| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 中英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一部分 芪重散中抗骨肉瘤有效成分的筛选 | 第15-23页 |
| 1 材料与方法 | 第15-16页 |
| 1.1 细胞株及培养条件 | 第15页 |
| 1.2 实验试剂 | 第15-16页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第16页 |
| 2 实验方法 | 第16-18页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第16-17页 |
| 2.2 细胞传代 | 第17页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第17页 |
| 2.4 细胞凋亡实验 | 第17页 |
| 2.5 细胞存活率实验 | 第17-18页 |
| 3 统计分析 | 第18页 |
| 4 实验结果 | 第18-22页 |
| 4.1 斑蝥素对骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第18-19页 |
| 4.2 毛蕊异黄酮对骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第19页 |
| 4.3 黄芪甲苷Ⅳ对骨肉瘤细胞凋亡的影响 | 第19-20页 |
| 4.4 重楼皂苷Ⅲ、Ⅵ和 Ⅶ对骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第20-21页 |
| 4.5 重楼皂苷Ⅰ和斑蝥素联合使用对骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第21-22页 |
| 5 分析与讨论 | 第22-23页 |
| 第二部分 斑蝥素体内外抑制骨肉瘤的生长 | 第23-33页 |
| 1.材料与方法 | 第23-24页 |
| 1.1 细胞株及培养条件 | 第23页 |
| 1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.1 细胞迁移实验 | 第24页 |
| 2.2 细胞浸润实验 | 第24-25页 |
| 2.3 细胞凋亡实验 | 第25页 |
| 2.4 细胞周期实验 | 第25-26页 |
| 2.5 蛋白提取及制备 | 第26页 |
| 2.6 Western Blot | 第26-27页 |
| 2.7 裸鼠实验 | 第27页 |
| 3 统计分析 | 第27-28页 |
| 4 实验结果 | 第28-32页 |
| 4.1 斑蝥素对骨肉瘤细胞周期分布的影响 | 第28页 |
| 4.2 斑蝥素对骨肉瘤细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第28-29页 |
| 4.3 斑蝥素对骨肉瘤细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 4.4 斑蝥素对骨肉瘤细胞迁移和浸润的影响 | 第30页 |
| 4.5 斑蝥素对裸鼠体内骨肉瘤生长的影响 | 第30-32页 |
| 5 分析与讨论 | 第32-33页 |
| 第三部分 斑蝥素抑制骨肉瘤生长的机制研究 | 第33-54页 |
| 实验一 :miR-214介导斑蝥素抗骨肉瘤的作用研究 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第34页 |
| 1.1 细胞株及培养条件 | 第34页 |
| 1.2 实验试剂 | 第34页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.1 基因芯片检测 | 第34-35页 |
| 2.2 RNA提取 | 第35页 |
| 2.3 实时荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 2.4 细胞克隆形成实验 | 第36页 |
| 2.5 细胞转染 | 第36-37页 |
| 3 统计分析 | 第37页 |
| 4 实验结果 | 第37-43页 |
| 4.1 基因芯片检测结果 | 第37-38页 |
| 4.2 miR-214在骨肉瘤组织和细胞中表达上调 | 第38-39页 |
| 4.3 斑蝥素抑制骨肉瘤细胞中miR-214的表达水平 | 第39页 |
| 4.4 miR-214介导斑蝥素降低骨肉瘤细胞的存活率 | 第39-40页 |
| 4.5 miR-214介导斑蝥素抑制骨肉瘤细胞克隆形成能力 | 第40-41页 |
| 4.6 miR-214介导斑蝥素抑制骨肉瘤细胞的迁移能力 | 第41-43页 |
| 5 分析与讨论 | 第43-46页 |
| 实验二 斑蝥素下调mi R-214/LEF1 信号抗骨肉瘤的机制研究 | 第46-50页 |
| 1.材料与方法 | 第46页 |
| 1.1 细胞株及培养条件 | 第46页 |
| 1.2 实验试剂 | 第46页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第46页 |
| 2.实验方法 | 第46页 |
| 2.1 miRNA靶基因预测 | 第46页 |
| 2.2 Western Blot检测 | 第46页 |
| 3 统计分析 | 第46页 |
| 4 实验结果 | 第46-48页 |
| 4.1 miR-214靶基因预测结果 | 第46-47页 |
| 4.2 miR-214靶基因验证结果 | 第47-48页 |
| 5 分析与讨论 | 第48-50页 |
| 实验三 :斑蝥素对Wnt/β-Catenin信号通路的影响 | 第50-54页 |
| 1 材料与方法 | 第50页 |
| 1.1 细胞株及培养条件 | 第50页 |
| 1.2 实验试剂 | 第50页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50页 |
| 2.1 细胞存活率实验 | 第50页 |
| 2.2 细胞迁移实验 | 第50页 |
| 3 统计分析 | 第50页 |
| 4 实验结果 | 第50-53页 |
| 4.1 斑蝥素抑制Wnt/β-Catenin信号通路的活性 | 第50-53页 |
| 5 分析与讨论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| References | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-72页 |
| 文献综述一 microRNA 与骨肉瘤相关性研究进展 | 第62-69页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 文献综述二 | 第69-70页 |
| 文献综述三 | 第70-71页 |
| 文献综述四 | 第71-72页 |
| 参与会议与获得奖项 | 第72页 |
