| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯(PHA)的概述 | 第11页 |
| ·1 PHA 的历史及简介 | 第11-16页 |
| ·PHA 的物化性质 | 第12-14页 |
| ·PHA 的生物学功能研究 | 第14-15页 |
| ·PHA 的应用 | 第15-16页 |
| ·PHA 合成途径及其与中心代谢途径的偶联 | 第16-18页 |
| ·PHA 代谢途径中的酶和相关基因 | 第18-26页 |
| ·PHA 合酶——PHA 合成的关键酶 | 第20-23页 |
| ·PHA 合酶基因的克隆方案 | 第20-21页 |
| ·PHA 合酶的分类及其基因的组织形式 | 第21-23页 |
| ·PHA 合成中提供单体的酶 | 第23-24页 |
| ·β-酮硫解酶(PhaA) | 第23页 |
| ·乙酰乙酰-CoA 还原酶(PhaB) | 第23页 |
| ·(R)-3-羟基脂酰-酰基载体蛋白-CoA 转移酶(PhaG) | 第23-24页 |
| ·(R)-特异的烯脂酰-CoA 水合酶(PhaJ) | 第24页 |
| ·PHA 的生产与基因工程 | 第24-26页 |
| ·PHBHHX 合成菌株的研究现状 | 第26-27页 |
| ·PHA 的研究展望 | 第27-28页 |
| ·论文工作的目的及意义 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料与基本实验方法 | 第30-41页 |
| ·菌种和质粒 | 第30-31页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·质粒 | 第30-31页 |
| ·常用酶和生化试剂 | 第31-33页 |
| ·分子生物学常用酶制剂 | 第31-32页 |
| ·分子生物学常生化试剂 | 第32页 |
| ·DNA 分子标准 | 第32页 |
| ·试剂盒 | 第32-33页 |
| ·仪器与设备 | 第33页 |
| ·常用实验操作方法 | 第33-39页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第33-35页 |
| ·基本矿物培养基(MS)的配制 | 第33-34页 |
| ·LB (pH7.0-7.2)培养基的配制 | 第34页 |
| ·常用抗生素的配制 | 第34-35页 |
| ·菌种的培养及保存 | 第35页 |
| ·种子培养 | 第35页 |
| ·细菌摇瓶培养条件 | 第35页 |
| ·细菌的培养与保存 | 第35页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第35-38页 |
| ·基因组DNA 的小量制备 | 第36页 |
| ·申能博彩质粒快速提取试剂盒 | 第36-37页 |
| ·申能博彩DNA 快速纯化∕回收试剂盒 | 第37-38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳操作技术 | 第38页 |
| ·大肠杆菌电转化感受态细胞的制备和转化 | 第38页 |
| ·嗜水气单胞菌的接合转化 | 第38-39页 |
| ·重组质粒菌落的鉴定 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39页 |
| ·重组质粒菌落的蓝白斑筛选 | 第39页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第39页 |
| ·应用气相色谱(GC)对PHA 进行检测 | 第39-40页 |
| ·样品准备 | 第39-40页 |
| ·标样的制备 | 第40页 |
| ·GC 分析 | 第40页 |
| ·分子设计辅助软件和网上数据资源 | 第40-41页 |
| 第三章 构建A. hydrophila 4AK4 基因工程菌以提高PHBHHx 的含量并调控其单体比例 | 第41-60页 |
| ·实验设计 | 第41页 |
| ·含单基因和双基因重组A. hydrophila 4AK4 的构建及其PHBHHx 的积累 | 第41-49页 |
| ·通过PCR 方法扩增A. punctata 中PHA 合成相关基因和W. eutropha 中的phaB 基因 | 第41-44页 |
| ·重组质粒在E. coli 中的构建 | 第44-47页 |
| ·含单基因和双基因重组A. hydrophila 4AK4 的构建 | 第47页 |
| ·含单基因和双基因重组菌A. hydrophila 4AK4 中PHBHHx 的积累 | 第47-49页 |
| ·含三基因重组A. hydrophila 4AK4 的构建及其PHBHHx 的积累 | 第49-54页 |
| ·三基因重组A. hydrophila 4AK4 的构建 | 第49-53页 |
| ·三基因重组A. hydrophila 4AK4 中PHBHHx 的合成 | 第53-54页 |
| ·丙烯酸对A. hydrophila 4AK4 合成PHBHHx 的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-60页 |
| 第四章 构建基因工程菌利用非相关碳源合成PHBHHx | 第60-73页 |
| ·目的 | 第60页 |
| ·‘tesA 和phaPCJ 基因对A. hydrophila 4AK4 利用糖类合成PHBHHx 的影响 | 第60-64页 |
| ·质粒pQd-tesA 和pQd-APCJ 在E. coli 中的构建 | 第60-62页 |
| ·重组A. hydrophila 4AK4 利用糖类合成PHBHHx | 第62-64页 |
| ·重组P. putida GPp104 利用糖类合成PHBHHx | 第64-68页 |
| ·质粒pQh-CAB 和pQh-CBG 在E. coli 中的构建 | 第64-66页 |
| ·重组P. putida GPp104 利用糖类合成PHA | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-73页 |
| 第五章 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第91页 |
