摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-51页 |
·小麦条锈病的危害及研究现状 | 第13-17页 |
·小麦条锈病的危害 | 第13页 |
·小麦条锈病的研究现状 | 第13-17页 |
·植物抗病的分子机制 | 第17-25页 |
·植物抗病基因研究进展 | 第17-20页 |
·植物过敏性反应研究进展 | 第20-23页 |
·植物系统获得抗病性(SAR)研究进展 | 第23-24页 |
·植物抗病基因介导的信号途径 | 第24-25页 |
·差减杂交技术、表达序列标签技术及其应用 | 第25-35页 |
·差减杂交技术 | 第25-31页 |
·表达序列标签(ESTs)技术 | 第31-35页 |
·生物信息学与ESTS 研究 | 第35-42页 |
·生物信息学的产生和定义 | 第35-36页 |
·生物信息学的国内外研究现状 | 第36-37页 |
·生物信息学数据库的特点 | 第37页 |
·生物信息学在ESTs 研究中的应用 | 第37-42页 |
·实时荧光定量PCR 技术 | 第42-49页 |
·PCR 技术从定性到定量的飞跃 | 第42页 |
·实时荧光定量PCR 技术原理 | 第42-43页 |
·荧光化学 | 第43-46页 |
·定量方法 | 第46-48页 |
·荧光定量PCR 技术在植物上的应用 | 第48-49页 |
·本研究的目的及意义 | 第49-50页 |
·技术路线 | 第50-51页 |
第二章 小麦不同器官总RNA 含量及不同提取方法的比较 | 第51-58页 |
·材料与方法 | 第51-54页 |
·生化试剂 | 第51-52页 |
·试验仪器 | 第52页 |
·植物材料 | 第52页 |
·小麦叶片总RNA 提取 | 第52-53页 |
·总RNA 中基因组DNA 的去除 | 第53-54页 |
·小麦叶片总RNA 的浓度及纯度检测 | 第54页 |
·小麦叶片总RNA 的完整性检测 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-56页 |
·小麦叶片总RNA 浓度及纯度检测 | 第54-55页 |
·不同器官总RNA 完整性检测 | 第55-56页 |
·结论与讨论 | 第56-58页 |
第三章 条锈菌诱导的小麦SSH 文库构建及ESTS 大规模生物信息学分析 | 第58-85页 |
·材料与方法 | 第58-68页 |
·主要仪器与试剂 | 第58-59页 |
·供试菌种和小麦品种 | 第59页 |
·接种和培养 | 第59页 |
·取样量及取样时间 | 第59页 |
·总RNA 提取与mRNA 分离纯化 | 第59-60页 |
·抑制差减杂交 | 第60-65页 |
·PCR 产物的纯化 | 第65页 |
·PCR 产物的载体连接反应 | 第65页 |
·感受态细胞的制备及连接产物的转化 | 第65-66页 |
·文库重组率检测 | 第66页 |
·文库片段大小检测 | 第66页 |
·大规模质粒提取 | 第66-67页 |
·序列测定 | 第67页 |
·序列分析 | 第67-68页 |
·结果与分析 | 第68-79页 |
·总RNA 提取结果 | 第68页 |
·RNA 浓度及纯度测定 | 第68页 |
·mRNA 质量检测结果 | 第68页 |
·抑制差减杂交检测结果 | 第68-70页 |
·SSH cDNA 文库质量评价及测序结果 | 第70-72页 |
·ESTs 获得与分析 | 第72-79页 |
·结论与讨论 | 第79-85页 |
·高质量RNA 是构建高质量文库的基础 | 第79页 |
·SSH 文库的质量检测 | 第79-80页 |
·SSH 技术的优缺点 | 第80-81页 |
·小麦接种条锈菌初期参与抗病过程的相关基因 | 第81-85页 |
第四章 小麦抗病相关基因的表达分析 | 第85-97页 |
·材料与方法 | 第85-90页 |
·小麦材料 | 第85页 |
·生化试剂及仪器 | 第85页 |
·菌株 | 第85-86页 |
·小麦叶片总RNA 的提取 | 第86页 |
·四条抗病相关ESTs 的反转录PCR 表达情况分析 | 第86-87页 |
·三条抗病相关基因的荧光定量检测 | 第87-90页 |
·结果与分析 | 第90-95页 |
·反转录PCR 验证抗病相关基因的表达情况 | 第90-91页 |
·荧光定量PCR 检测抗病相关基因的表达模式 | 第91-95页 |
·结论与讨论 | 第95-97页 |
第五章 两条小麦抗病相关基因的克隆及其生物信息学分析 | 第97-119页 |
·材料与方法 | 第97-101页 |
·两个小麦抗病相关基因的电子克隆及分析 | 第97-98页 |
·两个抗病相关基因的RACE 全长克隆及分析 | 第98-101页 |
·结果与分析 | 第101-116页 |
·抗病性相关基因的电子克隆 | 第101-105页 |
·RACE 全长基因及其生物信息学分析 | 第105-116页 |
·结论与讨论 | 第116-119页 |
·电子克隆技术应用于小麦基因克隆的可行性及其优缺点 | 第116页 |
·RACE 技术的优缺点 | 第116-117页 |
·过敏性反应诱导蛋白 | 第117-118页 |
·神经鞘氨醇酶 | 第118-119页 |
结论 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-133页 |
附录 | 第133-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
作者简介 | 第144页 |