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功能基因组技术平台上水稻杂种优势分子机理的研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-11页
第一章 前言第11-30页
 1 作物杂种优势分子机理研究进展第11-18页
   ·理论现状第11-14页
     ·假说第11-12页
     ·基因互作效应第12页
     ·核质互作第12-14页
   ·双亲遗传差异与杂种优势第14-15页
   ·基因表达调控与杂种优势第15-18页
     ·基因表达差异第16-17页
     ·基因表达调控第17-18页
 2 水稻光温敏核不育基因研究进展第18-22页
   ·光敏核不育基因表达条件第19页
   ·光温敏核不育基因的遗传分析第19-20页
     ·农垦58S及其衍生的光温敏核不育系的育性遗传第20页
     ·其他一些不育基因源的光温敏核不育系的育性遗传第20页
   ·水稻光温敏核不育基因的定位第20-22页
     ·特异mRNA的寻找第21页
     ·特异蛋白的寻找第21-22页
     ·光温敏核不育基因定位方法第22页
 3 植物功能基因组学研究进展第22-29页
   ·功能基因组的研究内容第22-23页
   ·功能基因组研究的主要策略第23-29页
     ·插入突变第24-25页
     ·表达序列标签测序技术(EST)第25页
     ·基因表达系统分析(SAGE)第25页
     ·基因芯片第25-26页
     ·蛋白质组技术第26-28页
     ·生物信息学第28-29页
 4 研究内容和研究目标第29-30页
   ·研究内容第29页
     ·水稻杂种优势分析第29页
     ·P/TGMS水稻表达谱的比较分析第29页
   ·研究目标第29-30页
     ·在表达水平上解析水稻杂种优势的分子机理第29页
     ·筛选和鉴定P/TGMS水稻育性转换时期的特异表达产物第29-30页
第二章 功能基因组技术平台上水稻杂种优势分子机理的研究第30-63页
 第一部分 运用表达谱基因芯片对水稻杂种优势的初步分析第30-35页
  1 材料和方法第30-31页
   ·材料第30页
   ·采样第30页
   ·分离世代集团(BULK)的设置第30页
   ·表达谱的获得第30-31页
   ·表达产物的显性表达水平的定义和统计第31页
  2 结果与分析第31-33页
   ·总RNA抽提效果第31页
   ·表达谱比较第31-33页
   ·差异表达基因的分类第33页
   ·显性表达产物与杂种优势的关系第33页
  3 讨论第33-35页
 第二部分 运用基因芯片、蛋白质组技术对P/TGMS基因的研究第35-63页
  1 材料第35页
   ·选材第35页
   ·取材第35页
  2 方法第35-42页
   ·基因芯片实验程序第35-38页
     ·总RNA的提取第36页
     ·用aa-dUTP标记RNA第36页
     ·纯化aa-dUTP标记的cDNA第36-37页
     ·偶联CY3/CY5标记第37页
     ·淬灭并纯化第37页
     ·杂交第37页
     ·洗脱第37-38页
     ·图片扫描和数据分析第38页
   ·蛋白质组实验程序第38-42页
     ·样品制备第38-39页
     ·样品蛋白质含量的测定第39-40页
     ·双向凝胶电泳第40-41页
     ·考马斯亮蓝染色第41页
     ·蛋白质消化第41-42页
     ·质谱分析第42页
  3 结果与分析第42-60页
   ·基因芯片结果与分析第42-50页
     ·基因芯片差异表达基因图谱第42-44页
     ·差异表达基因的染色体定位第44页
     ·差异表达基因的生物信息学分析第44-46页
     ·一些共同差异表达基因的BlastX分析结果第46-50页
   ·蛋白质组结果与分析第50-59页
     ·蛋白含量的测定第50-51页
     ·双向电泳结果第51-53页
     ·质谱结果及功能分析第53-59页
   ·基因芯片与蛋白组实验数据的综合分析第59-60页
  4 讨论第60-63页
   ·实验方法的改进第60-61页
     ·技术路线的设计第60页
     ·实验材料的选择及处理第60-61页
   ·差异表达基因的定位分析第61-62页
     ·农垦58S及其衍生光温敏核不育系育性基因的定位第61页
     ·非农垦58S不育基因源的光温敏核不育系育性基因的定位第61-62页
   ·差异表达基因与蛋白的相关性分析第62-63页
小结第63-64页
参考文献第64-75页
附录第75-85页
 1 博星表达谱基因芯片实验操作流程第75-79页
 2 杂种优势表达谱基因芯片荧光标记与样品的对应关系第79页
 3 杂种优势表达谱基因芯片杂交结果第79-81页
 4 水稻育性芯片差异表达基因染色体定位图的解释第81-82页
 5 差异表达蛋白的质谱分析M/Z图第82-85页
致谢第85页

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