物载体的毒性 | 第34-35页 |
| ·实验材料及方法 | 第35-38页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·pEGFP质粒转化E.coli. | 第35页 |
| ·大量质粒DNA的制备 | 第35-36页 |
| ·Polymer／DNA复合物的制备 | 第36页 |
| ·细胞转染实验 | 第36-37页 |
| ·EGFP的表达及荧光显微镜观察和流式细胞仪分析 | 第37页 |
| ·细胞毒性实验 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-46页 |
| ·25-kDa bPEI的最佳转染条件的结果 | 第38-39页 |
| ·合成聚合物的转染结果 | 第39-43页 |
| ·筛选出的聚合物的细胞毒性试验结果 | 第43-45页 |
| ·筛选出的聚合物的结构性能讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
