中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-30页 |
1 作物杂种优势分子机理研究进展 | 第11-18页 |
·理论现状 | 第11-14页 |
·假说 | 第11-12页 |
·基因互作效应 | 第12页 |
·核质互作 | 第12-14页 |
·双亲遗传差异与杂种优势 | 第14-15页 |
·基因表达调控与杂种优势 | 第15-18页 |
·基因表达差异 | 第16-17页 |
·基因表达调控 | 第17-18页 |
2 水稻光温敏核不育基因研究进展 | 第18-22页 |
·光敏核不育基因表达条件 | 第19页 |
·光温敏核不育基因的遗传分析 | 第19-20页 |
·农垦58S及其衍生的光温敏核不育系的育性遗传 | 第20页 |
·其他一些不育基因源的光温敏核不育系的育性遗传 | 第20页 |
·水稻光温敏核不育基因的定位 | 第20-22页 |
·特异mRNA的寻找 | 第21页 |
·特异蛋白的寻找 | 第21-22页 |
·光温敏核不育基因定位方法 | 第22页 |
3 植物功能基因组学研究进展 | 第22-29页 |
·功能基因组的研究内容 | 第22-23页 |
·功能基因组研究的主要策略 | 第23-29页 |
·插入突变 | 第24-25页 |
·表达序列标签测序技术(EST) | 第25页 |
·基因表达系统分析(SAGE) | 第25页 |
·基因芯片 | 第25-26页 |
·蛋白质组技术 | 第26-28页 |
·生物信息学 | 第28-29页 |
4 研究内容和研究目标 | 第29-30页 |
·研究内容 | 第29页 |
·水稻杂种优势分析 | 第29页 |
·P/TGMS水稻表达谱的比较分析 | 第29页 |
·研究目标 | 第29-30页 |
·在表达水平上解析水稻杂种优势的分子机理 | 第29页 |
·筛选和鉴定P/TGMS水稻育性转换时期的特异表达产物 | 第29-30页 |
第二章 功能基因组技术平台上水稻杂种优势分子机理的研究 | 第30-63页 |
第一部分 运用表达谱基因芯片对水稻杂种优势的初步分析 | 第30-35页 |
1 材料和方法 | 第30-31页 |
·材料 | 第30页 |
·采样 | 第30页 |
·分离世代集团(BULK)的设置 | 第30页 |
·表达谱的获得 | 第30-31页 |
·表达产物的显性表达水平的定义和统计 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-33页 |
·总RNA抽提效果 | 第31页 |
·表达谱比较 | 第31-33页 |
·差异表达基因的分类 | 第33页 |
·显性表达产物与杂种优势的关系 | 第33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第二部分 运用基因芯片、蛋白质组技术对P/TGMS基因的研究 | 第35-63页 |
1 材料 | 第35页 |
·选材 | 第35页 |
·取材 | 第35页 |
2 方法 | 第35-42页 |
·基因芯片实验程序 | 第35-38页 |
·总RNA的提取 | 第36页 |
·用aa-dUTP标记RNA | 第36页 |
·纯化aa-dUTP标记的cDNA | 第36-37页 |
·偶联CY3/CY5标记 | 第37页 |
·淬灭并纯化 | 第37页 |
·杂交 | 第37页 |
·洗脱 | 第37-38页 |
·图片扫描和数据分析 | 第38页 |
·蛋白质组实验程序 | 第38-42页 |
·样品制备 | 第38-39页 |
·样品蛋白质含量的测定 | 第39-40页 |
·双向凝胶电泳 | 第40-41页 |
·考马斯亮蓝染色 | 第41页 |
·蛋白质消化 | 第41-42页 |
·质谱分析 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-60页 |
·基因芯片结果与分析 | 第42-50页 |
·基因芯片差异表达基因图谱 | 第42-44页 |
·差异表达基因的染色体定位 | 第44页 |
·差异表达基因的生物信息学分析 | 第44-46页 |
·一些共同差异表达基因的BlastX分析结果 | 第46-50页 |
·蛋白质组结果与分析 | 第50-59页 |
·蛋白含量的测定 | 第50-51页 |
·双向电泳结果 | 第51-53页 |
·质谱结果及功能分析 | 第53-59页 |
·基因芯片与蛋白组实验数据的综合分析 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
·实验方法的改进 | 第60-61页 |
·技术路线的设计 | 第60页 |
·实验材料的选择及处理 | 第60-61页 |
·差异表达基因的定位分析 | 第61-62页 |
·农垦58S及其衍生光温敏核不育系育性基因的定位 | 第61页 |
·非农垦58S不育基因源的光温敏核不育系育性基因的定位 | 第61-62页 |
·差异表达基因与蛋白的相关性分析 | 第62-63页 |
小结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-75页 |
附录 | 第75-85页 |
1 博星表达谱基因芯片实验操作流程 | 第75-79页 |
2 杂种优势表达谱基因芯片荧光标记与样品的对应关系 | 第79页 |
3 杂种优势表达谱基因芯片杂交结果 | 第79-81页 |
4 水稻育性芯片差异表达基因染色体定位图的解释 | 第81-82页 |
5 差异表达蛋白的质谱分析M/Z图 | 第82-85页 |
致谢 | 第85页 |